浙江修饰测序

云序优势 适用于血清血浆等微量样品： 此法减少DNA损失，并保留原始表达量，不同环状DNA间表达量比较更准确 专业的生物信息学分析： 专业的生物信息学团队，开发了高效识别分析环状DNA的算法，满足客户的各类深入数据分析需求。 一站式服务： 客户只需提供血清血浆，云序生物为您完成从样品准备、环状DNA富集、文库制备、上机测序到数据分析整套服务流程。 样本要求 样品类型： 血清血浆。 样品量： 血清血浆：5mL 样品运输及保存： EDTA抗凝，样品干冰运输。勿用肝素管取样（绿色盖子抗凝管）。云序生物可进一步提供高精度的O8G氧化图谱。浙江修饰测序

m6A修饰就是真核生物mRNA中较常见存在的一种修饰形式，得到了常见的关注和研究。除此之外，还存在着一种分子结构上非常相似的RNA修饰形式：m6Am——在m6A修饰的基础上，同一个腺苷酸残基的核糖的2’羟基也被甲基化，产生2’甲氧基结构（2’-O-CH3）。与m6A的常见分布所不同的是，m6Am修饰的分布主要局限于mRNA5’帽子结构下游的较早核苷酸残基上发生。该位点的m6Am修饰在进化上高度保守，无论是在斑马鱼、小鼠还是人类细胞中均有发现。江西遗传测序RNA甲基化环状RNA是新发现的一类新型非编码RNA分子。

LC-MS/MS检测核酸修饰水平实验原理：云序生物建立了一种基于LC-MS/MS平台的核酸修饰分析方法，定量4类DNA修饰（5-mdC、5-hmdC、5-fodC、6-mdA）和9类RNA修饰（m5C、m6A、Am、Gm、Cm、Um、m1A、m7G、ac4C），为表观遗传研究提供理想的技术平台。液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）能够很好的检测到极性高、稳定性差的化合物，并能够对物质进行精确的定量。LC-MS/MS法是目前所有总体甲基化水平分析方法中能够对含量极低的修饰碱基进行准确定性定量的方法；而将LCMS/MS法与一定的样品前处理方法相结合，能够更好地对各类生物样品中的DNA/RNA修饰进行检测。

案例1：环状DNA促进染色质的开放和促cancer基因的表达 原文：Wu, S., Turner, K.M., Nguyen, N. et al. Circular ecDNA promotes accessible chromatin and high oncogene expression. Nature (2019) . 期刊：Nature 影响因子：43.07 研究团队首先结合二代全基因组测序和光学匹配（optical mapping），从序列的角度发现，扩增出来的环状DNA形成了环状结构,不仅证实了tumour中的环状DNA确实是环状的，还证明了环状DNA的染色质是高度开放的，从而进一步阐释了环状DNA能大量表达cancer基因和其环状结构介导的超远距离相互作用，这也表明了环状DNA可能形成了新的基因调控回路和在驱动tumour异质性的机制研究中发挥着重大的作用。m7G MeRIP测序方式，采用预验证的商业化抗体和精心优化的实验流程。

组织细胞环状DNA测序服务云序组织细胞环状DNA测序服务（Circle-seq），采用多种方法高效地富集和扩增环状DNA，极大地提高了环状DNA的检出率。富集后，通过NGS测序高通量地检测细胞中所有的环状DNA分子。并通过严谨的环状DNA生信流程，实现了对环状DNA准确的识别和详细的基因注释。近日，Nature杂志上发表了颠覆性研究成果：在tumour中，主要的cancer基因转录本是直接来自于环状DNA的，而环状DNA的染色质是高度开放的，环状DNA的cancer基因能够大量表达，同时缺乏丝粒，导致不遵照孟德尔定律进行遗传，这种特性使得环状DNA是驱动tumour异质性的重要机制。云序生物环状RNA测序服务，采用Cloudseq CircRNA Enrichment Kit。陕西测序分析

云序生物利用启动子区(TSS-2000-TSS+2000)差异富集峰对应的基因进行GO功能分析。浙江修饰测序

样本要求样品类型细胞、组织或RNA，其他样本类型请电询。样品量a)细胞：1×108b)组织：500mg-5gc)RNA：100μg-300μg(OD260/280：1.6-2.3;RNA无明显降解)样品运输及保存样品运输：样品置于1.5mL离心管中，封口膜封好，干冰运输。样品保存：细胞样品或新鲜组织块可用TRIZOL或RNA保护剂处理，液氮冻存后-80℃保存；RNA样品可溶于乙醇或RNA-free的超纯水中，-80℃保存，避免反复冻融。目前，环状DNA不只可以作为一种新型特异的tumour标志物，还在tumour发生和发展机理研究中发挥着重大的潜在价值。浙江修饰测序

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