湖北外泌体研究

外泌体是细胞分泌的50-150nm粒径大小，并具有磷脂双分子层结构的微囊泡。由于外泌体是从母本细胞内部分泌出来，因此会带有母本细胞特定的遗传物质（蛋白、核酸等）。同时，外泌体的磷脂双分子层与普通细胞膜具有同源性，很容易被其母本细胞同类的或异类的细胞摄取，进而释放遗传物质进入这些摄取外泌体的细胞内部。由于上述特性的存在，外泌体无论在疾病诊断、微环境调控机制还是在药物载体改造等方面都受到了越来越多的关注，国自然资助的项目数和总金额也逐年攀升，占据近2年生物医学研究热点的榜首。通过商业化kit富集环状RNA，极大地提高了有效数据比例。湖北外泌体研究

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外泌体的内容物可以通过生物工程手段修饰。其中，将选择的蛋白内容物与外泌体的EV-sortingproteins通过细胞工程融合是较常用的方法。这种方法既可以在腔内储存可输送到靶细胞的内容物，也可以让内容物与靶细胞表面受体结合来增强它们的医治信号特性或靶向能力。因此，Silva等在单外泌体水平上，通过分析工程化外泌体技术对不同外泌体的EV-sortingproteins在促进蛋白内容物的装载效率进行了评估。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。

外泌体的提取方式： 1、离心法：此种方法得到的外泌体量多，但是纯度不足。 2、过滤离心：这种操作简单、省时，不影响外泌体的生物活性，但同样纯度不足。 3、密度梯度离心法：用此种方法分离到的外泌体纯度较高，但是前期准备工作繁杂 4、免疫磁珠法：这种方法可以保证外泌体形态的完整，特异性高、操作简单，但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。 5、色谱法：此种方法分离出的外泌体大小均一，但设备特殊，应用不普遍。外泌体可被大多数细胞分泌，并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分，还包括一些RNA成分。外泌体（Exosomes）是一种直径在40-100 nm的圆形单层膜结构，是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。

流式细胞仪不仅可以检测囊泡的大小、数量，而且通过荧光标记可以检测囊泡的来源，将囊泡进行分类，因此，流式细胞仪是进行囊泡快速、高通量、多参数检测的较优de选择。但是，传统流式细胞仪无法测量＜300nm的外泌体，因此很难进行精确地定量和定性分析。纳米颗粒跟zong分析技术（NanosightTrackingAnalysis，NTA）是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法，它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号，拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像，对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析，从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。广西测序外泌体LncRNA测序

研究外泌体在这些过程中的作用影响，发表文章的周期会较长，但是相对的，影响因子也高，很多都在10分以上。湖北外泌体研究

如今外泌体分析用于临床诊断和医治监控显然是一个重要领域。特定的跨膜蛋白信号可以识别tumour特异性的外泌体，而外泌体内蛋白的改变可以用于推断tumour细胞对医治措施的反应。虽然外泌体有如此大的临床价值，但是临床日常外泌体分析却十分困难，这是因为目前缺少足够灵敏且快速的试验平台，尤其是进行外泌体蛋白质分析。 目前人们利用电镜来分析外泌体的大小和形态，利用流式细胞仪来分析细胞表面标记，通过Western blot和ELISA等方法对蛋白进行分析，或通过qPCR和新一代测序NGS来分析RNA。湖北外泌体研究

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