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外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素(不成熟的树突状细胞)。其它一些外泌体中的蛋白包括多种的代谢类的酶( 烯醇化酶 1, 醛缩酶 1, PKM2, PGK1, PDIA3, GSTP1,DPP4, AHCY, TPL1, 抗氧化蛋白, P4HB, LDH, 亲环素 A,FASN, MDH1 和CNP)、核糖体蛋白(RPS3)、信号转导因子(黑色素瘤分化相关因子, ARF1, CDC42, 人类红细胞膜整合蛋白, SLC9A3R1)、粘附因子(MFGE8、整合素)、细胞骨架蛋白以及泛素等。外泌体大小均一, 直径在40~100 nm。浙江修饰外泌体分析

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外泌体(Exosomes)是一种直径在40~100 nm的圆形单层膜结构,是细胞外泌囊泡中体积较小的一种。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分,如微小RNA ( microRNA,miRNA)、长链非编码RNA和mRNA、环状RNA(circular RNA,circRNA)。外泌体所携带的这些RNA统称为外泌体来源RNA,具有完整的序列结构和生物活性。外泌体中大约含几百种miRNAs,通过外泌体miRNA测序,研究人员可获得与疾病相关的遗传特征(生物标志物),为将来tumour医治领域通过液体活检来寻找有效药 物。河南分析外泌体全转录测序色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不普遍。

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一类外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白,是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合,有文献报道称RAB4, RAB5和 RAB11主要出现在早期以及回收的核内体中,RAB7 和 RAB9主要出现在晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白(包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素(不成熟的树突状细胞)。

已有研究显示人类胚胎干细胞来源的MSC也可释放外泌体发挥心肌保护的作用。有研究在小鼠心肌缺血-再灌注损伤模型中发现,心肌内递送MSCs外泌体,可使心肌梗死面积减少,有效提高心肌细胞存活率。 蔡东升博士及其研究团队证明,下丘脑干细胞分泌的外泌体可以延缓衰老。该研究发现,随着下丘脑干细胞的消失,小鼠开始出现衰老症状。但随着植入经过改造的健康的下丘脑干细胞后,小鼠的衰老症状延迟并且寿命延长,进一步研究发现,该过程一部分是下丘脑干细胞通过释放外泌体来实现的。shou次报道的外泌体生物功能是红血球成熟过程中排出来的蛋白质。

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如今外泌体分析用于临床诊断和医治监控显然是一个重要领域。特定的跨膜蛋白信号可以识别tumour特异性的外泌体,而外泌体内蛋白的改变可以用于推断tumour细胞对医治措施的反应。虽然外泌体有如此大的临床价值,但是临床日常外泌体分析却十分困难,这是因为目前缺少足够灵敏且快速的试验平台,尤其是进行外泌体蛋白质分析。 目前人们利用电镜来分析外泌体的大小和形态,利用流式细胞仪来分析细胞表面标记,通过Western blot和ELISA等方法对蛋白进行分析,或通过qPCR和新一代测序NGS来分析RNA。样品运输:样品置于1.5mLEppendorf管中,封口膜封好,干冰运输。贵州平台外泌体分析

近年来,研究学者相继发现子宫液、输卵管液、胎盘中也存在外泌体。浙江修饰外泌体分析

外泌体是细胞分泌的50-150nm粒径大小,并具有磷脂双分子层结构的微囊泡。由于外泌体是从母本细胞内部分泌出来,因此会带有母本细胞特定的遗传物质(蛋白、核酸等)。同时,外泌体的磷脂双分子层与普通细胞膜具有同源性,很容易被其母本细胞同类的或异类的细胞摄取,进而释放遗传物质进入这些摄取外泌体的细胞内部。由于上述特性的存在,外泌体无论在疾病诊断、微环境调控机制还是在药物载体改造等方面都受到了越来越多的关注,国自然资助的项目数和总金额也逐年攀升,占据近2年生物医学研究热点的榜首。浙江修饰外泌体分析

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