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虽然研究者对细胞释放外泌体的具体过程知之甚少,但大多数含有内膜系统的哺乳动物细胞均可分泌外泌体。外泌体有多种分泌途径:一种是组成型分泌途径,例如免疫系统的B细胞、树突状细胞(DCs)和肥大细胞,对外泌体的研究大部分来自于免疫细胞,而目前在非免疫细胞中生理性外泌体的分泌很大程度上是未知的;另一种途径是通过细胞间相互作用刺激分泌外泌体,例如鼠DCs在与抗原特异性CD4+ T淋巴细胞相互作用时可分泌更高水平的外泌体[4];其他类型的细胞还可以通过钙离子载体或其他刺激分泌外泌体[5]。外泌体是细胞分泌的大小为40-100nm的盘状囊泡,分布于人体体液。中国香港研究外泌体环状RNA测序

中国香港研究外泌体环状RNA测序,外泌体

外泌体于1983年被发现,是由于细胞膜内吞形成内体,内体限制膜发生多处凹陷,向内出芽形成微囊泡,从而形成的具有动态亚细胞结构的多囊泡体。大多数类型的细胞均可分泌外泌体。构成外泌体的主要成分为蛋白质、核酸和脂质。外泌体有多种分泌途径,对细胞间通信、疾病的传播及组织修复具有重要的调节作用。外泌体与受体细胞的结合方式多种多样,外泌体可以将膜蛋白或其内容物转移至受体细胞,也可以直接与受体细胞膜融合;此外,外泌体上的跨膜蛋白还可以直接作用于受体细胞膜表面的信号分子。外泌体普遍存在于生物体的免疫应答反应中,外泌体可以通过介导促炎症反应来促进免疫反应,tumour细胞分泌的外泌体还可以抑制免疫反应。四川上海云序外泌体分析色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不普遍。

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外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素(不成熟的树突状细胞)。其它一些外泌体中的蛋白包括多种的代谢类的酶( 烯醇化酶 1, 醛缩酶 1, PKM2, PGK1, PDIA3, GSTP1,DPP4, AHCY, TPL1, 抗氧化蛋白, P4HB, LDH, 亲环素 A,FASN, MDH1 和CNP)、核糖体蛋白(RPS3)、信号转导因子(黑色素瘤分化相关因子, ARF1, CDC42, 人类红细胞膜整合蛋白, SLC9A3R1)、粘附因子(MFGE8、整合素)、细胞骨架蛋白以及泛素等。

外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分,如微小RNA ( microRNA,miRNA)、长链非编码RNA和mRNA、环状RNA(circular RNA,circRNA)。外泌体所携带的这些RNA统称为外泌体来源RNA,具有完整的序列结构和生物活性。外泌体中大约含几百种miRNAs,通过外泌体miRNA测序,研究人员可获得与疾病相关的遗传特征(生物标志物),为将来tumour医治领域通过液体活检来寻找有效药 物。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。外泌体在电镜下具有非常明显单层膜结构,通常为茶托型或一侧凹陷的半球形。

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外泌体在细胞间通讯中发挥重要作用,可以影响细胞的多种功能,包括细胞因子的产生、细胞增殖、细胞凋亡和代谢等。目前认为,外泌体主要通过以下方式与受体细胞结合:①外泌体将膜蛋白或其内容物转移至受体细胞,被受体细胞膜完全吞噬,这一过程需要非常规脂质LBPA和附属蛋白质Alix;②外泌体膜与受体细胞膜直接融合;③外泌体上的跨膜蛋白直接作用于受体细胞膜表面的信号分子。例如,滤泡树突细胞分泌的外泌体携MHC-跨膜蛋白,其可刺激B淋巴细胞和T淋巴细胞表面的信号分子。外泌体与受体细胞以何种方式结合取决于外泌体的大小及外泌体携带的物质。云序生物提供外泌体LncRNA测序,同时分析样品中全部外泌体来源LncRNA和mRNA。辽宁外泌体研究

外泌体鉴定方式:主要有四种方法:透射电子显微镜(TEM)、Nanosight、Western Blot和流式细胞术。中国香港研究外泌体环状RNA测序

已有研究显示人类胚胎干细胞来源的MSC也可释放外泌体发挥心肌保护的作用。有研究在小鼠心肌缺血-再灌注损伤模型中发现,心肌内递送MSCs外泌体,可使心肌梗死面积减少,有效提高心肌细胞存活率。 蔡东升博士及其研究团队证明,下丘脑干细胞分泌的外泌体可以延缓衰老。该研究发现,随着下丘脑干细胞的消失,小鼠开始出现衰老症状。但随着植入经过改造的健康的下丘脑干细胞后,小鼠的衰老症状延迟并且寿命延长,进一步研究发现,该过程一部分是下丘脑干细胞通过释放外泌体来实现的。中国香港研究外泌体环状RNA测序

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