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纳米颗粒跟zong分析技术(Nanosight Tracking Analysis,NTA)是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法,它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA 通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号,拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像,对每个颗粒的布朗运动进行追zong和分析,从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。 通过SDS-PAGE电泳分析得到Exosome中蛋白的含量及种类;通过Western-Blot检测Exosome中特定的蛋白表达情况。外泌体可被大多数细胞分泌,并分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液中。外泌体中不仅包含蛋白质成分,还包括一些RNA成分。外泌体核酸包括诸多种类的long RNAs和以microRNA为dai表的small RNAs。新疆研究外泌体

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1983年,外泌体于绵羊网织红细胞中被发现,1987年Johnstone将其命名为“Exosome”。随后的10年,外泌体并未受到足够的重视。 直至1996年,G.Raposo发现类似于B淋巴细胞能分泌抗原提呈外泌体,这种外泌体携带MHC-Ⅱ类分子、共刺激因子和粘附因子。研究表明这种B细胞来源的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗tumour反应。 1998年,L.Zitvogel等发现树突细胞(DC cell)也能产生有抗原提呈能力的外泌体,而且外泌体含有功能性的MHC-Ⅰ类和Ⅱ类分子,还有共刺激因子。这种外泌体启动了特异性的CTL杀伤作用,促进了T细胞依赖的抗tumour效应。四川云序外泌体文章外泌体鉴定方式:主要有四种方法:透射电子显微镜(TEM)、Nanosight、Western Blot和流式细胞术。

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外泌体在细胞间通讯中发挥重要作用,可以影响细胞的多种功能,包括细胞因子的产生、细胞增殖、细胞凋亡和代谢等。目前认为,外泌体主要通过以下方式与受体细胞结合:①外泌体将膜蛋白或其内容物转移至受体细胞,被受体细胞膜完全吞噬,这一过程需要非常规脂质LBPA和附属蛋白质Alix;②外泌体膜与受体细胞膜直接融合;③外泌体上的跨膜蛋白直接作用于受体细胞膜表面的信号分子。例如,滤泡树突细胞分泌的外泌体携MHC-跨膜蛋白,其可刺激B淋巴细胞和T淋巴细胞表面的信号分子。外泌体与受体细胞以何种方式结合取决于外泌体的大小及外泌体携带的物质。

另外,MSC来源的外泌体还可以有效地促进骨折的愈合、保护修复肾损伤,心肌衰弱、及后肢局部缺血的医治,以及调节促进肌肉的再生等。动物实验中,应用MSC外泌体对于卵巢细胞衰老的医治中,起到了明显的效果。更有体外细胞实验验证,人脐带间充质干细胞分泌的外泌体能够有效抑制顺铂诱导的大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡,提高细胞的生存率。 与传统的干细胞疗法不同,外泌体不是活细胞,因此在被注射到身体的受损伤部位后,不会发展成为ai细胞。因此,外泌体可能作为替代干细胞医治的新策略正在迅速获得重视,并且能够克服细胞医治中的诸多风险和困难。密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂。

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流式细胞仪不仅可以检测囊泡的大小、数量,而且通过荧光标记可以检测囊泡的来源,将囊泡进行分类,因此,流式细胞仪是进行囊泡快速、高通量、多参数检测的较优de选择。但是,传统流式细胞仪无法测量<300nm的外泌体,因此很难进行精确地定量和定性分析。 纳米颗粒跟zong分析技术(Nanosight Tracking Analysis,NTA)是一种比较新颖的表征纳米颗粒的方法,它可直接并实时观测纳米颗粒。NTA 通过光学显微镜收集纳米颗粒的散射光信号,拍摄一段纳米颗粒在溶液中做布朗运动的影像,对每个颗粒的布朗运动进行追踪和分析,从而计算出纳米颗粒的流体力学半径和浓度。过滤离心:这种操作简单、省时,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。贵州云序外泌体结果

外泌体富含胆固醇和鞘磷脂。新疆研究外泌体

外泌体普遍存在于生物体的免疫应答反应中,外泌体可以通过介导促炎症反应来促进免疫反应,tumour细胞分泌的外泌体还可以抑制免疫反应。tumour细胞分泌的外泌体可以促进ai症的侵袭和转移,加快ai症部位的血管生成,有助于tumour微环境中的上皮间充质转化,并且增强tumour的耐药性。外泌体通过与受体细胞特异性结合的方式,传递各种生物学信息,发挥重要的生物学作用。本文分别就外泌体的产生机制、分离与鉴定、其对机体免疫过程和疾病的发生和发展的作用等方面的研究进展进行综述。新疆研究外泌体

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