变倍 显微镜调试

激光扫描共聚焦显微镜的另一个特点是它是一种扫描成像技术，传统的宽场照明技术是将整个样品都照亮，因此可以图像可以直接被肉眼或探测器捕捉，但是LSCM采用一束或多束聚焦光束穿过样品扫描成像，这样得到的图像被称为光学切片。现代共聚焦显微镜的一种实际的工作方式是激光发出的激发光通过二向色镜，通过一对振镜在样品x方向和y方向进行扫描，样品激发（或反射）的光通过针（zhen）孔进入PMT检测器被记录，记录下的扫描图像通过计算机重构出实际的样品图像。显微镜使用注意事项；变倍 显微镜调试

显微镜对于不透明物体的照明和暗视场照明方法

对于不透明物体，采用从侧面或者从上方照明的方法。此时，标本是靠散射光或反射光成像的。侧面照明是把光源放在标本的斜上方，有的显微镜用物镜四周的小灯泡形成斜照明，上方照明方式使物镜兼作聚光镜

暗视场照明方法：暗视场照明适用于离散分布的颗粒标本的观测。在某种程度上，暗视场照明可以提高显微镜的分辨率。暗视场照明的原理是不让透过标本的光直接进入物镜，只让由颗粒散射的光线进入物镜。这样，使物镜形成的像面是一个暗背景上分布着亮颗粒的景象。由于衬度（对比）好，有利于颗粒的分辨。暗视场照明分为单向暗视场照明和双向暗视场照明。分为单向暗视场照明和双向暗视场照明。 双光路显微镜答疑解惑体视显微镜和光学显微镜。

使用显微镜时，您可能会遇到显微镜的专业术语，这些用语都代表什么意思呢？

综合放大倍率：综合放大倍率=目镜倍率 x 物镜倍率。

视场数（F.N）：视场数指目镜能否在广视野下进行观察的指标。样品表面的观察范围取决于目镜的视场光阑直径，该直径的值（以mm为单位）被称为视场数。F.N=Field Number。

实视场（FOV）：指通过目镜观察时实际观察和观察工件的实际范围。FOV：Field Of View

PC显示倍率（TV综合倍率）：PC显示器倍率（TV综合倍率）是指相机摄像元件对角线长度与PC显示器屏幕对角线长度之比。当显微镜通过CCD 设备连接至电脑上进行成像观察时，就需要评价显示器倍率了。

工作距离（WD）：工作距离是指聚焦时物镜镜头头部顶点到检查物体表面的距离，在该距离下可实现清晰的对焦。工作距离越长,聚焦时操作性越好,不用担心镜头会碰上检查物体。WD：WorkingDistance

齐焦距离（PFD）：齐焦距离是指聚焦时从物镜安装位置到合焦时检查物体表面的距离。PFD：ParFieldDistance

焦点距离（FD）：焦点距离指镜头（主点）到焦点的距离。FD：Focus Distance

焦点深度（DOF）：焦点深度是指聚焦之后,聚焦位置前后移动,也能清晰的观察的前后移动范围。DOF：Depth Of Focus

显微镜的观察方式，你知道几种？

荧光成像在如今的科研中已经广泛应用，无论是荧光免疫组化染色、融合蛋白转基因表达，还是荧光染料染色，这些方式都对蛋白的定位和定量分析，细胞的动态变化，组织结构的观察，蛋白的共定位起到重要的影响。荧光成像的原理基于荧光分子获得能量后从高能态跃迁回低能态所释放出的荧光信号。激发这种状态可以使用各种光源，例如普通荧光显微镜使用的金属卤化物灯，LED荧光灯，共聚焦显微镜和双光子显微镜使用的激光。

需要记住的是，不同的荧光成像方式适合不同的研究对象：✓由于sCOMS相机的快速成像特点，在钙成像上普通荧光显微镜具有速度优势。✓共聚焦较好的信噪比和分辨率特点适合多色高分辨高对比成像。✓利用双光子光漂白少的特性，对活细胞或动物成像具有优势。✓利用不同的染料和荧光蛋白特性，还可以进行更多更复杂的荧光成像实验。材料样品也不甘寂寞，它们不像生物样品那样需要特定的染料进行标记，一般都是以自发荧光的方式来呈现它们多彩的一面。比如树脂材料，纤维等样品，利用这一特点可以对样品进行缺陷检测等应用，为科研和生产提供保障。 显微镜常见故障的排除；

显微镜机械系统维护保养：

▪油漆表面的清洁：顽固污迹可以使用软性清洁剂清洁▪塑料表面的清洁：软布蘸水清洁即可。

显微镜光学系统维护保养：

▪不要用手接触光学零件▪擦镜纸是给油镜清洁使用的，干镜清洁请务必使用脱脂棉签▪油镜使用后用干净柔软的专业擦镜纸蘸无水乙醇采用螺旋渐进的方式轻轻擦干净油的物镜；√ 留意擦镜纸的两个面，纹路是不同的：其中一面是粗糙的，另一面更光滑些，要使用更光滑的那一面来清洁。一般不建议用干的擦镜纸直接擦拭，同样可能划伤镜头。▪如果有较顽固污迹或灰尘，先用洗耳球吹走较大较硬灰尘，然后用长纤维脱脂棉签或干净细棉布蘸无水乙醇擦拭，这样可以避免较大较硬灰尘颗粒划伤镜头，影响观察效果。▪目镜和物镜的擦试方法√ 准备工作：在长纤维脱脂棉签顶端蘸上无水乙醇√ 目镜：从中间部分开始，采用螺旋渐进的方式轻轻逐步擦到边缘。√ 物镜&聚光镜：用脱脂棉签按同样方法擦试物镜和聚光镜顶透镜。

注意：无需经常将物镜/目镜拆下来清理擦拭，日常使用时需用脱脂棉签及擦镜纸配合无水乙醇擦去油污即可，只有遇到顽固污渍时才应将物镜拆卸清理。擦试镜头时，动作应轻柔，不能过于用力，以避免损坏镀膜层。 共聚焦显微镜是由显微镜光学系统、激光光源、扫描器及检测及处理系统4部分组成；双光路显微镜推荐厂家

显微镜的几种观察方法；变倍 显微镜调试

金相显微镜放大倍数通常在50-1000倍，照明系统有透射光和同轴反射光，而体视显微镜的放大倍数一般在5-100倍之间， 一般有透射光，斜射光和外部环形光源等照明方式。金相显微镜和体视显微镜相比放大倍数比较大，但是观察范围要小很多，两种显微镜互补能够满足绝大多数应用需求。无限远光学系统确保整体图像质量和系统拓展性；22mm大视野平场成像；稳定的色温和度白光LED照明；流线型的机身外观和特殊的表面处理工艺，基于人体工程学设计，操作更加便捷舒适；落射照明附件配置简易偏光附件，可实现偏光观察；保留了明场观察方法，同时可拓展暗场、专业偏光和荧光等观察方法；三目观察，配置数码相机可对样本进行拍摄和精细测量。变倍 显微镜调试

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