分离外泌体的方法之微流控分离:基于微流体的外泌体分离可以包括用于外泌体捕获的免疫亲和方法,纳米多孔膜筛分方法或微柱上的纳米线用于外泌体捕获。所有三个系统都需要具有粘弹性分析和电操作的芯片才能进行外泌体分离过程。外泌体的特异性很高,采用基于微流控芯片的免疫亲和捕获方法。尺寸范围在40-100nm之间的外泌体被这种微流体芯片特异性地捕获,在外泌体分离和定量方面的益处。筛分方法可用于通过压力或通过电泳从全血中过滤外泌体,压力的利用使分离时间更短,电场导致高外泌体纯度。特异性、可重复性、低分离时间和更低的分离成本是基于微流体的外泌体分离的一些优点。分离外泌体后需要通过电镜等方式进行鉴定。东莞外泌体分离企业
外泌体衍生物miRNA的重要应用:外泌体保护miRNA免于降解,使它们比游离miRNA更稳定,并能被特定受体细胞有效整合。因此,在外泌体携带的货物中,miRNA可以提供有关它们来源的细胞类型、靶标和细胞状态的身份信息。越来越多的证据表明,疙瘩细胞来源的外泌体已成为通过传递病miRNA促进疙瘩细胞增殖、侵袭、血管生成、远处转移和疙瘩微环境重塑的主要候选者。血管生成对于恶性疙瘩的生长和转移至关重要,因为新血管可以提供额外的氧气和营养物质,还可以清理废物。比如:病细胞释放外泌体exo-miR-21、exo-miR-23;外-miR-29;exo-miR-103和exo-miR-210可以促进增殖、血管生成和疙瘩转移。东莞外泌体分离企业外泌体分离器材的选择也对分离结果有一定的影响。
外泌体分离方法之沉淀分离方法::基于聚合物的沉淀分离方法是利用超亲水聚合物来增强小尺寸颗粒(如外泌体)的沉淀。聚乙二醇的常用浓度在8%到15%之间变化。使用这种方法,将含有外泌体的溶液与聚合物一起孵育过夜,并在约10,000×g下进一步离心。外泌体分离方法之FFF分离法:FFF目前是一种很少使用但前景不错的一种外泌体分离方法。分离由横流力驱动,并基于颗粒的分子量或流体动力学直径。它包括高纯度、高效率和短时间处理,但迄今为止,FFF在外泌体分离中的使用案例较少,还有待进一步开发。
通过对外泌体以及外泌体提取相关生物试剂的研究发现:外泌体除了蛋白质,外泌体还含有RNA。外泌体miRNA可用于各种疙瘩的判断。目前有八种miRNA被确定为卵巢病的标志物。此外,据报道,肺腺病者的血清和疙瘩样本中的miRNA会增加。前列腺病的血清中外泌体miRNAmiR-141和miR-375水平会升高。研究表明,外泌体miRNA-21的血清水平升高和miRNA-1246在ESCC群体中凸现。有趣的是,外泌体miRNA可能是肾纤维化和心血管症的潜在判断标志物。对于进行型退行型疾病,在阿尔茨海默者的生物体液中发现了几种miRNA,如:miR-9、miR-107、miRNA-128、miRNA134和miRNA-137miRNA124的高表达水平。外泌体分离和分析的标准化和规范化将有助于外泌体研究领域的进一步发展。
分离外泌体的方法之免疫亲和相互作用:免疫亲和法是利用外泌体表面蛋白(抗原)与其靶抗体或分离配体分子之间的免疫亲和相互作用原理分离纯外泌体的理想方法。它有助于根据其表面标志物分离特定类型的外泌体。基于微孔板的酶联免疫吸附测定(ELISA)是免疫亲和分离试剂盒的一个例子,用于根据外泌体表面标志物分离外泌体。Tetraspanin蛋白是这种分离方法的决定因素。抗CD9、抗CD63和抗CD81是免疫亲和外泌体分离中使用的抗体的常见示例。免疫亲和法可用于从结肠病细胞中分离外泌体,其效率高于超速离心和密度梯度分离。另外还有一种外泌体分离方法,该方法采用抗体包被的基于磁性颗粒的技术来分离外泌体。外泌体可通过细胞间物质转移影响细胞的增殖、分化和生物学行为。杭州外泌体分离哪家好
优化外泌体分离方法可以提高分离效率和分离精度。东莞外泌体分离企业
外泌体可以传递生物分子,例如蛋白质、DNA、mRNA等,影响接收器细胞的表现型和生理活性。外泌体可通过特定的组装和功能修饰,提高其对宿主细胞的选择性靶向性。核酸是在外泌体中发现的另一组主要颗粒,即DNA和RNA,它们可以在细胞中发挥功能作用。在源自小鼠和人类肥大细胞的外泌体中发现了约1300种mRNA、121种miRNA和>100种小RNA,但未检测到DNA和rRNA。在外泌体中发现的其他miRNA是lin-4和let-7,以及母乳中的miR-181a和miR-155。小鼠外泌体对人类细胞的刺激可以导致人类细胞中小鼠蛋白质的合成。此外,外泌体和受体细胞的mRNA谱不同,表明mRNA被主动分选为MVB。东莞外泌体分离企业
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