差速离心法分离外泌体的实验原理：离心管内粒子的速度，由三种力（离心力、阿基米德浮力和斯托克斯粘性阻力）的平衡决定，如：其中geff为离心力（加速度），R为旋转半径，即粒子距旋转轴的距离，ω为旋转角频率，d为粒子直径，ρ为质量粒子的密度和ρsolv和η分别是介质的密度和粘度。在固定的离心条件（转速和介质成分）下，粒子速度完全由粒子的形态和密度决定。密度高于介质密度的粒子沿离心力“向下”运动，而比介质轻的粒子沿与离心力相反的方向“上浮”。对于相似的密度，较大的粒子迁移得更快。因此，在生物学中，离心主要用于按大小（差速和速率区带离心）或按密度（等密度离心）分离不同的物体。在这项研究中，我们专注于使用差速离心按大小进行颗粒分级。外泌体在心血管系统中扮演着重要的调节作用，与各种疾病如心肌梗死、心衰等相关联。血液RNA外泌体分离稳定性好
外泌体分离方法之基于聚合物的沉淀法：基于聚合物的沉淀技术通常包括将生物流体与含聚合物的沉淀溶液混合、4℃孵育和低速离心。用于基于聚合物的沉淀的较常见聚合物之一是聚乙二醇(PEG)。这种聚合物的沉淀可以对分离的外泌体产生温和影响而且可以产生中性的pH值。由此，出现了几种常见的外泌体试剂盒：比如：SystemBiosciences,MountainView,CA,ExoQuick等。研究表明，使用ExoQuick方法可以快速执行，无需额外设备，只需用高速离心机进行超速离心可以获得高产量的外泌体。但是此方法的缺点是：非外泌体材料对外泌体分离物的污染仍然是基于聚合物的分离方法的一个问题。此外，分离物中的聚合物可能会干扰下游分析。昆明外泌体分离哪家好外泌体的分离方法可能还存在一定的局限性和偏差。
分离外泌体的方法之微流控分离：基于微流体的外泌体分离可以包括用于外泌体捕获的免疫亲和方法，纳米多孔膜筛分方法或微柱上的纳米线用于外泌体捕获。所有三个系统都需要具有粘弹性分析和电操作的芯片才能进行外泌体分离过程。外泌体的特异性很高，采用基于微流控芯片的免疫亲和捕获方法。尺寸范围在40-100nm之间的外泌体被这种微流体芯片特异性地捕获，在外泌体分离和定量方面的益处。筛分方法可用于通过压力或通过电泳从全血中过滤外泌体，压力的利用使分离时间更短，电场导致高外泌体纯度。特异性、可重复性、低分离时间和更低的分离成本是基于微流体的外泌体分离的一些优点。
外泌体分离方法之沉淀分离方法：：基于聚合物的沉淀分离方法是利用超亲水聚合物来增强小尺寸颗粒（如外泌体）的沉淀。聚乙二醇的常用浓度在8%到15%之间变化。使用这种方法，将含有外泌体的溶液与聚合物一起孵育过夜，并在约10,000×g下进一步离心。外泌体分离方法之FFF分离法：FFF目前是一种很少使用但前景不错的一种外泌体分离方法。分离由横流力驱动，并基于颗粒的分子量或流体动力学直径。它包括高纯度、高效率和短时间处理，但迄今为止，FFF在外泌体分离中的使用案例较少，还有待进一步开发。外泌体分离和分析的标准化和规范化将有助于外泌体研究领域的进一步发展。
外泌体的表征方法：根据药物递送系统(DDS)表征外泌体结构至关重要，因为它决定了DDS的特性，例如细胞或组织亲和力、应激反应、吸收途径和药物释放。2014年和2018年国际细胞外囊泡学会(MISEV2018)提出了外泌体（包括研究和外泌体制备）应满足的基本要求指南。在开发基于外泌体的DDS时，必须考虑数量、大小、形态、膜组成和蛋白质（包括受体）等参数。这些参数表征所用的技术主要为光学、非光学和微流体技术。外泌体的表征方法之非光学方法：FTIR光谱和衰减全反射FTIR(ATR-FTIR)常用于外泌体质量量化和脂质和蛋白质含量的总体估计。使用TRPS，可以同时测量大小、浓度和zeta电位。由于扫描电子显微镜（SEM）、透射电子显微镜的成本较高，近些年来，一种新型的纳米粒度分析仪器在外泌体研究领域迅速发展，比如：粒度分析仪可以不只可以进行单颗粒检测，颗粒粒径检测还可以检测细胞外泌体的浓度、zeta电位、形态等进行多维度检测。外泌体与神经系统的关系复杂，通过在神经元间的转移，参与多种神经疾病的发生和病理机制的形成。血液RNA外泌体分离稳定性好
外泌体富集、分离和检测是当前外泌体研究的热点之一。血液RNA外泌体分离稳定性好
细胞外泌体的来源和表征方法：细胞外泌体是直径为30-150nm的血管外囊泡亚群。在过去的20年里，科学家已经从包括正常细胞和病细胞在内的许多细胞类型中分离出外泌体，并且研究了它们对其他细胞的影响。外泌体是由多种大分子组成，例如核酸、蛋白质和脂质。细胞外泌体具有天然的特定细胞靶向特性，通常被设计用于靶向大分子（DNA和RNA）和药物递送系统（多柔比星、紫杉醇和紫杉醇）。目前常用细胞外泌体的分离方法主要是超速离心法、密度梯度离心法、超滤分离法、基于聚合物的沉淀法、亲和沉淀分离法、免疫磁珠法和色谱法等。血液RNA外泌体分离稳定性好
