湖北干细胞产品支原体检测可比性验证

此前，支原体检测依赖培养法和指示细胞培养法，这两种传统方法均被各国药典列为基础检测手段，但存在明显短板。培养法作为 “金标准”，需阳性活菌参照，每批次培养基需做灵敏度测试，完整合规检测周期长达 21-35 天；指示细胞培养法同样耗时 14-28 天，难以满足新型生物制品快速上市、短货架期的放行需求。更棘手的是，面对高蛋白等复杂样品基质，传统方法易受干扰或抑制，需额外增加传代培养步骤，导致检测时间再延长 2-3 周，严重影响生产效率，也难以适配新型生物制品的检测场景。

湖州申科的支原体培养法样品检测流程严格遵循 USP 标准，步骤规范且逻辑严谨。接种环节：每 100mL 液体培养基接种 10mL 供试品，每类固体培养基接种 0.2mL 供试品；培养条件：置于 36±1℃、5-10% CO₂的湿润环境中培养 28 天。继代培养需在特定时间点开展：接种后第 2-4 天、第 6-8 天、第 13-15 天、第 19-21 天，每次从每种液体培养基中吸取至少 0.2mL，接种至对应固体培养基继续培养不少于 14 天，其中第 20-21 天的继代培养需持续 7 天。观察频率为每 2-3 天一次，若液体培养物出现颜色变化，需立即进行继代培养，再通过与阴阳性对照培养基的对比，完成结果判定，确保检测无遗漏、无偏差。

长期以来，支原体检测主要依赖培养法和指示细胞法，且法规通常要求两种方法同时使用，但这两类方法存在明显短板——培养法检测周期长达 28 天，指示细胞法也需较长时间等待结果。随着细胞疗法药物快速发展，其上市周期短、货架期有限的特点，使得传统方法难以满足药物放行的时效要求。核酸扩增技术（NAT）尤其是荧光探针 qPCR 检测方法的出现，凭借检测速度快、特异性强的优势，成为支原体检测的理想替代方案。作为替代方法，NAT 检测需通过严格验证以达到法规要求的灵敏度：检测限达到 10CFU/mL 可替代培养法，达到 100CFU/mL 可替代指示细胞培养法，从而实现快速且可靠的支原体筛查。

为解决支原体检测的污染难题，湖州申科推出AdvSHENTEK^® 外源因子全自动核酸检测分析系统 + 一体化支原体检测卡盒的组合方案，以全封闭设计从根源规避污染。该方案只需一步开盖加样，后续流程完全封闭运行，物理隔绝核酸气溶胶污染，搭配 UNG 酶系统可进一步防止环境交叉污染，能节省 100% 污染排查时间。一体化检测卡盒相当于单独的迷你 qPCR 实验室，集成试剂准备、样品制备、扩增、分析全流程，无需复杂分区。同时，方案降低了对实验环境和人员的要求，普通实验室即可开展检测，人员经简单培训就能操作，彻底摆脱了传统 NAT 法对高技能人员和场地的依赖，大幅提升检测结果的稳定性。

MycoSHENTEK^® 支原体 DNA 检测试剂盒参照 EP 2.6.7 和 JP XVII 支原体检测相关要求完成全面性能验证，是经过三方室间验证、性能完全符合药典标准的支原体检测试剂盒。该试剂盒检测灵敏度高达 10CFU/mL，可同时替代传统培养法与指示细胞培养法，大幅缩短检测周期。经实验验证，其对鸡滑液支原体、猪鼻支原体、莱氏无胆甾支原体等多种常见污染菌株的检出率均达到 100%（24/24），即使对口腔支原体等低浓度菌株，检出率也满足 95% 以上。凭借覆盖范围广、灵敏度高、性能稳定、合规性强的关键优势，该试剂盒为生物制品企业提供了高效、可靠的支原体检测工具，助力企业满足全球监管要求并保障产品质量。

湖州申科构建了覆盖全领域、全场景的支原体检测一站式合规解决方案。产品矩阵丰富，包括支原体 DNA 提取纯化试剂盒（2G）、检测试剂盒（2G，PCR - 荧光探针法）、DNA 校准品、一体化检测卡盒、外源因子全自动核酸分析系统，以及 10 余种支原体验证菌株（已上市猪鼻、肺炎、口腔支原体等，即将上市发酵、精氨酸支原体等）。方案具备极强的场景适配性，可应对 5% 人白、高浓度细胞等复杂基质样品，支持从起始材料到终产品的全流程检测，满足细胞疗法、抗体、疫苗、CRO/CDMO 等不同领域的检测需求。服务层面，提供从方法学建立、样品检测、适用性验证、传统法与 qPCR 法比对到特殊菌株定制的全流程技术支持，配合企业完成监管机构现场审计，满足企业从 IND 到 BLA/NDA 的申报需求，实现 “极简操作、一步加样、避免污染、全量检测” 的价值。