酵母单杂交筛选：（4）在筛选到的转录因子中，***GL1促进HIV-2转录。***GL1在免疫细胞中***表达，并与HIV的其他转录***因子，即Sp1、AP-1和PCAF/CBP/P300存在相互作用，本研究中显示HEK293T细胞中，***GL1过表达后，与LTR连接的萤火素酶表达上升近2倍，说明***GL1是一个转录***因子。值得一提的是，文章的背景介绍内容中，对应用其他技术（如RNAi、scRNA-seq、CRISPR等）对HIV转录调控方向的已有成果分析，发现这些方法为HIV-1的复制和潜伏期提供了见解，但并没有直接评估转录因子的结合和功能。文章中也对酵母单杂交技术与其他互作组技术（如Chip-seq、motif预测）进行了比较分析，发现eY1H技术对已识别因子的验证率为30-60%，同等或优于其他技术。为客户提供专业的技术服务专业医学课题标书论文一站式酵母双杂交。上海发展酵母文库做什么
通过酵母双杂交文库进行了互作蛋白的筛选，结果显示TaTIFY9可以与TaSRL1相互作用（下图A），并通过Bi-FC、荧光互补实验得以证实（图B-C）。TaTIFY9属于茉莉酸信号途径关键因子JAZ家族的成员之一。RT-PCR显示TaTIFY9也主要表达于小麦根部，外源施加茉莉酸可以***诱导TaTIFY9表达。这一结果表明，TaSRL1可能通过与TIFY9结合介导了茉莉酸对根生长的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特异性结合到靶基因启动子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 属于 ERF 家族。在生长素转运基因 TaPIN2 的启动子序列中含有一个 GCC-box 序列。酵母单杂交实验显示，TaSRL1 可以直接与 TaPIN2 启动子结合并***其表达（图 A），但该***作用会被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制（图 B和C）。甘肃筛库酵母文库做什么液态酵母单双杂高通量筛库方法及其应用。
利用酵母双杂交技术进行筛选，结果显示SP8可以与水稻OsMYC3蛋白相互作用，并且二者互作关系通过酵母一对一互作、BiFC、Co-IP、LCI实验得以验证（图A-C）。利用截短的SP8进行酵母一对一互作和Co-IP检测表明，与OsMYC3的结合依赖于SP8的NTP结构域（图D-E）；同样，OsMYC3的TAD结构域也是二者互作所必不可少的（图F）。酵母双杂交、BiFC实验表明，OsMYC3可以与OsJAZ相互作用。经茉莉酸处理，野生对照株根的长度明显被抑制、一系列JA生物合成和信号传导相关基因表达量上升，但Osmyc3突变体中抑制程度减轻、JA相关基因表达量上升减少。
酵母杂交试验:随着分子生物学研究进入以蛋白质组学为标志的后基因组时代，蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质-DNA相互作用已成为互作组学研究的热门主题。人类基因粗略约编码2万种蛋白，只算一对一的相互作用种类也有12万到100万种。而加上动态变化，每个物种、个体、细胞中都存在着一张张不同的互作网络图，这一张张图谱中，蕴藏着各种生命的奥秘。有两种通用的相互作用组图谱绘制方式：第一种酵母杂交试验，通过偶联基因表达体现细胞内发生直接相互作用的蛋白对。第二种是通过抗体/标签分离纯化复合体，然后用质谱鉴定复合体内部组分，识别直接相互作用或间接相互作用的蛋白质。两种高通量方法彼此互补，相互验证。酵母文库筛选做文库筛选前,首先需要检测你的诱饵的自***活性和对酵母的毒性。
利用酵母文库进行双杂交筛选，结果显示 MdBT2 可以与 MdRGL3a 结合。MdRGL3a 编码 GA 信号阻遏物 DELLA 蛋白，主要分布于细胞核中。MdRGL3a 对于 GA 处理非常敏感，可以引起其发生降解，PAC 处理可以提高其稳定性。进一步的酵母一对一杂交验证实验表明，两者的结合依赖于 MdBT2 的 BTB 和 BACK 结构域、MdRGL3a 的 LHRI 和 SAW motif（图 A-B）。并通过 GST pull-down、BiFC 实验也证实了 MdBT2与 MdRGL3a 的结合（图 C-D）。细胞外降解实验显示，与对照相比，MdRGL3a 与过表达 MdBT2 的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解加快；而与抑制 MdBT2 表达的愈伤组织的总蛋白共同孵育，会导致 MdRGL3a 的降解减缓（图 A）。并且蛋白酶体抑制剂 MG132 可以***抑制 MdRGL3a 的降解（图 B）。改变 MdRGL3a 表达量并不影响 MdBT2 的降解。以上结果表明，MdRGL3a 可能通过 26S 蛋白酶体途径发生降解，而 MdBT2 可以抑制 MdRGL3a 的降解。酵母单杂筛库酵母文库筛选酵母双杂交筛库步骤。甘肃筛库酵母文库做什么
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文库筛选做的好，培养基和转化试剂少不了。实验做不出、克隆生长不正常的小伙伴，你是不是会怀疑培养基配的有问题，或者转化试剂配的不对？欧易生物现隆重推出酵母双杂、单杂筛选、一对一互作验证的配套培养基、转化试剂啦~该系列产品，经欧易生物实验室多年使用、不断改良，质量保证，物美价廉。所有培养基均无需调pH，使用方便。*需将1袋**包装的培养基溶于500mlddH2O中，然后121℃高压灭菌15min，固体培养基冷却至50℃左右即可倒板使用，液体培养基冷却至室温后直接使用。从现在开始再也不用为重复配制试剂、重复做实验、不停的花费时间验证而头秃了。上海发展酵母文库做什么
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