在生物流体中发现的细胞外囊泡包括来自内体，多泡体的细胞外泌体（30nm至150nm）和来自质膜的微泡（150nm至1000nm）。目前已知有多种从生物体液中分离外泌体的方法除了使用高速离心机的离心分离法以外，还有色谱法、超滤过滤法、基于聚合物的沉淀和免疫分离法等。#外泌体干细胞#这些细胞外泌体分离方法提取的外泌体要警惕非外泌体颗粒污染，如凋亡小体、凋亡小囊泡、外泌体和脂蛋白，均会对获得的外泌体生物活性产生影响。另外，分离方法也会影响细胞外泌体的纯度和产量。如果要从培养基中分离外泌体，就要使用无血清培养基或无外泌体胎牛血清。外泌体在疙瘩微环境中的参与，反映了其具有的高度的异质性和复杂性。脑脊液外泌体芯片检测
外泌体分离方法之超速离心法：超速离心基于颗粒的大小（重量）及其在离心力（100,000–110,000×g）下的离心沉降。至于去除的细胞碎片和不需要的颗粒可以通过称为差速离心的几步慢速离心来获得。外泌体的纯化可以采用蔗糖梯度密度离心纯化法：即：在蔗糖梯度(1.13–1.19g/mL)或缓冲液中进行，以实现更高的富集、产量和纯度增加。外泌体分离方法之微流控分离法：微流控分离法主要是在微芯片上进行的，这里我们需要提及的是，微流控分离法法可用于外泌体分离（免疫结合和磁结合、过滤），效率相对较高（约90%）。苏州上清外泌体分离供货商外泌体富集、分离和检测是当前外泌体研究的热点之一。
外泌体的分离方法：目前，有许多可用的外泌体分离方法。比较传统的外泌体分离方法是超速离心，许多人将其视为金标准。其他技术主要基于大小排阻或抗体介导的标记外泌体分离。每种分离方法在纯度、数量、效率和通量方面都不同。超速离心法分离法的缺点是外泌体结构容易发生改变，造成外泌体的结构不一致性甚至会导致外泌体受损。超滤法：超滤法使用的是微孔过滤器；因此，较大的颗粒将从滤液中排除。它可以与离心结合使用，通过初步去除细胞碎片等大颗粒来加速外泌体的纯化。不过使用此方法需要防止孔隙堵，不适合大规模的样本处理。
CHO细胞外泌体的分离和表征：CHO细胞是一种普遍用于生物制药蛋白质生产的宿主。CHO细胞中分离外泌体主要采用聚合物的沉淀(PBP)技术从分批培养中分离和富集细胞外泌体囊泡。分离后的外泌体可以通过多种方法来检测和表征分离的囊泡，这些分析包括动态光散射(DLS)和Zeta电位测量、电子显微镜(EM)和外泌体标记物分析、RNA和脂质分析等。根据制造商的指南，使用TEI总外泌体分离试剂盒（Invitrogen）从培养基中分离外泌体。将细胞培养基以2000×g离心30分钟以去除细胞和任何碎片；随后将上清液小心移至离心管管中，加入0.5倍体积的TEI试剂，充分混合并在4°C下孵育过夜。然后将样品在4°C下以10,000×g离心1小时，然后在弃去上清液后，将富含外泌体的颗粒重新悬浮在75μlPBS缓冲液中。然后将样品储存在-20°C下，直到需要进行后续分析。外泌体在心血管系统中扮演着重要的调节作用，与各种疾病如心肌梗死、心衰等相关联。
外泌体是由细胞分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡，普遍存在于血液、唾液、尿液及乳汁等体液中，具有细胞信使功能，参与细胞通讯。外泌体是目前为止定义较为明确的细胞外囊泡(ExtracellularVesicles,EVs)，其生成过程、释放途径、大小及功能区别于微囊泡(Microvesicles)和凋亡小体(Apoptosisbodies)。外泌体是内吞起源的小(40–100nm)囊泡群。外泌体和脱落的囊泡都含有特定的蛋白质组、RNA和,dsDNA等。不同的细胞外环境富含不同类型的细胞外囊泡。即使由相同的细胞类型形成，不同类别的囊泡也具有不同的核酸特征。分离外泌体的方法：细胞碎片、凋亡体、外泌体和其他EV一起存在于生物体液中，具有密度、形状、大小和表面蛋白等物理性质的外泌体是分离机制的基础。结合两种或多种分离方法有助于有效地将外泌体与其他干扰成分分离。外泌体与生物体的免疫应答密切相关，通过它们携带的抗原和免疫调节分子对免疫系统起到调节作用。郑州血液外泌体哪家好
外泌体可作为一种新型的疙瘩治着策略，例如外泌体特异性LncRNA干扰RNA技术。脑脊液外泌体芯片检测
外泌体分离方法之亲和层析分离法：在亲和层析分离法方面，主要使用凝集素和合成Vn(venceremin)肽。凝集素将结合存在于外泌体表面的糖基化蛋白质，从而使外泌体沉淀。Vn肽分离技术基于其对含有HSP的细胞外颗粒的高亲和力。然而，这种方法比较容易使提取物被膜表面上含有上述标记物的细胞和其他颗粒污染。外泌体分离方法之介电泳分离法：介电泳分离法主要利用不同大小的粒子在不均匀电场中的位置差异。外泌体被吸引到高电区域，而较大的颗粒将位于低电区域。该方法速度快，适合用于高通量筛选，但缺点是需要加热。脑脊液外泌体芯片检测
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