用qPCR进行rcAAV复制型腺相关病毒检测时，哪些因素会对检测结果准确性和方法灵敏度存在较大影响？前处理过程杂质干扰的去除对qPCR法宿主细胞残留DNA检测结果有着较大影响。样品的前处理操作步骤对DNA检测结果的准确度影响较大，通常采用加样回收试验来进行验证并确定可接受的偏离限度，内标回收率在50...

用qPCR法进行宿主细胞残留DNA检测时，出现扩增效率超出标准要求（低于83.3%或高于110%）的原因有哪些？①设计的引物探针不适用：重新分析靶标序列进行设计。②标曲浓度设定太高，超出标曲线性范围：对范围进行验证，选取合适标曲范围。③人员操作问题，如稀释错误、制备过程震荡时间过长等：人员上岗前...

为什么要做宿主细胞残留DNA检测？近年来热度骤增的生物制品药物对诸多疾病疗效斐然，在药品市场中所占比重也是节节攀升。于是生物制品与之俱来的生物安全性问题被渐渐提上日程，其中宿主细胞残留DNA由于可能会传递仲瘤或病毒相关基因，存在潜在的危险性，各国药品监督管理机构对其残留量有着严格的限度控制。同时，各...

在进行支原体检测之前，进行支原体核酸提取的目的是为了从样品中纯化和富集支原体的DNA，以便进行后续的检测和分析。支原体是一类细小的细菌样微生物，其基因组含有DNA。通过对支原体DNA的提取，可以获得纯净的DNA样本，有助于准确、敏感地检测支原体的存在和进行进一步的分子分析。通过对支原体DNA进行提取...

磁珠法核酸提取是纳米科技与生物技术的完美结合，具有其它传统核酸提取方法不可比拟的优势：（1）样本需求量低：微量的生物样本即可提到高浓度的核酸；（2）保护操作人员：全自动核酸提取蕞大限度的减少操作人员与检测的接触，有效保护实验操作人员；（3）安全无毒无害：试剂不含酚、氯仿等有毒化学试剂，完全符合现代化...

用qPCR法进行宿主细胞残留DNA检测时，出现扩增曲线复孔间荧光信号值降低及复孔间扩增曲线重复性差的原因可能是什么？复孔间部分曲线荧光信号值降低的现象比较常见，通常与反应管内存在气泡相关，随反应温度升高，气泡破裂导致荧光信号值降低。上机前需仔细检查反应管内是否有气泡残留。另外，针对加样误差引起的复孔...

复制型病毒风险是评估病毒载体安全性的关键因素。评估分析基因突变和内源***毒片段重组产生复制型病毒的可能性，可有效避免出现与之相关的不良反应事件。南京正扬生物科技有限公司自主研发生产了针对不同复制缺陷型病毒载体的复制型病毒检测试剂盒（qPCR法/RT-PCR法），可用于测试载体生产用主细胞库、工...

实时荧光定量PCR法rcAAV复制型腺相关病毒检测试剂盒的操作流程包括病毒DNA提取、qPCR试剂配制、qPCR加样及上机检测、结果分析四个环节。病毒DNA提取包含样品前处理、样品裂解液消化、病毒DNA与磁珠结合、一次洗涤、二次洗涤、洗脱；qPCR试剂在配制时需先将试剂放置于室温，避光放置30m...

CHO宿主细胞残留DNA检测中，磁珠法核酸提取回收率偏低的原因有哪些？样品问题：样品存在抑制；操作原因：①洗涤液配制操作，外加有机溶剂的体积或纯度不正确；②漏加或少加试剂组分；③磁珠保存不当，冷冻过；④在提取过程中将样品管高速离心或长时间离心；⑤磁力架不匹配，磁性较弱；自动化核酸提取设备原因：①自动...

在进行支原体检测之前，进行支原体核酸提取的目的是为了从样品中纯化和富集支原体的DNA，以便进行后续的检测和分析。以下是进行支原体DNA提取的主要原因和目的：分离支原体DNA：样品中可能存在多种细菌、***和病毒等其他生物体的DNA。通过提取支原体DNA，可以将支原体的DNA与其他杂质DNA分离...

在进行支原体检测之前，进行支原体核酸提取的目的是为了从样品中纯化和富集支原体的DNA，以便进行后续的检测和分析。支原体是一类细小的细菌样微生物，其基因组含有DNA。通过对支原体DNA的提取，可以获得纯净的DNA样本，有助于准确、敏感地检测支原体的存在和进行进一步的分子分析。通过对支原体DNA进行提取...

磁珠法核酸提取一般可以分为四步：裂解——结合——洗涤——洗脱裂解：核酸必须从细胞或其他生物物质中释放出来，细胞裂解可通过机械作用、化学作用、酶作用等方法实现。其中，酶作用主要是通过加入溶菌酶或蛋白酶（蛋白酶K、植物蛋白酶或链霉蛋白酶）以使细胞破裂，核酸释放。蛋白酶还能降解与核酸结合的蛋白质，促进核酸...