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八方同创提醒猪场，PCR扩增完成后读取和分析结果方法如下：1、反应结束后保存结果，仪器将对结果进行自动分析，给出CT值，注意查看结果的扩增曲线的性状，存在CT值的结果需呈S型曲线。2、根据说明书，查看阴阳对照是否符合质控标准，扩增曲线是否为标准的S型曲线，曲线异常或不满足质量控制的情况下样品检测结果无效。3、质控成立，按照试剂盒判定标准对结果进行阴性、阳性及可疑（可疑样品需复测，两次可疑判阳性）判定。4、对于可疑样本选用50ul的体系复测。5、注意结果是否有内标，内标CT值是否均匀一致，从而验证核酸是否存在抑制物。6、若无内标，则考虑：体系配置错误（未加内标）、仪器设置问题、样品中存在抑制剂、体系未混匀、分装误差等，需对样品进行复测。7、若阳性对照不出值，则考虑：仪器未设置孔位、体系配置错误、人员操作失误、试剂失效等原因。8、若阴性对照出值，则考虑：污染（产物污染、气溶胶污染、试剂污染）；人员操作不当等。立即停止实验排查原因并启动实验室消毒，排除污染后再做样品检测。9、填写检测结果统计表。八方同创推出的非洲猪瘟冻干微球试剂盒适用于实验室中不同基因型的弱毒株混样分检复测。禽流感H9/H5病毒诊断试剂总产

几种技术已被应用于检测抗非洲猪瘟病毒抗体。ELISA(Sánchez-Vizcáño1987)被推荐用于大规模筛查，而间接免疫过氧化物酶试验、间接免疫荧光试验和免疫印迹试验被推荐作为阳性或可疑结果的确认性抗体试验。ELISA非常适合控制和扑灭计划。WOAH手册中描述的两种间接ELISA以及几种商业化和竞争性ELISA已在不同流行病学情况下验证使用，八方同创生产的非洲猪瘟抗体快检卡适合用于现场全血检测，操作简单，无需设备，全血检测，特异性和灵敏度与ELSIA试剂盒99%相似。当样本保存不当或使用血液样本代替血清时（至少在野猪样本的情况下），这些ELISA的诊断敏感性可能较低(Gallardo,Nieto,etal.2015)。这一限制可能不适用于基于重组蛋白的“内部”和商业化ELISA(Gallardo,Blanco,etal.2006;Gallardo,Nieto,etal.2015)，需要用现场的快速抗体检测卡解决这一难题。间接免疫过氧化物酶和间接免疫荧光试验具有高度的诊断敏感性和特异性，只要动物Infection至少1周，就可用作ELISA检测后的确认试验。如果动物Infection至少2周，以及当怀疑血清保存不佳时确认结果，推荐使用现场抗体快检卡或免疫印迹试验作为确认试验。禽流感H9/H5病毒诊断试剂总产八方同创提醒猪场抗体是指由体液免疫系统响应外来抗原存在而产生的蛋白质。

作为上海市高新技术企业、专精特新企业，上海创宏生物深耕动物疫病防控领域多年，依托与上海交通大学、中国农业大学等高校共建的校企合作基地，以及通过CMA认证的第三方动物疾病诊断实验室（投资额超500万元，配备PCR仪、酶联检测仪等全套先进设备），持续追踪非洲猪瘟病毒变异动态，累计形成覆盖全国不同气候、不同养殖模式的实战防控经验，为猪场提供从监测、诊断到应急处置的全流程技术支撑，用硬核实力筑牢猪场生物安全防线。可到现场为猪场提供相关服务。

上海创宏生物一线团队研究表明，当前流行的非洲猪瘟病毒以基因缺失株和重组毒株为主，其毒力较2019年经典强毒株衰减，但适应性和隐蔽性大幅提升，这种“温和”表象背后，隐藏的防控难度远超以往，风险集中体现在三点：一是监测难度激增，漏检风险突出。变异毒株在猪体内呈现典型的“间歇性排毒”特征，常规单一部位采样检测的窗口期极窄，极易出现“检测阴性”的假安全信号。上海创宏生物实验室数据显示，采用口鼻拭子检测，漏检率可达30%以上，而采用“尾根血拭子+口鼻拭子+肛拭子”的组合采样方式，可将漏检率降至5%以下。二是传播隐蔽性，无症状猪可长期“带毒生产”，作为移动传染源在猪群中扩散，一旦遇到转群、免疫、温差变化等应激刺激，便会引发病毒大量复制和“应激后排毒”，导致在看似正常的猪群中突然暴发。三是窗口期短，处置难度加大。当猪只出现皮肤发红、精神沉郁等肉眼可见异常时，病毒往往已在群体中完成数轮潜伏与扩散，形成群体***局面，此时再实施“拔牙”，成功率不足20%，极易出现反复。上海创宏生物临床案例统计表明，若在早期（无症状阶段）精细发现并处置，控制成功率可提升至85%以上。八方同创提醒猪场临床症状是指 观察者可感知的猪病的客观证据。

八方同创提醒猪场，ELISA抗体样品检测的关键控制点如下：1、操作环境温度确认，试剂盒回温，恒温箱预热准备。2、样品外包装消毒，确认样品有效性， 60℃灭活30min。3、冻结样品溶解后充分混匀并避免产生气泡，确认稀释浓度，阴阳性对照是否需要稀释，确认孵育温度记录孵育时间。4、洗液现配现用，确认配置浓度，使用蒸馏水，纯水，去离子水；洗板液满而不溢。5、确认酶标的配置浓度，确认孵育温度记录孵育时间。6、底物需避光，未用完的不可回倒进原试剂瓶，确认显色温度记录显色时间。7、酶标仪提前预热10min，确认检测指标波长后测定。8、记录和汇总检测结果，及时分析沟通。9、垃圾清理；卫生消毒；紫外照射30min，通风。八方同创推出的迷你PCR仪灵敏高同等或高于台式PCR灵敏，读取CT值判定结果。禽流感H9/H5病毒诊断试剂总产

八方同创推出的非洲猪瘟冻干微球试剂盒适用于防控中一级洗消点环境、人员、车辆、物资检测。禽流感H9/H5病毒诊断试剂总产

非洲猪瘟病毒（ASFV）颗粒在无血清培养基中于pH4–10范围内保持稳定，但当环境pH低于4或高于11.5时，可在数分钟内迅速失活。值得注意的是，在含血清条件下病毒稳定性增强：5°C保存时，血清中的病毒可维持活性性长达6年；即使在含25%血清的培养基中处于pH13.4的强碱性环境，仍可保持数天活性。病毒灭活可通过热处理实现（60°C持续30分钟，或56°C持续70分钟）。多种有机溶剂可通过破坏病毒脂质包膜使其失活，但该病毒对蛋白酶及核酸酶表现出较强抗性。八方同创建议：开展ELISA检测前应对样品进行规范灭活；病原学检测完成后，亦需对剩余样品实施灭活处理，以有效降低生物安全风险，防止交叉污染。禽流感H9/H5病毒诊断试剂总产

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