乌克兰家庭农场非洲猪瘟生物安全要点

非洲猪瘟病毒的初级复制发生在离病毒进入点相近的淋巴结的单核细胞和巨噬细胞中。因此，在经口或口鼻暴露的情况下，扁桃体和下颌淋巴结的单核细胞和巨噬细胞首先受累。随后，病毒通过血液和/或淋巴系统传播到次级复制位点，如淋巴结、骨髓、脾脏、肺、肝和肾。大多数非洲猪瘟病毒分离株与红细胞膜结合，并在阳性猪中引起红细胞吸附。然而，一些分离株不诱导红细胞吸附。虽然非洲猪瘟病毒主要在髓单核细胞中复制，但它也在内皮细胞、肝细胞、肾小管上皮细胞和中性粒细胞中复制。普遍认为，髓单核细胞的损坏是非洲猪瘟发病机制的关键因素。此外，非洲猪瘟病毒通过调节宿主细胞因子引起免疫抑制，导致过度的组织炎症和细胞凋亡。此外，髓样细胞的破坏导致细胞成分（即危险信号）的释放。当单核细胞/巨噬细胞被侵害时，它们分泌多种介质，包括促炎细胞因子，如白细胞介素-1、IL-6和肿瘤坏死因子α（TNF-α）。这些细胞因子能够触发急性期反应、炎症、内皮细胞受损和细胞凋亡。TNF-α起关键作用，因为它能够诱导血管舒张和通透性增加并调节血管内皮细胞的受损状态（促凝/抗凝）。此外，TNF-α参与细胞凋亡的调节。非洲猪瘟控制后，复产前，八方同创建议对病毒的传入、扩散进行复盘，然后查缺补漏、猪场改造、人员培训。乌克兰家庭农场非洲猪瘟生物安全要点

    非洲猪瘟防控过程中一定要有“无坚不破、唯快不破”的防控理念，早发现、早处理仍然是减少和减低损失的主要措施。现场确诊十分重要了。八方同创在防控非洲猪瘟一线，秉承“科技赋能检测”的理念，依托先进生物技术和临床经验，自主研发了一系列诊断工具——高灵敏迷你PCR设备与非洲猪瘟抗原、抗体快速检测卡。BIOMINI 2.0是高特异性的迷你PCR仪，检测下限可达，全程耗时不足60分钟，实现了现场快速精细的核酸诊断。同时，其与中国台湾EBS联合推广的非洲猪瘟抗体快速检测卡已获得世界动物卫生组织（WAHO）认证，发病后7天即可检出，15分钟出结果，适用于全球180多个国家。这些工具为科学决策提供了“火眼金睛”。这些工具为早发现、早处理非洲猪瘟病毒提供坚实保障。 中国台湾哺乳母猪非洲猪瘟饲养管理非洲猪瘟病毒传入猪场的途径主要通过污染人员、物资、饲料、车辆、猪只、生物虫媒介、尘埃、水源进入猪场。

    几种非洲猪瘟病毒蛋白具有高度抗原性，包括病毒衣壳的主要结构成分（p72），以及膜蛋白p54、p30和p12。总共超过50种病毒蛋白可在耐过或康复猪中诱导可检测的抗体反应。虽然作为血清学诊断中的抗原很有用，但它们在诱导保护性免疫中的作用尚不清楚，因为非洲猪瘟病毒不诱导完全的中和抗体免疫反应。非洲猪瘟病毒粒子在无血清培养基中pH4-10时保持稳定，但在pH低于4或高于。血液中的粒子在5°C(41°F)下可保持复制性6年，在含25%血清的培养基中pH下可保持数天复制能力。病毒粒子可通过60°C(140°F)加热30分钟或56°C(133°F)加热70分钟灭活。许多有机溶剂通过破坏脂质包膜使病毒失活，但非洲猪瘟病毒对蛋白酶和核酸酶具有抗性。非洲猪瘟病毒田间分离株的回收必须在原代猪单核细胞/巨噬细胞中进行，因为田间毒株在常规细胞培养系统中复制不佳。出于研究目的，几种非洲猪瘟病毒分离株已适应在非洲绿猴肾稳定细胞系（包括VERO、MS和CV-1细胞）或野猪肺细胞中生长。近期，几种单核细胞来源的猪细胞系已被开发用于研究目的。尽管该领域取得了进展，细胞系仍然是疫苗病毒生产的限制因素。

八方同创深耕并致力于猪场非洲猪瘟防控的经历提醒猪场，病毒灭活方法非洲猪瘟病毒可被有机溶剂、洗涤剂、氧化剂（如次氯酸盐、苯酚）及商业消毒剂灭活，灭活效果受暴露时间和温度影响。具体灭活方式包括：暴露于2.3%的氯、3%的邻苯基苯酚或含碘化合物中30分钟，可灭活病毒。其他有效灭活处理包括使用福尔马林、氢氧化钠、β-丙内酯、甘油醛或乙酰亚乙基亚胺（《非洲猪瘟科学报告》，欧洲食品安全局，2009年）。肥皂、洗涤剂和碱类物质可有效对动物圈舍、机械设备、衣物、交通工具及人类居住区域进行消毒；飞机消毒推荐使用卫可（Virkon®）等消毒剂。受病毒污染的饲料、污水和粪便应采用掩埋或焚烧的方式处理。在4°C（39°F）条件下，用1%的氢氧化钠或氢氧化钙处理受污染猪粪浆3分钟，或用0.5%的氢氧化钠或氢氧化钙处理30分钟，可灭活病毒（特纳、威廉姆斯，1999年）。蜱虫根除推荐使用杀虫剂，如有机磷酸盐类和合成拟除虫菊酯类杀虫剂。八方同创提醒：非洲猪瘟病毒在环境中抵抗力强，耐低温不耐高温，70℃以上50分钟可完全杀灭。

非洲猪瘟病毒的复制主要发生在侵入的单核细胞和巨噬细胞的细胞质中，尽管早期复制阶段也在细胞核中被描述。病毒进入通过网格蛋白介导的、发动蛋白依赖性的内吞作用和巨胞饮作用(Galindoetal.2015;HernaezandAlonso2010;Sánchez,Quintas,etal.2012)。肌动蛋白依赖性内吞作用和涉及微管活性的内吞流也参与其中，表明存在经典吞噬作用(Bastaetal.2010)。细胞受体及其病毒配体的身份仍未知。CD163曾被提议为推定受体(Lithgowetal.2014;Sánchez-Torresetal.2003)，但CD163基因敲除猪对非洲猪瘟病毒仍完全易感(Popescuetal.2017)。非洲猪瘟的重组蛋白是一种安全性好的疫苗，但是有效性需要提出疑问，尤其是交叉保护性。缅甸大型养殖场非洲猪瘟诊断方法介绍

非洲猪瘟病毒毒株呈现“致病力减弱、隐蔽性增强、适应性提升”的特征。乌克兰家庭农场非洲猪瘟生物安全要点

安全引种的全链条服务复养成功的关键一环是引入安全的猪群。

引种是一套系统工程，八方同创为此提供可靠的引种方案，服务涵盖根据猪场的生产硬件条件（定位栏数量、产床数量、保育舍数量等），猪舍布局（自繁自养还是分点饲养），生产工艺（批次化管理）设计引进后备母猪的体重和数量，做到利益比较大化的引种设计。种猪源的健康评估（非洲猪瘟、蓝耳病、伪狂犬、PEDV双阴性）、运输路线的风险规划、运猪车辆的严格检测到入场后的隔离观察。通过全链条的生物安全管控，确保新引入的猪群不会带来新的风险，保障复养猪场能够稳健起步，走向持续生产。 乌克兰家庭农场非洲猪瘟生物安全要点

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