扫描电镜细胞内部结构冷冻割断法 该方法简便,结构清晰,已得到普遍应用。其操作方法如下: 1) 取材和固定:为了使细胞结构清晰,不被过多的血细胞污染,可在取材前用灌注法冲洗。即先将动物麻醉,经腹主动脉注入生理盐水或低分子量的右,切开下腔静脉放血,至无血色为止。然后迅速取材,将样品修成1mm×1mm×5mm大小,投入1%锇酸溶液中固定1小时,用1/15M磷酸缓冲液(pH7.4)清洗两次,每次10分钟。 2) 二甲基亚砜浸泡:将样品依次放入25%、50%二甲基亚砜溶液中,各浸泡30分钟。 3) 割断:用TF—1型冷冻割断装置进行割断。然后将割断后的样品放到50%二甲基亚砜中,等融化后再用1/15M磷酸缓冲液浸洗,每次10分钟,换液5次。 4) 软化及后固定:将样品放入0.1%锇酸中软化,温度20℃,时间48~72小时。然后用1%锇酸固定1小时,双蒸水浸洗1小时,换液几次,需彻底清洗干净。 5) 导电染色:将样品放入2%丹宁酸中2小时(或过夜),以双蒸水清洗1小时,换液几次。双蒸水清洗1小时。 6) 脱水、干燥及镀膜:按常规方法进行。扫描电镜是一种多功能的仪器、具有很多优越的性能、是用途较为广的一种仪器。山西哪家做扫描电镜哪家效果好

扫描电镜样本干燥 以临界干燥法较为理想,但必须要有专门的仪器临界点干燥器。当实验室不具备此种仪器时,可采用冰冻干燥法和乙腈干燥法。乙腈干燥法的关键是乙腈置换。样品经上述处理后,浸入 520% 的乙腈溶液中,然后依次更换 70% 、 80% 、 90% 、 95% 、 100% 的乙腈溶液,每次浸泡 15-20min ,较为后再换 100% 乙腈。然后进行真空干燥。即将乙腈置换后的样品连同青霉素瓶一起放到真空镀膜台的真空装置内,抽低真空,一般需 30-50min 。样品干燥后,待其温度升至室温时再放气,取出样品。 使用扫描电镜观察细胞样品的制备方法 5 、样品导电处理 用真空喷镀法。所用的仪器为真空喷镀仪,样品被安置在离蒸发源约 10-15cm 处的样品台上,样品进行旋转活动,先喷碳。后喷金,喷镀应均匀,完成后镜下观察。 山西专门做扫描电镜目前扫描电子显微镜的较主要组合分析功能有:X射线显微分析系统 (即能谱仪 , EDS) ,主要用于晶体和矿物的研究。

扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)是一种用于高分辨率微区形貌分析的大型精密仪器。具有景深大、分辨率高,成像直观、立体感强、放大倍数范围宽以及待测样品可在三维空间内进行旋转和倾斜等特点。另外具有可测样品种类丰富,几乎不损伤和污染原始样品以及可同时获得形貌、结构、成分和结晶学信息等优点。扫描电子显微镜已被普遍应用于生命科学、物理学、化学、司法、地球科学、材料学以及工业生产等领域的微观研究,*在地球科学方面就包括了结晶学、矿物学、矿床学、沉积学、地球化学、宝石学、微体古生物、天文地质、油气地质、工程地质和构造地质等。
用于扫描电镜观察微观形貌的生物样品类别多种多样,如植物、昆虫、细胞组织、 病理组织和细菌病毒等。生物样品要获得清晰真实的扫描电镜图像,需要解决样品失水 变形和图像放电的问题。扫描电镜样品仓都是处于一定的真空状态下,未经处理的含水 生物样品容易因水分挥发出现表面结构变形,用于扫描电镜观察微观形貌的生物样品类别多种多样,如植物、昆虫、细胞组织、 病理组织和细菌病毒等。生物样品要获得清晰真实的扫描电镜图像,需要解决样品失水 变形和图像放电的问题。扫描电镜样品仓都是处于一定的真空状态下,未经处理的含水 生物样品容易因水分挥发出现表面结构变形目前市场上提供的商品扫描电镜有:场发射扫描电镜(FEG-SEM)、常规扫描电镜(CSEM)以及生物用扫描电镜。

扫描电镜离子溅射镀膜法 在低真空(0.1~0.01托)状态下,在阳极与阴极两个电极之间加上几百至上千伏的直流电压时,电极之间会产生辉光放电。在放电的过程中,气体分子被电离成带正电的阳离子和带负电的电子,并在电场的作用下,阳离子被加速跑向阴极,而电子被加速跑向阳极。如果阴极用金属作为电极(常称靶极),那么在阳离子冲击其表面时,就会将其表面的金属粒子打出,这种现象称为溅射。此时被溅射的金属粒子是中性,即不受电场的作用,而靠重力作用下落。如果将样品置于下面,被溅射的金属粒子就会落到样品表面,形 成一层金属膜,用这种方法给样品表面镀膜,称为离子溅射镀膜法。 和真空镀膜法比较,离子溅射镀膜法具有以下优点:(1)由于从阴极上飞溅出来的金属粒子的方向是不一致的,因而金属粒子能够进入到样品表面的缝隙和凹陷处,使样品表面均匀地镀上一层金属膜,对于表面凹凸不平的样品,也能形成很好的金属膜,且颗粒较细。(2)受辐射热影响较小,对样品的损伤小。(3)消耗金属少。(4)所需真空度低,节省时间。 扫描电镜镜筒包括电子枪、聚光镜、物镜及扫描系统。山西哪家做扫描电镜哪家效果好
扫描电子显微镜由三大部分组成:真空系统,电子束系统以及成像系统。山西哪家做扫描电镜哪家效果好
扫描电镜检测块状试样制备 导电性材料:主要是指金属,一些矿物和半导体材料也具有一定的导电性。这类材料的试样制备较为为简单。只要使试样大小不得超过仪器规定(如试样直径较为大为φ25mm,较为厚不超过20mm等),然后用双面胶带粘在载物盘,再用导电银浆连通试样与载物盘(以确保导电良好),等银浆干了(一般用台灯近距离照射10分钟,如果银浆没干透的话,在蒸金抽真空时将会不断挥发出气体,使得抽真空过程变慢)之后就可放到扫描电镜中直接进行观察。 非导电性材料:试样的制备也比较简单,基本可以像导电性块状材料试样的制备一样,但是要注意的是在涂导电银浆的时候一定要从载物盘一直连到块状材料试样的上表面,因为观察时候电子束是直接照射在试样的上表面的。山西哪家做扫描电镜哪家效果好
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