人类衰老机制研究和老药物筛选的重要手段是选择合适的衰老动物模型。应用衰老动物模型对AD进行实验研究具有一定的意义。在实验研究中应用的衰老动物模型主要有自然衰老动物模型和快速老化动物模型。自然衰老模型自然衰老动物模型是通过对1~2月龄的大小鼠日常维持饲养到小鼠18~24月龄、大鼠24月龄基本相当于人类56~70岁来构建衰老动物模型。自然衰老动物模型建模简单，在衰老期时出现脑内神经元变性、胆碱能功能降低、感觉、行为和记忆障碍等与临床患者相似的各种病理特征。因此，在AD研究中自然衰老动物模型作为优先动物模型。心力衰竭(heart failure)简称心衰,是指由于心脏的收缩功能和(或)舒张功能发生障碍。云南小鼠动物模型技术
基于表型的药物开发(PBDD)：目前已重新替代药物发现平台，该方法更加依赖于动物模型和TBDD的药物鉴定和发现结果，之后进行二次筛选。（2）基于靶标的药物开发(TBDD)：明确药物作用的特定分子靶标，大多数药物在开发适应症时常采用此方法。临床前动物实验（标准实验室物种、菌株和实验动物）研究可为临床研究提供技术和科学基础，是发现和开发药物的基础，有助于改善人类健康。同时，新模型的开发和现有模型的改进也十分重要，如在基因靶标识别和验证、药物开发中CRISPR-Cas9的应用，计算生物学，药物筛选模型中的无脊柱动物等等。西藏乳鼠动物模型造模人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。
动物的选择目前常用的模式生物有果蝇、酵母、小鼠、斑马鱼等。目前主要是小鼠黑色素瘤模型。造模方法黑色素瘤小鼠模型可分为诱发性模型、移植性模型、转基因模型。一、诱导性模型应用：诱导的小鼠模型模拟人类受外界因素影响获得的黑色素瘤，常用于研究预防黑色素瘤形成。1紫外线诱导的小鼠模型通过紫外线照射获得的黑色素瘤模型被认为是临床上可靠的模型。方法：有研究者将HGF/SFcDNA表达的小鼠置于日光灯下用不同剂量(kJ/m2UVB、kJ/m2UVA、)进行紫外诱导15min。模型验证：诱导后的小鼠出现皮肤发红，偶有浅表皮脱屑，在组织病理学中观察到小鼠产生的大多数皮肤黑色素瘤中具有真皮成分，病变显示具有垂直生长期或浸润性恶性黑色素瘤以及淋巴结转移，这些病变与人类患者黑色素瘤页面状扩散的表皮内病变特征相似。缺点：但野生型或正常型小鼠一般不易发生UV诱导的黑色素瘤，因此UV诱导的黑色素瘤小鼠模型往往需要联合免疫缺陷小鼠，其操作技术较难、成本较高。2化学诱导化学致物诱导黑色素瘤小鼠模型大多采用DMBA和TBA诱导。DMBA是一种免疫抑制多环芳烃，其致机理是其活性代谢物被CYP450代谢成致物1，2－环氧化物-3，4-二醇DMBA，进而损伤DNA。TPA是通过蛋白激酶C充当启动子。
17-高原湿度环境模拟装置，18-动物行为学远程观察单元，19-功能控制面板。具体实施方式为了使本实用新型的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本实用新型进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型，即所描述的实施例是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处附图中描述和示出的本实用新型实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。因此，以下对在附图中提供的本实用新型的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本实用新型的范围，而是表示本实用新型的选定实施例。基于本实用新型的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。需要说明的是，术语“”和“第二”等之类的关系术语用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素。建立SD大鼠颈动脉损伤（结扎套管）模型。
准备碎冰和。把膜置于甲醇溶液中活化1分钟，然后转移至转膜液中平衡3分钟后备用。2、转膜组装转膜三明治夹，这一步很关键，重要的是胶和膜之间不能有气泡且膜与胶要保证贴合紧密(否则会翻车)，可以加多点转膜液泡着。组装好后加满转膜液，设置电源参数，我习惯恒流转膜，200-280毫安，1-2小时，根据分子量定，如50KD的分子用60分钟就够了。如果一个电源带两个转膜大槽即四块胶，我就会用恒压70-110V。这个过程重要的是做好降温。这里简单说一下蛋白分子量与玻璃板厚度，分离胶的浓度，转膜电源参数的选择问题。如果是能用1毫米的玻璃板就不用，因为转膜是在电场的作用下蛋白分子从胶上迁移到膜上，1毫米胶的蛋白迁移距离要比。选择更薄的胶蛋白转膜时间可以减少，从而减少发热，以免胶变形，条带也会更好看。然后是分离胶的浓度，如果是150—200KD的分子选10%以下的的分离胶，200—300KD的选8%的,300KD以上的选6%的，小于30KD的200mA30分钟，30-100KD的按分子量的数值算，如70KD，250mA70分钟;100-150KD的250mA100分钟;150—300KD的分子转膜条件用280毫安(以上均是对于，)，120分钟足矣，前提是胶的浓度相适应。五、封闭孵一抗1、封闭转膜结束后。急性肺损伤(acute lung injury，ALI)。云南小鼠动物模型技术
临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来。云南小鼠动物模型技术
40mmnaoh，)，并在金属浴100℃加热1h；(3)取出离心管，冷却至室温后，加入100μl的中和液(40mmtris-hcl，)，10000g离心2min后，取上清用于小鼠基因型鉴定。(3)pcr扩增：按照如系配置pcr反应体系2×taqmix：10μl尾巴组织裂解液：2μl引物1(gm20541-loxp-forward或six3-cre-forward)：1μl(浓度：10mm)引物2(gm20541-loxp-reverse或six3-cre-reverse)：1μl(浓度：10mm)ddh2o：6μl。引物序列如下：gm20541-loxp-forward序列：5’-attccccttcaagatagctac-3’；gm20541-loxp-reverse序列：5’-aatgatcaactgtaattcccc-3’；six3-cre-forward序列：5’-gccgccgggatcactctcg-3’；six3-cre-reverse序列：5’-ccagccgccgtcgcaactc-3’。扩增程序：pcr反应体系配制完后，在pcr仪上于95℃预加热5分钟使模板dna充分变性，然后进入扩增循环。在每一个循环中，先于95℃保持30秒钟使模板变性，然后将温度降到复性温度58℃，保持30秒，使引物与模板充分退火；在72℃保持30秒，使引物在模板上延伸，合成dna，完成一个循环。重复这样的循环25次，使扩增的dn段大量累积。，在72℃保持5分钟，使产物延伸完整，4℃保存。(4)凝胶电泳称取1g琼脂糖放于100mltaebuffer中。云南小鼠动物模型技术
