同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程：1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞，释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质，去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长，成本较高，步骤繁多，增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法，满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素：本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本，且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系，在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA，从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单，成本低廉，检测灵敏，且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。口腔拭子只能使用一次。性能优良口腔拭子市场行情
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加入20μteinaseK溶液，混匀。加入200μL缓冲液GB，充分颠倒混匀，在56℃放置14min（期间颠倒混合样品数次），溶液应变清亮，若未完全变清亮，延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇，充分振荡混匀10s，此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm离心30s，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW（已加入无水乙醇），12,000rpm离心30s，弃废液，将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm（~13，400×g）离心2min。将吸附柱放置新的，以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50～200μL洗脱缓冲液，室温放置2～5分钟，12,000rpm（~13，400×g）离心2min，将溶液收集到离心管中，测定浓度及纯度后，取3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6，本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21～25之间，荧光扩增曲线呈典型的S型。
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工艺说明：一次性医用耗材呼吸道***采样拭子试剂这种垂直固定方法源于植绒工艺，即把拭子置于静电场中，将纤维喷涂于拭子前列。这种工艺能实现具有开放式结构，且吸水性超高的薄层。不同于以往类似褥垫或软垫的传统缠绕拭子，尼龙植绒拭子没有会分散和圈闭样本的内部吸附核，而是使样本紧贴表面，从而能够快速完全地洗脱。产品描述：植绒拭子是由尼龙短纤维绒毛头和医用级ABS塑料杆构成。尼龙短纤维的作用就像一把柔软的刷子，能有效改善对细胞材料的采集；纤维间的毛细管运动形成强大的液压，由此摄取液体样本；同时样本紧贴拭子表面，易于洗脱。产品用途：采样尼龙植绒拭子用途***，在用于细菌学样本处理、***学细胞培养、DFA检验、快速直接的检验、酶免疫法检测、聚合酶链反应和基于分子诊断的检测，以及法医鉴定时都十分理想。也可用于流感、猪流感、禽流感、手足口等呼吸道***的咽喉部采样。产品特点：1.采用**的尼龙植绒技术，样本吸收更加快速2.新颖的折点设计，让拭子轻松折断并进入管中，更加便于操作3.限度的样本洗脱及转移，对微量DNA样本采集尤为出色4.经过***剂的特殊处理，防止微生物污染，封闭式包装，无菌、无酶、无***剂。然后用同样的方法在右侧脸颊部/右侧上下牙床处粘膜处进行第二根拭子的取样。原装口腔拭子批发价格
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