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尽管超微量分光光度计具有有效优势,但其使用仍需严格的操作规范。样本的均质性是关键挑战——微量样本极易因蒸发导致浓度偏差,建议在恒温恒湿环境下操作,并使用低吸附移液器吸头。针对高粘度样品(如细胞裂解液),需采用表面活性剂预处理或选择涡旋震荡模式增强混合。仪器维护方面,每日应使用无尘布清洁检测台,每月用异丙醇校准光路系统。值得注意的是,某些荧光染料(如SYBRGreenI)可能污染检测通道,需设置专门检测程序。近年出现的"虚拟比色皿"技术通过建立数学模型,可自动补偿气泡或液面不平整造成的误差。对于**浓度样本(<1ng/μL),建议采用多次重复测量结合移动平均算法提升信噪比。用户还需注意不同型号的算法差异——例如,某品牌采用**的A-T校正法,可更精确计算RNA在复杂缓冲液中的真实浓度。这些技术细节的优化,使检测结果的CV值(变异系数)可稳定控制在2%以内。
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