先将抗原结合到ELISA板上,随后分两步进行检测:首先加入检测抗体与抗原特异性结合,随后加入酶标二抗检测并利用底物显色。与直接ELISA相比,间接ELISA用到酶标二抗,具有更高的灵敏度,也需要更少的标记抗体,更经济。间接ELISA还提供了更大的灵活性,因为不同的一抗能够与单一标记的二抗一同使用。间接ELISA实验的缺点是存在交叉反应的可能性(酶标二抗直接与抗原结合),可能会增加背景,同时与直接ELISA相比,间接ELISA实验多了二抗孵育的步骤,实验周期延长。ELISA试剂盒离不开***的原料。阳江ELISA试剂盒生产哪家好
大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。一般说来,在5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。阳江ELISA试剂盒生产哪家好ELISA试剂盒不要在37℃或更高的温度加热解冻。
ELISA试剂盒以灵敏度较高、特异性较好的特点在上得到了普遍的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。下面分析ELISA试验操作中可能影响结果的原因,并给出相应的解决办法。选择试剂,选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。加样,可能原因:血清或血浆标本分离不好即进行加样;
ELISA检测试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株关键氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM抗体,这些抗体就会与HEV 的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与一次孵育结合上的HEV IgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEV IgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长: 450nm处测量O.D.值,按照本HEV IgM抗体elisa试剂盒的测试标准, O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。大部分ELISA试剂盒检测均以血清为标本。
ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理 30 分钟后废弃。每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是之后加底物溶液2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。手工洗板时每次加入洗涤液后,应静置 15~30s,不要将一个酶标孔中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。ELISA试剂盒应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。云南ELISA试剂盒多少钱
ELISA检测试剂盒的保质期一般都是在一年,如果保存得当的话,不会出现问题的。阳江ELISA试剂盒生产哪家好
评估试剂的实用性,试剂的稳定与否,对准确率的高低到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品反复比照试验,判定试剂符合要求后方可使用。加样要准确、快速。加样不准确,酶生成物的量不能确定,直接影响显色结果。另外,显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关,所以加样应慎重。要求在一定时间内加样完毕的实验,如果加样迟缓,便出现误差,而且试剂长时间暴露在外,尤其室温过高时,保存期会缩短甚至失效。使用校对过的微量移液器,排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要阳江ELISA试剂盒生产哪家好
深圳市宝安康生物技术有限公司是以食品安全检测试剂,胶体金检测卡,ELISA试剂盒,兽药残留检测研发、生产、销售、服务为一体的一般经营项目是:生物技术产品、食品安全检测盒、酶联免疫检测盒、检测卡的研发与销售(不含食品、药品、医疗器械等需审批的项目);国内贸易(法律、行政法规、国务*决定规定在登记前须经批准的项目除外);货物及技术进出口(法律、行政法规禁止的项目除外,法律、行政法规限制的项目须取得许可后方可经营)。许可经营项目是:食品安全检测盒、酶联免疫检测盒、检测卡的生产(不含医疗器械等限制项目)。(克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇类等);水产品检测类(孔雀石绿、氯霉素、呋喃唑酮代谢物、呋喃它酮代谢物、呋喃妥因代谢物、呋喃西林代谢物、甲基睾酮、己烯雌酚);霉菌*素类(黄曲霉*素B1、黄曲霉*素M1、玉米赤霉烯酮、呕吐*素、赭曲霉*素A、T-2*素、伏马菌素);乳制品检测类、蜂蜜检测类等。金刚烷胺、喹乙醇、磺胺类、四环素类、三聚氰胺、雌二醇、雌三醇、氟苯尼考、氟苯尼考胺、甲基睾丸酮、替米考星、阿苯达唑、西地拉非、罗丹明、安定等一百多种快速检测试剂盒与胶体金检测卡;动物疫病检测试剂盒有猪瘟、口蹄疫、蓝耳病、伪狂犬、圆环、细小等;供出入境检验局、农业局、养猪场、动物防疫监督所以及肉类食品加工。企业,公司成立于2012-05-14,地址在宝龙街道宝龙社区宝清路8号龙岗双环新一代信息技术产业园C栋10楼。至创始至今,公司已经颇有规模。本公司主要从事食品安全检测试剂,胶体金检测卡,ELISA试剂盒,兽药残留检测领域内的食品安全检测试剂,胶体金检测卡,ELISA试剂盒,兽药残留检测等产品的研究开发。拥有一支研发能力强、成果丰硕的技术队伍。公司先后与行业上游与下游企业建立了长期合作的关系。宝安康,宝安康生物,深圳宝安康集中了一批经验丰富的技术及管理专业人才,能为客户提供良好的售前、售中及售后服务,并能根据用户需求,定制产品和配套整体解决方案。我们本着客户满意的原则为客户提供食品安全检测试剂,胶体金检测卡,ELISA试剂盒,兽药残留检测产品售前服务,为客户提供周到的售后服务。价格低廉优惠,服务周到,欢迎您的来电!