安徽HBSS缓冲液答疑解惑

    磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常***，可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液，配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范围在1-5；碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范围在9-12；中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在。通常所说的磷酸缓冲液的浓度是指溶液中含有的所有的磷酸根离子的浓度，而不是钠离子（Na+）或者钾离子（K+）的浓度。正是因为如此，在配制中性缓冲液时，用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影响磷酸根离子的浓度，所得的缓冲液浓度仍是等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液原来的浓度，但是缓冲液中的钠离子（Na+）或者钾离子（K+）的浓度已经发生变化。 在生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值。安徽HBSS缓冲液答疑解惑

在生化研究工作中，常常需要使用缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到研究工作的成效。如果“提取酶”实验体系的pH值变动或大幅度变动，酶活性就会下降甚至完全丧失。所以配制缓冲溶液是一个不可或缺的关键步骤。缓冲溶液是无机化学及分析化学中的重要概念，缓冲溶液是指具有能够维持PH相对稳定性能的溶液。pH值在一定的范围内不因稀释或外加少量的酸或碱而发生***的变化，缓冲溶液依据共轭酸碱对及其物质的量不同而具有不同的pH值和缓冲容量。天津有酚红缓冲液答疑解惑PBS缓冲液可以用于分子克隆和细胞培养等实验。

ph值缓冲液常用三种

pH酸碱度常用的三种标准溶液：pH分别为4.0、7.0和10.0。标准缓冲液（应选择与供试液pH值接近的标准缓冲液），目前标准溶液有7种，在我国一般使用以下3种溶液：（pH值在25℃时）。1.邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）pH4.003；0.05M。2.混合磷酸盐（Na2HPO4）：磷酸二氢钾和磷酸氢二钠混合盐溶液pH6.864；0.025M3.硼砂（Na2B4O7·l0H2O）pH9.182；0.01M。三种标准缓冲液的配置方法：1.pH4，邻苯二甲酸氢钾标准缓冲液：精密称取在115±5℃干燥2～3小时的邻苯二甲酸氢钾[KHC8H4O4]10.12g，加水使溶解并稀释至1000ml。2.pH7，磷酸盐标准缓冲液（pH7.4）：精密称取在115±5℃干燥2～3小时的无水磷酸氢二钠4.303g与磷酸二氢钾1.179g，加水使溶解并稀释至1000ml。3.pH9，硼砂标准缓冲液：精密称取硼砂[Na2B4O7·10H2O]3.80g（注意：避免风化），加水使溶解并稀释至1000ml，置聚乙烯塑料瓶中，密塞，避免与空气中二氧化碳接触。

当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时，有阻碍溶液pH变化的作用，称为缓冲作用，这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液（如HAc与NaAc），弱碱及其盐的混合溶液（如NH3.H2O与NH4Cl）等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用，是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时，H离子基本上被A-离子消耗：所以溶液的pH值几乎不变；当加入一定量强碱时，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞中是不同的.

缓冲液的作用和使用注意事项

一、缓冲液的概念缓冲液（Buffersolution）通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液，能够在加入一定量其他物质时减缓pH的改变。以生物实验中**常用的一种缓冲液PBS为例，是由Na2HPO4、KH2PO4组成的缓冲对，在PH5.8-8.0范围内有较强的缓冲能力。二、缓冲液的作用缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值，使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。例如，苯酚在碱性介质及铁**钾存在下，可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料，为了防止芳香胺类的干扰以pH在10士0.2时**为适宜。为此，就需要在待测溶液中加入氨一氯化钱缓冲溶液调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。 在进行pH计校准时,首先需要选择合适的pH缓冲溶液。安徽HBSS缓冲液答疑解惑

缓冲液使用中的注意事项。安徽HBSS缓冲液答疑解惑

PBS缓冲液，是生物化学研究中使用**为***的一种缓冲液，主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，一般作为溶剂，起溶解保护试剂的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离，缓冲的pH值范围很广，而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2，以提供二价阳离子。

配制方法播报称取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸馏水中，用HCl调节溶液至7.4，***加蒸馏水定容至1L即可得0.01M PBS缓冲液。作用播报PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称，不仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用，蒸馏水不具有盐平衡作用，可以破坏生物蛋白的结构及生物特性；生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在**适条件下参与生物反应，所以使用PBS是优先。在细胞培养中，它通常用于洗涤传代培养中的细胞，以及在计数细胞时作为稀释溶液。 [2]PBS也不是***的，有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持比较好的条件保证生物活性物质保持其**完整的特性 [1]。 安徽HBSS缓冲液答疑解惑