山东氨基寡糖素十香菇多糖

       水溶性壳寡糖提纯和浓缩的方法，具有以下步骤：(1)将200l壳寡糖降解液(壳聚糖含量约2.5％)通过孔径为200nm的板式碳化硅陶瓷膜进行过滤预处理，去除未降解壳聚糖和其它不溶物杂质，得到192.0l透过液；(2)采用截留分子量为5000da的聚醚砜卷式超滤膜进一步对陶瓷膜透过液提纯，去除大分子多糖和其它杂质，得到180.0l超滤透过液；(3)采用截留分子量为500da聚酰胺卷式纳滤膜对超滤透过液进行一级和两级浓缩-加水分离浓缩(浓缩-加水-浓缩)，采用截留分子量为200da聚醚砜卷式纳滤膜对超滤透过液进行三级和四级浓缩-加水分离浓缩(加水-浓缩-加水-浓缩)，浓缩比例为4倍，加水比例为3倍，去除无机盐和单糖，结果得到45.0l壳寡糖纳滤浓缩液；(4)结果浓缩的壳寡糖浓缩液进行喷雾干燥，得到3.86kg高纯度的壳寡糖粉末，得率为77.2％。壳寡糖分子量一般小于 3,000u，易溶于水，部分溶于甲醇，不溶于乙醇。山东氨基寡糖素十香菇多糖

   在壳寡糖的螯合作用下，中微量元素更容易被果实吸收，番茄营养生长时期，％壳寡糖添加量处理的果实挂果数高，说明高浓度的壳寡糖可以促进植株从营养生长向生殖生长转化，而添加％的壳寡糖对于提高果实横径、果实产量以及果实转色率均有明显的效果，说明低浓度的壳寡糖可以促进果实的生殖生长。刘弘等在晚熟甜橙叶面进行的试验结果表明，喷施５％壳寡糖1000倍液，对于增强树势、促进生长、提高产量均有效果，其中果实可溶性固形物含量增加。金国强等研究发现，使用分子量为1500Ｄa和2500Da壳寡糖叶面喷施或灌根温州蜜柑的处理，有利于提高果实品质，朱潇婷等在“巨峰”葡萄上的应用结果也表明喷施或灌根均有利于提高葡萄果实可溶性固形物含量。该试验中，在水溶肥中添加不同浓度的壳寡糖对于提高番茄果实的可溶性固形物和可溶性糖含量均没有显著提高，推测是因为浓度设置的梯度过小和对照所有处理都额外添加了黄腐酸和氨基酸，但在果实维生素Ｃ含量方面，添加壳寡糖和海藻酸的处理均明显高于对照处理，且添加海藻酸的平均效果优于壳寡糖，说明海藻酸相较于壳寡糖更能促进果实维生素Ｃ的积累。海藻酸水溶肥能提升氮肥、钾肥吸收效率，对作物养分吸收有强化作用。山东氨基寡糖素防治晚疫病壳寡糖能够诱导果实的防御性，提高抗性相关酶的活性，増强细胞壁的活性，抑制果实病害的发生。

    壳寡糖是甲壳质、壳聚糖经生物技术降解后得到的低聚寡糖，一般由2～10个氨基葡萄糖组成，在国际上被称为“第六生命要素”，具有水溶性好、利于吸收等特点，在农业、食品、能源和医药等领域有着普遍的应用。近年来的研究表明，壳寡糖作为一种非质体信号物质，可通过信号识别、信号转导和调控抗性相关的基因及蛋白等方式参与植物对非生物胁迫的应答。王梦雨等发现壳寡糖可缓解低温冻害对小麦叶片造成的氧化损伤，明显增加叶片中脯氨酸和还原糖的累积，提升幼苗经受低温胁迫后的返青率;马莲菊等研究表明，低浓度壳寡糖预处理对镉胁迫下小麦幼苗生长有缓解作用，幼苗高度、根长、生物量、叶绿素含量均有所增加，同时抗氧化酶活性明显增强。

    膜分离技术发明的目的在于提供一种水溶性壳寡糖提纯和浓缩的方法，过程无相变，能耗低，易于工业化生产，提高壳寡糖的得率，且得到的壳寡糖高纯度、分子量分布窄，适用于制备符合医药级的壳寡糖产品，提高壳寡糖产品附加值。为实现上述目的，本发明提供的一种水溶性壳寡糖提纯和浓缩的方法，具有以下步骤：(1)将壳寡糖降解液通过陶瓷膜进行预处理，去除降解液中的不溶杂质(包括壳寡糖和其它不溶杂质)，得到陶瓷膜透过液；(2)采用超滤膜将陶瓷膜透过液进一步提纯，去除大分子蛋白质和大分子多糖，得到超滤透过液；(3)采用纳滤膜对超滤透过液进行浓缩-加水的四级分离浓缩，去除无机盐和单糖，得到壳寡糖纳滤浓缩液；(4)对浓缩的壳寡糖浓缩液进行喷雾干燥，得到高纯度的壳寡糖粉末；所述步骤(3)中，采用纳滤膜进行的四级分离和浓缩的每级的浓缩比例为2-5倍。 壳寡糖除了有上述保鲜作用外，还能够维持叶绿素的含量，从而有效控制西兰花的黄化。

   干旱胁迫下植物体内脯氨酸的累积是其合成和降解途径综合作用的结果，其中吡咯琳-5-羧酸合成酶(P5CS)和鸟氨酸δ-氨基转移酶(δ-OAT)分别是脯氨酸合成过程中谷氨酸途径和鸟氨酸途径的关键酶，脯氨酸脱氢酶是脯氨酸降解途径的关键酶。姜淑欣等研究发现，PEG胁迫下小麦叶片中谷氨酸和鸟氨酸合成途径加强，P5CS和δ-OAT活性均明显增加，而降解途径中PDH活性却受到抑制，引起脯氨酸含量增加。本研究中，处理12h和24h后，喷施100mg/L和200mg/L的壳寡糖明显增加了PEG胁迫下小麦幼苗叶片中的脯氨酸含量(处理24h喷施200mg/L壳寡糖除外)，可能是壳寡糖对脯氨酸合成和降解途径综合调控的结果，能进一步提高脯氨酸合成途径中的P5CS和δ-OAT活性，同时抑制PDH活性，促进干旱胁迫下脯氨酸的累积，增强了小麦的渗透调节能力。壳寡糖粉水溶性好，入水即溶，全水溶。山东氨基寡糖素1%的含量

壳寡糖处理相枯果实可溶性蛋白含量维持在较高的水平，在胆藏后期壳寡糖处理果实可溶性蛋白含量才开始下降。山东氨基寡糖素十香菇多糖

    壳寡糖是壳聚糖降解后聚合度在2～20范围内的低聚糖。与壳聚糖相比，它具有良好的水溶性及强大的生物学活性，是一种新型植物生长调节剂。壳寡糖可作为免疫激H因子，诱导植物先天性免疫，合成抗病菌物质，激发植物基因防御，增强植物抗病能力。研究表明，在植物遭遇逆境时低分子量的壳聚糖能发挥积极作用，提高净光合作用速率，抵抗渗透物质的合成，提高植物体抗氧化酶活性，增强去除自由基的能力，保护膜系统，增强植物体的自身抗性，促进植物生长。受限于壳寡糖不易制备，壳寡糖对作物的影响研究较少。目前大多数研究工作都没有说明试验中所采用的壳聚糖或寡糖分子量。2007年，本课题组筛选出高产壳聚糖酶菌株，并随后对该菌株的壳聚糖酶基因通过定点突变进行改造，克隆至Pichiapastoris，筛选的重组子酶活力高达1480U/mL。近年来，围绕壳聚糖的酶解工艺做了大量研究工作，可以制备分子量2000～3000的壳寡糖。因此，本文以水稻幼苗为研究对象，通过喷施不同浓度的壳寡糖溶液，研究壳寡糖对水稻幼苗生长以及抗逆生理指标的影响，以期为研究壳寡糖的功能以及稳定水稻产量提供基础。 山东氨基寡糖素十香菇多糖

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