浙江褐藻寡糖 企业标准

   从植物生长与抵抗逆境的特性出发，利用外源性寡糖对其进行作用，通过检测植物生长指标和抗逆指标变化，来研究寡糖在植物促生长与诱导抗逆过程中的作用机制。一方面对褐藻寡糖在植物促生长与抗逆领域的作用机理进行表征，另一方面，也希望能够通过此研究获得具有优良生物功能活性的寡糖制剂，为农业生产抗灾减灾做出贡献。选择三种来源（褐藻胶、果胶、壳聚糖）的不同分子量大小的九种寡糖片段进行研究。利用植物的促生长和抗逆指标进行筛选，获得了一种既具有明显的促生长作用，又具有抗逆作用的寡糖片段，为褐藻寡糖HZ3，经过质谱分析，其组分是以二、三糖为主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。第二部分是利用植物的植株、愈伤组织和悬浮细胞为材料，建立起寡糖促生长的综合性的验证方法。对植株分别选择了双子叶植物豌豆和单子叶植物玉米，利用寡糖浸种，分别考察在种子萌发与幼苗生长初期其体内蛋白酶、淀粉酶和激S含量的变化，结合种子与植株的生长指标，探讨寡糖的促生长作用机理。褐藻寡糖是褐藻胶的降解产物，是一种无支链阴离子寡糖，由β-D-甘露糖醛酸和古罗糖醛酸构成。浙江褐藻寡糖 企业标准

    AOS增强植株对致病疫霉的抗性用100μg/mLAOS分别喷施拟南芥和本氏烟,24h后,接种致病疫霉。结果显示与喷施ddH2O的植株相比,AOS处理的叶片接种部位的水渍及叶片的黄化程度明显降低,检测致病疫霉菌丝的生长量也明显低于对照,表明AOS也可以增强植株对致病疫霉的抗性。AOS诱导植物早期免疫应答反应对喷施AOS和ddH2O的本氏烟叶片进行相关免疫反应的检测。结果显示,在气孔开度方面,与ddH2O处理的对照组相比,AOS处理的本氏烟叶片的气孔开度明显较低,表明AOS通过调节叶片表面气孔的开合抑制病原菌的入侵。分别于2h、4h、8h、24h和48h时,对喷施AOS和ddH2O的本氏烟叶片进行DAB和NBT组织化学染色,发现喷施ddH2O的叶片染色程度较浅,而喷施AOS的叶片染色程度较深,且在24h时染色深。qRT-PCR检测ROS合成基因RbohA、RbohB以及去除基因SOD、APX和CAT表达水平,显示RbohB基因表达量明显上调,CAT基因表达量明显下降,说明AOS可以通过抑制CAT基因和促进RbohB基因的表达,提高过氧化氢的积累。河北褐藻寡糖如何食用褐藻寡糖可以诱导植物气孔关闭，有效抑制病原菌侵染宿主。

    褐藻寡糖是由褐藻多糖（褐藻胶）经过酸、氧化剂或者裂合酶降解而获得的小分子量的片段。褐藻胶是褐藻细胞壁的填充物质，是由甘露糖醛酸和古罗糖醛酸结合而成的直链线性嵌段型高分子聚合物。其分子量比较大，在104-106u之间。组成褐藻胶的结构单元是β-(1,4)连接的D-甘露糖醛酸(M)和α-(1,4)连接的L-古罗糖醛酸(G)。在生物合成过程中甘露糖醛酸残基形成聚合物后，部分在酶的作用下转变成了古罗糖醛酸。但是由于其分子量较大，不容易被吸收，常常是被作为膳食纤维应用于食品中，因此极大限制了褐藻胶的应用。经过降解获得的小分子量的寡糖片段，水溶性好，易于被吸收利用，因此应用也越来越普遍。近年来，许多研究已经证实褐藻寡糖能够在植物调节生长和诱导抗病领域发挥作用。

   褐藻寡糖喷施后，黄瓜果实的抗氧化酶G-POD4基因表达水平上升，T2组是CK组的倍。喷施组SOD1基因表达水平均升高，其中T3组较CK组升高了倍，效果明显。褐藻寡糖喷施后，分别检测叶片和根中WRKY家族转录因子的表达变化。在黄瓜叶片中，第Ⅰ类WRKY家族基因，WRKY2、WRKY4、WRKY23、WRKY39响应褐藻寡糖表达上调，第Ⅱ类WRKY家族基因有15个基因响应褐藻寡糖表达上调，第Ⅲ类WRKY家族基因基因中WRKY20、WRKY22、WRKY34、WRKY35在12h或24h出现表达上调的峰值。在黄瓜根中，第Ⅰ类WRKY家族基因，WRKY2、WRKY23、WRKY39响应褐藻寡糖表达上调，第Ⅱ类基因中有14个基因响应褐藻寡糖表达上调，第Ⅲ类WRKY家族基因有6个基因响应褐藻寡糖表达上调。褐藻寡糖可以作为诱抗剂能够诱导植物产生抗逆性能，还能够调节植物的生长发育。

研究了在浸麦阶段添加褐藻胶寡糖对大麦发芽力和发芽率、大麦发芽过程中水解酶活力及麦芽质量的影响。结果表明，添加５０ｍｇ／Ｌ褐藻胶寡糖时大麦发芽力和发芽率比对照组分别提高了４６．４％和１２．０％。褐藻胶寡糖能够显著提高大麦发芽过程中α－淀粉酶、β－淀粉酶、蛋白酶和β－葡聚糖酶活力。发芽结束时，添加５０ｍｇ／Ｌ褐藻胶寡糖的α－淀粉酶、β－淀粉酶、蛋白酶和β－葡聚糖酶活力比对照组分别提高了４３．５％、２２．９％、２０．６％和２０．５％。褐藻胶寡糖还能提高麦芽质量，与对照组相比，添加５０ｍｇ／Ｌ褐藻胶寡糖时麦芽的脆度、浸出物质量分数、α－氨基氮质量分数、库尔巴哈值和糖化力分别提高了６．１％、８．０％、２１．２％、７．３％和８．６％，麦芽的β－葡聚糖质量分数和黏度分别降低了２９．２％和１５．４％。研究发现，褐藻寡糖与细胞膜的结合与钙离子通道无关。上海褐藻寡糖和褐藻酸寡糖区别

褐藻胶寡糖（AOS）使毒死蜱对小麦幼苗的伤害有明显缓解作用，增强植物对毒死蜱胁迫的抗性。浙江褐藻寡糖 企业标准

    褐藻寡糖应用于翅碱蓬种子的萌发和抗逆中，研究了褐藻寡糖对翅碱蓬种子萌发和不同盐度下抗盐胁迫能力的影响。结果表明，褐藻寡糖可有效提高翅碱蓬种子的萌发率，由清水对照组的66.67%提升至0.02mg/mL的78.33%，同时萌发的幼芽中可溶性糖含量也有较大提升；经褐藻寡糖处理，盐胁迫下翅碱蓬种子的萌发率、萌发芽长有明显的提升，翅碱蓬幼芽中游离脯氨酸含量提升，在200mmol/L及以上盐浓度下效果尤为明显。结果显示种子在褐藻寡糖的作用下抗盐胁迫能力提高，在黄河三角洲的高盐环境中可促进翅碱蓬幼苗的生长和抗逆能力的提升。翅碱蓬是黄河三角洲地区重要的耐盐草本植物，但在当前的应用中存在着种植成活率低的问题，尤其是幼苗移植生长时期，幼苗后续成活率低，浪费了大量的人力物力财力。在翅碱蓬的生活史中，种子萌发和幼芽生长是基础的部分，这两个阶段的生长状况关系到翅碱蓬后续移植成活率的高低。浙江褐藻寡糖 企业标准

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