海南褐藻寡糖测定方法

从植物生长与抵抗逆境的特性出发，利用外源性寡糖对其进行作用，通过检测植物生长指标和抗逆指标变化，来研究寡糖在植物促生长与诱导抗逆过程中的作用机制。一方面对褐藻寡糖在植物促生长与抗逆领域的作用机理进行表征，另一方面，也希望能够通过此研究获得具有优良生物功能活性的寡糖制剂，为农业生产抗灾减灾做出贡献。选择三种来源（褐藻胶、果胶、壳聚糖）的不同分子量大小的九种寡糖片段进行研究。利用植物的促生长和抗逆指标进行筛选，获得了一种既具有明显的促生长作用，又具有抗逆作用的寡糖片段，为褐藻寡糖HZ3，经过质谱分析，其组分是以二、三糖为主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。第二部分是利用植物的植株、愈伤组织和悬浮细胞为材料，建立起寡糖促生长的综合性的验证方法。对植株分别选择了双子叶植物豌豆和单子叶植物玉米，利用寡糖浸种，分别考察在种子萌发与幼苗生长初期其体内蛋白酶、淀粉酶和激S含量的变化，结合种子与植株的生长指标，探讨寡糖的促生长作用机理。褐藻寡糖可以作为诱抗剂能够诱导植物产生抗逆性能，还能够调节植物的生长发育。海南褐藻寡糖测定方法

糖类物质按照分子聚合度的大小可以分为单糖、寡糖和多糖。由一个分子构 成的糖称为单糖，一般来说2~20个分子构成的短链糖苷称为寡糖或者低聚糖，100 个以上的称为多糖。寡糖可以由多糖通过 酶解、酸水解和氧化降解等方法而获得，制取比较方便，来源也非常普遍，结构 和功能也各不相同，在应用中无毒无污染，在环境中可以自行降解，已经证明， 寡糖具有多种生物活性，能够调节植物的生长，诱导植物抗逆性的产生，目前， 寡糖类诱抗剂的研究已成为植物诱抗剂研究的热点。寡糖主要的构成单元为五碳糖和六碳糖，其中以六碳糖居多。即葡萄糖、半 乳糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖等。有这些单糖经过聚合以直链或者支链 的形式形成多种结构和功能各异的多糖。据报道，目前已经确定的寡糖已有上千 种。动植物的结构多糖具有非常复杂的结构，在合适的条件下又可以进行降解， 产生许多结构不同、大小不一的寡糖片段，具有多种功能活性，Albersheim 等（1985）将这些具有多种生物活性的寡糖被统称为寡糖素。云南褐藻寡糖吸收褐藻寡糖宜存于阴凉干燥处，运输过程中避免雨淋、挤压、碰撞。

褐藻寡糖喷施后，果期的品质均有所提高。其中维生素 C 含量 0.1%浓度 处理升高明显，是未喷施组的 1.34 倍。可溶性蛋白含量 0.5%浓度处理效果好是未喷施组的 1.59 倍。可溶性糖含量浓度为 0.2%、0.3%效果好，两组均是 未喷施组的 1.39 倍。根据糖酸比分析，几组处理 0.2%、0.3%效果好。褐藻寡糖喷施后黄瓜叶片 CAT 活性显著提高（p<0.05）, 0.2%处理是未 喷施组的 1.40 倍，果期 0.2%处理是未喷施组的 5.03 倍。叶片 POD 活性被激 发,0.2%处理是未喷施组的 1.01 倍，SOD 活性没有显著提高。果实 CAT、POD、 SOD、APX 、GR 活性均有所增高，0.2%处理较 CK 增幅大。

    美国复杂碳水化合物研究中心的主任Albersheim等提出了寡糖素这个概念，他认为低浓度的寡糖是一种信号分子，可以与作物相互作用，对作物的生长、发育和繁殖等起调控作用，抵Z病原微生物的侵染通过在调节过程中积累抗病物质。褐藻寡糖是从植物和病菌中提取的低聚糖，对植物种子萌发、根系生长和枝条伸长有促进作用，来源也非常普遍，开发应用的潜在可能性大，可以改善现阶段设施内作物生产过程中化肥等的过度使用给人类和环境带来的巨大危害。植物生长表现为，植物细胞体积的增加、植物细胞分裂以及组织特性的发育过程。细胞分裂过程中的动力和扩张的分子机制主要依赖糖类等碳水化合物来提供能量。糖信号是决定植物生长发育的中心，与其他信号网络连接，控制细胞增殖和扩张。植物的生长发育还依赖于蛋白质的合成，而糖和环境信号对mRNA翻译的调控至关重要。 褐藻寡糖是由褐藻胶经Vibriosp.510-64菌株产生专一性褐藻胶裂合酶酶解制备的寡糖片段。

褐藻寡糖对POD及其同工酶的影响POD是植物体内重要抗逆酶类之一,能够催化乙烯生物合成,参与氧自由基消除反应,其活力高低通常是表征植物抗逆性能关键指标之一。喷施ADO后进行低温胁迫,浓度为0.05%,0.20%,0.30%ADO组能够显著提高POD活力,同工酶谱带宽度增加,颜色加深,表明POD含量受到ADO诱导而增加;并且0.20%和0.30%浓度组还能够诱导产生POD同工酶新谱带,以0.20%浓度ADO诱导效果好;0.10%浓度ADO组24h内POD变化幅度较小且处于较低水。48h后迅速升高,表明叶片内氧自由基含量升高,细胞开始受到损伤;高浓度1.00%ADO组随低温胁迫时间延长细胞损伤加剧,POD活力不断降低。褐藻寡糖与作物细胞作用后还可以在细胞的信号转导过程中，对细胞的生物活性进行调节，增强植物抗病能力。河南好的褐藻寡糖

褐藻寡糖用过的容器应妥善保管，不可做他用，也不可随意丢弃。海南褐藻寡糖测定方法

褐藻寡糖是褐藻胶的降解产物，由2~10个单糖通过糖苷键结合而成，具有溶解性好，稳定性强等特点。褐藻胶主要来源于海带、马尾藻等藻类，是由β-D-甘露糖醛酸和α-L-古罗糖醛酸通过1-4糖苷键连接形成的阴离子酸性多糖。经过多年研究发现褐藻寡糖在农业、医学等多个方面都具有重要的应用价值和研究意义，尤其在在农业方面，褐藻寡糖对经济作物有较好的应用效果。在增产方面，应用褐藻寡糖于黄瓜、小麦,、玉米、水稻等多种农作物，可明显促进作物生长，增加产量；在种子萌发方面，褐藻寡糖可促进大豆、高粱、豌豆等种子的萌发，提高萌发率和萌发势等；在抗逆方面，施用褐藻寡糖可提高水稻的抗病虫害能力，同时提高幼苗的镉胁迫抗性，提高小麦的抗干旱胁迫等。翅碱蓬常被用于盐碱地的生态工程建设中，但是在东营黄河三角洲地区的实际应用中发现，翅碱蓬在种植中存在成活率低的问题，尤其是幼苗移植生长时期，幼苗后续成活率低，人力物力财力投入成本较高。推测原因为移植后的幼苗对盐碱地环境难以适应，抗逆性较差。因此如何提高翅碱蓬的幼苗后续成活率和抗逆性是当前研究的重点问题。褐藻寡糖已被证实对草本植物具有明显的提质、抗逆效果，如水稻、小麦等。海南褐藻寡糖测定方法

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