重庆褐藻寡糖测定方法

AOS促进植物体内胼胝质的沉积对喷施AOS和ddH2O的拟南芥叶片进行苯胺蓝染色,结果显示,AOS处理的叶片叶脉处有明显的荧光现象,说明AOS可以促进胼胝质的积累,抵抗病原菌的入侵。AOS激发SA信号通路对AOS和ddH2O处理后的本氏烟叶片进行液相色谱测定,结果显示,AOS处理的叶片中SA的含量相对较高;接种PVX后,叶片中的SA的合成进一步增加。同时,利用qRT-PCR检测了AOS处理后SA合成途径中的两个关键基因ICS和PAL的表达水平,结果表明ICS基因的表达水平明显高于对照,而PAL基因的表达水平与对照相比并无明显差别,说明AOS主要通过ICS途径诱导SA的合成。利用qRT-PCR技术检测SA信号通路中的标志基因的表达水平,发现NPR1、PR1a的表达水平明显提高。上述结果说明,AOS可以促进SA的积累,并激发SA信号通路。褐藻寡糖与作物细胞作用后还可以在细胞的信号转导过程中，对细胞的生物活性进行调节，增强植物抗病能力。重庆褐藻寡糖测定方法

糖类物质按照分子聚合度的大小可以分为单糖、寡糖和多糖。由一个分子构 成的糖称为单糖，一般来说2~20个分子构成的短链糖苷称为寡糖或者低聚糖，100 个以上的称为多糖。寡糖可以由多糖通过 酶解、酸水解和氧化降解等方法而获得，制取比较方便，来源也非常普遍，结构 和功能也各不相同，在应用中无毒无污染，在环境中可以自行降解，已经证明， 寡糖具有多种生物活性，能够调节植物的生长，诱导植物抗逆性的产生，目前， 寡糖类诱抗剂的研究已成为植物诱抗剂研究的热点。寡糖主要的构成单元为五碳糖和六碳糖，其中以六碳糖居多。即葡萄糖、半 乳糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖等。有这些单糖经过聚合以直链或者支链 的形式形成多种结构和功能各异的多糖。据报道，目前已经确定的寡糖已有上千 种。动植物的结构多糖具有非常复杂的结构，在合适的条件下又可以进行降解， 产生许多结构不同、大小不一的寡糖片段，具有多种功能活性，Albersheim 等（1985）将这些具有多种生物活性的寡糖被统称为寡糖素。安徽褐藻寡糖如何食用褐藻寡糖使作物幼苗的生物量升高，影响作物的生理指标如丙二醛（MDA）含量降低，相关抗氧化酶活性升高。

    褐藻胶寡糖对植物来说也是一种重要的信号分子，能够参与植物的生长调节和诱导抗病过程。研究发现，褐藻寡糖对植物具有促生长作用。Guyen等2000年发现，利用γ-射线照射褐藻胶得到降解组分，分子量小于104Da的褐藻胶降解产物的混合物显示出对水稻和花生的促生长作用，适当控制混合物浓度可提高作用效果。Natsume等(1994)报道酶解褐藻胶获得的降解产物对多种植物具有延长生命周期的作用；进一步研究发现酶解产物中分离得到的三糖（M或G）具有明显的促大麦根生长活性(Quocetal.,2000)；Tomoda等（1994）则报道了聚合度为4的褐藻胶寡糖（M或G）对大麦根促生长作用明显。Iwasaki&Matsubara等（2000b）对酶解褐藻胶寡糖对莴苣的促根生长活性研究表明，聚合度为2-8糖的混合物在浓度200-3000ug/ml的范围内使莴苣根生长长度为空白组的2倍；利用凝胶色谱等方法分离各种聚合度的寡糖，发现三糖、四糖、五糖及六糖（M或G）具有很高的促根生长活性。褐藻寡糖能够作为信号调节分子作用于植物，促进植物的生长，此领域的研究为海洋活性寡糖的开发开辟了新的途径。

褐藻寡糖是一种天然的植物生长调节剂，安全无污染，对作物的促生长作用是褐藻寡糖的生物学活性之一。褐藻寡糖能够提高作物的光合作用，增加有机物的积累，影响作物的生长速率，提高果实的产量，并且提升其品质。通过提高细胞壁转化酶、酸性转化酶、山梨醇脱氢酶、山梨醇氧化酶和 ATP 酶等糖积累的关键酶活性，从而影响果实的淀粉含量、总可溶性糖、细胞中花青素的含量以及果实的新鲜程度和硬度，光合色素含量等来改善果实的产量和品质。褐藻寡糖作为一种信号分子，还参与调节植物的生长、发育以及新陈代谢过程，能调控生物合成过程，从而保护果实品质，提高果实的产量。褐藻寡糖的结合是与膜上的蛋白有关。通过封闭细胞膜上的钙离子通道，对其进行阻断后结合寡糖。

AOS对PVX、TMV有较好的防治效果分别在喷施AOS前24h和喷施AOS后24h接种带有GFP标签的PVX。发病后,在紫外灯下观察绿色荧光并检测病毒积累量。结果显示先喷施AOS后接种PVX,5d后,30.6%系统叶片出现荧光,而喷施ddH2O的本氏烟,85.7%上部叶片出现荧光;喷施AOS的本氏烟中病毒的积累量也明显低于对照。先接种PVX后喷施AOS,与喷施ddH2O的本氏烟系统叶片的荧光强度并无明显区别,本氏烟中病毒的积累量也无明显差异。以上结果说明,AOS对病毒有明显的预防效果。用不同浓度的AOS处理本氏烟后接种PVX,检测抗病效果,结果显示在AOS浓度为100μg/mL时,其抗病效果好。之后,采用100μg/mL的AOS喷施本氏烟后,接种烟C花叶病毒（TMV）,发现与对照组相比,AOS处理的叶片上荧光强度也明显减弱,TMV的积累量也明显降低,表明AOS也可以增强植物对TMV的抗性。以上结果说明,AOS增强植物对病毒的抗性具有普遍性。褐藻寡糖为从海洋生物中提取的生物多糖，使用时无需安全间隔区。四川药品褐藻寡糖

褐藻寡糖水溶性好，易于被吸收利用，也是重要的信号分子，能够参与植物的生长调节和诱导抗病的过程。重庆褐藻寡糖测定方法

    褐藻寡糖对黄瓜幼苗生长指标的影响黄瓜幼苗经不同分子量的褐藻寡糖处理，处理14ｄ后，在外观形态方面，ADO2和ADO3处理过的黄瓜幼苗与对照组相比有明显差别，ADO2和ADO3处理过的幼苗长势明显好于对照组，经不同分子量的ADO处理的黄瓜幼苗的生长状况均好于对照组，各种生长指标包括株高、茎粗、株幅及鲜重都明显高于对照。ADO1，ADO2，ADO3，ADO4处理植株的株高分别提高了％，％，％和8％，茎粗分别提高了５．８％，２３．９％，２２．７％和７．０％，株幅分别提高了２１．９％，２７．０％，３５．４％和２４．３％，鲜重分别提高了５０．８％，５３．５％，７４．３％和５４．１％。其中ＡＤＯ２和ＡＤＯ３处理组黄瓜幼苗的各项生长指标都高于ＡＤＯ１和ＡＤＯ４处理组。因此，选择ＡＤＯ２和ＡＤＯ３进行后续试验。褐藻寡糖对黄瓜叶片叶绿素含量的影响由图３所示，经过ＡＤＯ处理的黄瓜叶片中的叶绿素ａ和叶绿素总含量均比蒸馏水处理的对照有明显性提高，ＡＤＯ处理组组间比较发现，ＡＤＯ３对叶绿素含量的提高比ＡＤＯ２更为明显。２种褐藻寡糖对叶绿素ａ的含量的影响较大，叶绿素ｂ的含量变化相对较小，而光合作用与叶绿素ａ的含量关系相对密切。 重庆褐藻寡糖测定方法

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