上海褐藻寡糖测定方法

糖类物质按照分子聚合度的大小可以分为单糖、寡糖和多糖。由一个分子构 成的糖称为单糖，一般来说2~20个分子构成的短链糖苷称为寡糖或者低聚糖，100 个以上的称为多糖。寡糖可以由多糖通过 酶解、酸水解和氧化降解等方法而获得，制取比较方便，来源也非常普遍，结构 和功能也各不相同，在应用中无毒无污染，在环境中可以自行降解，已经证明， 寡糖具有多种生物活性，能够调节植物的生长，诱导植物抗逆性的产生，目前， 寡糖类诱抗剂的研究已成为植物诱抗剂研究的热点。寡糖主要的构成单元为五碳糖和六碳糖，其中以六碳糖居多。即葡萄糖、半 乳糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖等。有这些单糖经过聚合以直链或者支链 的形式形成多种结构和功能各异的多糖。据报道，目前已经确定的寡糖已有上千 种。动植物的结构多糖具有非常复杂的结构，在合适的条件下又可以进行降解， 产生许多结构不同、大小不一的寡糖片段，具有多种功能活性，Albersheim 等（1985）将这些具有多种生物活性的寡糖被统称为寡糖素。褐藻寡糖分子量低，水溶性强，稳定性高，具有很多生物活性，如抗瘤、抑菌、抗逆性等。上海褐藻寡糖测定方法

利用高效安全无污染的生物制剂褐藻寡糖外源喷施黄瓜幼苗,将黄瓜幼苗分为喷施组和未喷施组;再配制不同浓度（0.05%、0.1%、0.2%、0.3%、0.5%、）的褐藻寡糖溶液喷施黄瓜幼苗。对黄瓜幼苗的生长指标,抗氧化酶活性及抗氧化酶相关基因、WRKY基因家族对褐藻寡糖应答情况进行测定。旨在探究不同浓度褐藻寡糖对黄瓜的生长、产量及品质的影响,对褐藻寡糖对作物促进作用的机理进行了初步研究,探索WRKY转录因子和褐藻寡糖在黄瓜生长中的重要功能及作用机制。结果如下:褐藻寡糖促进黄瓜幼苗生长发育,主要表现为生物量（株高、茎粗）随着浓度的升高呈增长趋势,叶片数增多。与未喷施组相比,喷施组生物量均有所改善。对果期产量也有所提高。褐藻寡糖喷施后,果期的品质均有所提高。其中维生素C含量0.1%浓度处理升高明显,是未喷施组的1.34倍。可溶性蛋白含量0.5%浓度处理效果好是未喷施组的1.59倍。可溶性糖含量浓度为0.2%、0.3%效果好,两组均是未喷施组的1.39倍。根据糖酸比分析,几组处理0.2%、0.3%效果好。广东褐藻寡糖纯品褐藻胶经γ-射线照射后得到相对分子质量小于104Da的褐藻寡糖片段混合物能够明显促进水稻和花生植株的生长。

发现的真正的寡糖类激发子是葡聚糖激发子，它是从大雄疫霉（Phytophthoramegaspermn）大豆专化型的培养物过滤液中被检测出来的。它能够诱导植保素的合成与积累(Sharpetal.,1984a)。近年来寡糖抗病性研究主要集25中在对壳寡糖的抗病研究。壳寡糖是一类氨基葡萄糖通过β-1，4糖苷键而形成的的低聚糖，它主要来源于许多病菌的细胞壁和昆虫和动物的甲壳，研究发现壳寡糖能够诱导植物产生系统获得性抗性和抗病性。郭成瑾(2006)发现聚合度为3-10的壳寡糖在10μg/ml-200μg/ml范围内处理植株均能够诱导植株抗花叶病毒能力的提高。周自云等(2004)从杨树溃疡病菌丝提取物和甲壳几丁质为原料获得的三种寡糖对植物的愈伤组织进行作用，研究发现三种寡糖均能诱导愈伤组织中的几丁质酶、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶、HRGP、PAL和绿原酸的含量。此外还有多种其它的活性寡糖片段如寡聚半乳糖醛酸(Philippeetal.,1995)等均具有植物诱抗剂的作用。

褐藻胶寡糖能够促使大麦克服休眠、激发大麦发芽、加速大麦发芽速率和提高发芽能力，这说明褐藻胶寡糖能够促进谷物种子萌发的激发子。本研究结果表明，在大麦发芽过程中，通过在浸麦过程中添加褐藻胶寡糖能促进水解酶活力的提高，进而使麦芽的溶解性能显著提高，缩短了制麦周期，同时显著提高了麦芽质量和麦汁得率。生物活性寡糖作为外源激发子对种子萌发、植物生长及防御反应具有一定的调节功能。这一结果可能是由于褐藻胶寡糖作为带负电的生物活性寡糖，被植物吸收后，在质外体空间与Ｃａ２＋结合，形成糖－钙复合物，打破植物体内的钙稳定平衡，使胞质Ｃａ２＋浓度增加，从而激发种子萌发相关酶类。此外，还可能通过调控内源激S水平及其平衡来激发种子细胞水解酶活性，终表现为大麦发芽速率的增加和麦芽品质的改善。褐藻胶寡糖具有独特的化学结构，其在细胞表面的接受蛋白、信号传导途径及下游相关基因表达的分子机制还不清楚，有待进一步深入研究。褐藻胶寡糖能够有效的增强莴苣植株的根系活力。

研究发现，寡糖对豌豆和玉米的促生长作用不同。对双子叶植物豌豆，以0.15%褐藻寡糖效果比较好，第7d根和芽干重的增长率分别为79.2%和53.5%，是通过促进激S含量、蛋白酶和脂肪酶的活力来促进种子萌发和幼苗的生长；对单子叶植物玉米，以0.20%褐藻寡糖效果比较好，第7d根和芽干重的增长率分别为140%和143.8%，是通过促进激S含量、脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶共同作用来促进种子萌发和幼苗生长。通过对愈伤组织的诱导和继代培养的研究，发现，此褐藻寡糖具有激S的作用，在极低的浓度下能够诱导愈伤组织的产生，并能够在有2,4-D的培养基中促进愈伤组织的诱导和生长。对悬浮细胞的研究发现，0.03%寡糖能够明显增强细胞内的激S含量，从而对细胞的生长进行调控。褐藻寡糖诱导植物体内产生各种抗性物质来缓解逆境因素对植物造成的损伤，从而达到抗逆的目的。上海褐藻寡糖测定方法

褐藻寡糖水溶性好，易于被吸收利用，也是重要的信号分子，能够参与植物的生长调节和诱导抗病的过程。上海褐藻寡糖测定方法

褐藻寡糖对烟C叶片叶绿素含量的影响叶绿素是高等植物进行光合作用的主要成分,叶绿素损失或者破坏会严重影响植物生长发育进程,在某种程度上叶绿素含量多少表征着植物健康程度。图3和图4是烟C叶片中叶绿素a和叶绿素b在喷施褐藻寡糖后的变化结果。研究发现:经过6h低温胁迫,水处理组叶绿素a和b含量分别下降了23.9%和6.0%,随着时间延长,2种叶绿素含量继续减少,48h后分别只有对照的51.2%和78.3%,说明在低温胁迫下,水处理组叶绿素受到低温损伤破坏,且随着时间延长,破坏不断加剧。在2种叶绿素中,叶绿素a比叶绿素b更容易受到低温破坏。喷施了0.05%～0.30%褐藻寡糖后进行低温胁迫,烟C叶片叶绿素a和b含量比水处理组有不同程度升高,表明此浓度范围内寡糖能够减轻低温对叶绿素的损伤,其中以0.20%寡糖溶液效果明显,但0.10%褐藻寡糖处理组在48h时叶绿素a和b的含量都有较大幅度下降,表明叶绿素受到破坏损伤;高浓度1.00%褐藻寡糖对烟C起破坏作用,与对照组相比,叶绿素a和b含量都有较大幅度减少,随时间延长,二者含量继续降低,表明烟C叶绿素损伤加剧。上海褐藻寡糖测定方法

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