山东水杨酸氨基寡糖素实验

    水稻是世界上重要的农作物之一，它对寒冷的胁迫非常敏感，尤其是在幼苗阶段。不可预测的低温胁迫会导致水稻产量明显下降（5-10％），并对农业经济产生不利影响。因此，提高水稻耐寒能力是提高作物产量的关键。壳寡糖是一种环境友好的免疫诱抗剂，已被广泛应用于植物免疫系统中。但壳寡糖诱导水稻抗寒的机制尚不完全清楚，本论文旨在探究壳寡糖提高水稻幼苗抗寒性的机制，以期为壳寡糖作为植物免疫诱抗剂应用于农业中提供科学依据。首先，在本研究中，探究了两种不同脱乙酰度的壳寡糖在不同处理方式下的抗寒效果。结果表明，两种壳寡糖在根系处理时效果好。低温处理后，施用脱乙酰度为98％的壳寡糖时，100ｍｇ／Ｌ壳寡糖根系处理株抗寒效果好，其单株鲜重与对照株相比增加了％，相对电导率降低了％；施用脱乙酰度为86％的壳寡糖时，150ｍｇ／Ｌ壳寡糖根系处理株抗寒效果好，其单株鲜重相较于对照株増加了％，相对电导率下降了38％。综合实验结果和经济效益表明，150ｍｇ／Ｌ脱乙酰度为86％的壳寡糖在根系处理时效果更好。其次，进一步深入探讨壳寡糖对水稻幼苗抗寒性的影响。比较了壳寡糖处理前后水稻渗透压调节物质、光合作用和根系活力的相关指标。 忌与碱性农药混配；避免航喷中与农药进行200倍以内混配使用。山东水杨酸氨基寡糖素实验

壳聚糖(CTS)能有效增强植物对盐胁迫的耐受性，但CTS在蛋白质组水平上对菜用大豆幼苗响应盐胁迫的影响尚不清楚。本研究用200mmol·L－1CTS和蒸馏水分别喷洒菜用大豆‘绿领特早’幼苗叶片，诱导5d后进行NaCl胁迫和无NaCl胁迫营养液处理，在NaCl处理第3天取样提取幼苗叶片叶绿体蛋白，进行同位素标记相对和定量(iTＲAQ)分析。结果表明:CTS显著提高了NaCl胁迫下菜用大豆幼苗的净光合速率(Pn)。试验总计鉴定到549个可靠定量信息叶绿体蛋白，其中有442个至少存在于两次生物学重复蛋白中，26个上调蛋白和4个下调蛋白与CTS影响菜用大豆响应NaCl胁迫有关。分子功能和代谢通路富集分析发现，上调叶绿体蛋白主要与电子转运、叶绿素结合、电子载流子活性等光合作用的分子功能相关，并富集在光反应、碳反应及乙醛酸和二元酸代谢等途径中;下调叶绿体蛋白主要与聚(U)ＲNA结合有关。上述结果显示，NaCl胁迫下CTS可以通过多种途径影响菜用大豆幼苗的光合作用。山东氨基寡糖素10%壳寡糖能诱导植物产生抵抗盐胁迫、低温胁迫及干旱胁迫等逆境胁迫的能力。

喷施50mg/L壳寡糖溶液有助于减轻干旱胁迫下油菜叶片中由于气孔限制引起的净光合速率的降低，同时气孔导度、胞间CO2浓度显著提高，气孔限制值明显降低;刘强等研究发现，叶面喷施50mg/L壳寡糖可改善盐碱胁迫下苍耳的生长状况，降低电解质外渗率，提高硝酸还原酶活性，从而缓解盐碱胁迫对苍耳的伤害作用。但目前关于壳寡糖对干旱胁迫下小麦幼苗生长、抗氧化酶活性和渗透调节物质含量的影响还不是十分清楚。因此，本研究采用水培试验，探讨了喷施不同浓度壳寡糖溶液对干旱胁迫下小麦幼苗生长、叶片活性氧累积特征、膜脂过氧化水平、抗氧化酶活性以及渗透调节物质含量的影响，旨在揭示壳寡糖对小麦干旱胁迫的缓解机制，为壳寡糖在农业生产方面的合理应用提供科学依据。

膜分离技术发明的目的在于提供一种水溶性壳寡糖提纯和浓缩的方法，过程无相变，能耗低，易于工业化生产，提高壳寡糖的得率，且得到的壳寡糖高纯度、分子量分布窄，适用于制备符合医药级的壳寡糖产品，提高壳寡糖产品附加值。为实现上述目的，本发明提供的一种水溶性壳寡糖提纯和浓缩的方法，具有以下步骤：(1)将壳寡糖降解液通过陶瓷膜进行预处理，去除降解液中的不溶杂质(包括壳寡糖和其它不溶杂质)，得到陶瓷膜透过液；(2)采用超滤膜将陶瓷膜透过液进一步提纯，去除大分子蛋白质和大分子多糖，得到超滤透过液；(3)采用纳滤膜对超滤透过液进行浓缩-加水的四级分离浓缩，去除无机盐和单糖，得到壳寡糖纳滤浓缩液；(4)对终浓缩的壳寡糖浓缩液进行喷雾干燥，得到高纯度的壳寡糖粉末；所述步骤(3)中，采用纳滤膜进行的四级分离和浓缩的每级的浓缩比例为2-5倍，每级的加水比例1-4倍。壳寡糖能够有效的改善动物肠道的内环境，抑制有害菌群的生成，对肠道内菌群的组成有一定的调节作用。

植物诱导抗病性是指植物受外界物理因素，化学因素或生物因素诱导后，产生的一种能抵抗病原微生物的抗病性，属获得性免疫的范畴。植物诱导抗病性分为两类，一类是系统诱导抗病性，指植物体在小范围内受到外界诱导后，启发植物体产生全方面的抗病性，在非诱导部位产生抗病性，激发机体系统的防御机能的现象。另一类是局部抗病性，指植物受外源因子作用后，在被诱导的地方产生快速局部反应产生抗病性的现象。植物遭受病原菌侵染后系统抗病性和局部抗病性经常同时出现。壳寡糖处理相枯果实可溶性蛋白含量维持在较高的水平，在胆藏后期壳寡糖处理果实可溶性蛋白含量才开始下降。山东氨基寡糖素10%

壳寡糖可有效的诱导植物产生防御反应，生成植物的系统性获得免疫抗性。山东水杨酸氨基寡糖素实验

    壳寡糖是壳聚糖降解后聚合度在2～20范围内的低聚糖。与壳聚糖相比，它具有良好的水溶性及强大的生物学活性，是一种新型植物生长调节剂。壳寡糖可作为免疫激H因子，诱导植物先天性免疫，合成抗病菌物质，激发植物基因防御，增强植物抗病能力。研究表明，在植物遭遇逆境时低分子量的壳聚糖能发挥积极作用，提高净光合作用速率，抵抗渗透物质的合成，提高植物体抗氧化酶活性，增强去除自由基的能力，保护膜系统，增强植物体的自身抗性，促进植物生长。受限于壳寡糖不易制备，壳寡糖对作物的影响研究较少。目前大多数研究工作都没有说明试验中所采用的壳聚糖或寡糖分子量。2007年，本课题组筛选出高产壳聚糖酶菌株，并随后对该菌株的壳聚糖酶基因通过定点突变进行改造，克隆至Pichiapastoris，筛选的重组子酶活力高达1480U/mL。近年来，围绕壳聚糖的酶解工艺做了大量研究工作，可以制备分子量2000～3000的壳寡糖。因此，本文以水稻幼苗为研究对象，通过喷施不同浓度的壳寡糖溶液，研究壳寡糖对水稻幼苗生长以及抗逆生理指标的影响，以期为研究壳寡糖的功能以及稳定水稻产量提供基础。 山东水杨酸氨基寡糖素实验

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