山东褐藻寡糖测定方法

褐藻胶为海洋褐藻细胞壁中的组成物质，约占 藻细胞干重的17%～45％。褐藻寡糖是由褐藻中的褐藻 胶通过氧化降解、酸水解或者裂合酶降解而得到的 小分子量片段。海洋寡糖可以参与植物的生长发育，通过促进种子的萌发和根系的发育，促进植物吸收和利用营养物质，提高多种酶的活性，促进植物的光合作用等，从而促进植物的生长发育，提高植物的产量及品质。Natsume等于1994年报道褐藻胶酶解之后获得的降解产物对于多种植物都可以起到延长其生命周期的作用；Quoc等进一步研究发现，褐藻胶的酶解产物中分离得到的三糖对大麦根 生长活性有明显的促进作用。刘瑞志用0.05％～ 0.30％的褐藻寡糖处理经过干旱处理的番茄，发现0.2％褐藻寡糖处理的试验组诱导抗旱效果比较好， 可以提高番茄体内 ＣＡＴ、ＳＯＤ、ＰＡＬ 和 ＰＯＤ 活力以及降低 ＭＤＡ 含量。这说明褐藻寡糖可以作为一种诱导因子提高番茄植株的抗旱能力，保护番茄植 株不受干旱伤害，是一种效果良好的抗旱诱抗剂。 Hu等用0.075％ 的褐藻寡糖溶液处理玉米种 子，结果发现在种子萌发的第７天，试验组的根长和 苗高分别比其对照组提高了18％和46％。褐藻寡糖可以通过SA信号途径促进NPR1和PR1蛋白基因的表达，使植株获得系统性抗性，增强对病毒的抵抗能力。山东褐藻寡糖测定方法

褐藻寡糖对POD及其同工酶的影响POD是植物体内重要抗逆酶类之一,能够催化乙烯生物合成,参与氧自由基消除反应,其活力高低通常是表征植物抗逆性能关键指标之一。喷施ADO后进行低温胁迫,浓度为0.05%,0.20%,0.30%ADO组能够显著提高POD活力,同工酶谱带宽度增加,颜色加深,表明POD含量受到ADO诱导而增加;并且0.20%和0.30%浓度组还能够诱导产生POD同工酶新谱带,以0.20%浓度ADO诱导效果好;0.10%浓度ADO组24h内POD变化幅度较小且处于较低水。48h后迅速升高,表明叶片内氧自由基含量升高,细胞开始受到损伤;高浓度1.00%ADO组随低温胁迫时间延长细胞损伤加剧,POD活力不断降低。上海褐藻寡糖m段褐藻寡糖是从植物和病菌中提取的低聚糖，对植物种子萌发、根系生长和枝条伸长有促进作用。

AOS促进植物体内胼胝质的沉积对喷施AOS和ddH2O的拟南芥叶片进行苯胺蓝染色,结果显示,AOS处理的叶片叶脉处有明显的荧光现象,说明AOS可以促进胼胝质的积累,抵抗病原菌的入侵。AOS激发SA信号通路对AOS和ddH2O处理后的本氏烟叶片进行液相色谱测定,结果显示,AOS处理的叶片中SA的含量相对较高;接种PVX后,叶片中的SA的合成进一步增加。同时,利用qRT-PCR检测了AOS处理后SA合成途径中的两个关键基因ICS和PAL的表达水平,结果表明ICS基因的表达水平明显高于对照,而PAL基因的表达水平与对照相比并无明显差别,说明AOS主要通过ICS途径诱导SA的合成。利用qRT-PCR技术检测SA信号通路中的标志基因的表达水平,发现NPR1、PR1a的表达水平明显提高。上述结果说明,AOS可以促进SA的积累,并激发SA信号通路。

寡糖可以作为诱导因子应用于植物抗病领域,能够促进植物产生抗病物质,提高其抗病性能。但将寡糖应用于植物抗低温领域研究报道较少,国内只有李琦、郝林华等报道了寡糖能够促进黄瓜抗低温能力,但没有进一步研究植物抗低温机理。本研究从ADO诱导烟C抗低温能力随时间变化方面入手,通过检测相关指标,进一步探讨不同浓度ADO与烟C抗低温能力的相互关系。研究结果表明:水处理组烟C植株在低温胁迫下,由于分解活性氧的酶系统首先受到低温损伤,叶片内CAT活力短时间内骤减,SOD和POD的含量也处在较低水平,随着低温胁迫时间延长,植物体内活性氧积累增加,烟C产生抗逆反应,3种酶活力又缓慢升高,用以去除积累的活性氧,这与已有研究报道结果相符。褐藻寡糖可以诱导植物气孔关闭，有效抑制病原菌侵染宿主。

发现的真正的寡糖类激发子是葡聚糖激发子，它是从大雄疫霉（Phytophthoramegaspermn）大豆专化型的培养物过滤液中被检测出来的。它能够诱导植保素的合成与积累(Sharpetal.,1984a)。近年来寡糖抗病性研究主要集25中在对壳寡糖的抗病研究。壳寡糖是一类氨基葡萄糖通过β-1，4糖苷键而形成的的低聚糖，它主要来源于许多病菌的细胞壁和昆虫和动物的甲壳，研究发现壳寡糖能够诱导植物产生系统获得性抗性和抗病性。郭成瑾(2006)发现聚合度为3-10的壳寡糖在10μg/ml-200μg/ml范围内处理植株均能够诱导植株抗花叶病毒能力的提高。周自云等(2004)从杨树溃疡病菌丝提取物和甲壳几丁质为原料获得的三种寡糖对植物的愈伤组织进行作用，研究发现三种寡糖均能诱导愈伤组织中的几丁质酶、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶、HRGP、PAL和绿原酸的含量。此外还有多种其它的活性寡糖片段如寡聚半乳糖醛酸(Philippeetal.,1995)等均具有植物诱抗剂的作用。 褐藻寡糖可以作为诱抗剂能够诱导植物产生抗逆性能，还能够调节植物的生长发育。湖北褐藻寡糖 4糖

褐藻寡糖用过的容器应妥善保管，不可做他用，也不可随意丢弃。山东褐藻寡糖测定方法

因此褐藻寡糖对植物的抗逆机制是通过诱导作用实现的。 诱导植物体内产生各种抗性物质来缓解逆境因素对植物造成的损伤，从而达到抗 逆的目的。为了研究褐藻寡糖与细胞的结合机制与作用规律，利用激光共聚焦技术对标 记的寡糖与细胞进行结合，观察其动态结合过程，研究发现，褐藻寡糖能够 与植物的细胞壁进行结合，又可以穿过细胞壁进入细胞内部与细胞膜进行结合。 通过将蛋白酶以及蛋白变性剂 SDS 对膜蛋白进行处理后研究发现能够对寡糖的 结合产生影响。表明褐藻寡糖的结合是与膜上的蛋白有关。通过封闭细胞膜上的 钙离子通道，对其进行阻断后结合寡糖，研究发现，褐藻寡糖与细胞膜的结合与 钙离子通道无关。山东褐藻寡糖测定方法

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