福建褐藻寡糖 标准

马尾藻是我国南海常见的大型经济褐藻,也是褐藻多糖的重要来源。褐藻多糖及其降解产物—褐藻寡糖,具有众多生物活性,在农业、医药、化妆品等领域具有广阔的应用前景。以采自海南琼海海域的孤囊马尾藻为研究对象,探究了一种有效提取褐藻多糖和酶解制备褐藻寡糖的方法,并对制备的褐藻多糖及寡糖进行纯化、结构分析和活性评价。研究结果如下:采用超声波辅助热碱法,通过响应面优化获得孤囊马尾藻多糖的比较好提取工艺,在超声功率500W、料液比1:25、提取时间5.95h、提取温度82.27℃、NaOH质量分数3.87%的条件下粗多糖得率为41.23%±0.98%。采用TCA沉淀法除蛋白,粗多糖的蛋白去除率达到81.93%,多糖保留率92.17%;优化了H2O2氧化法除色素工艺,在H2O2浓度1.5%、70℃条件下脱色6h时,脱色率达到91.23%,多糖保留率为85.32%。采用DEAE-52离子交换层析柱对初步纯化后的多糖进一步分离纯化,获得SOP1、SOP2和SOP3三个多糖组分,并明确了它们的分子量、纯度以及总糖、还原糖、蛋白、硫酸根和糖醛酸的含量。采用自主分离的产褐藻胶裂解酶类芽孢杆菌新种,发酵制备粗酶液,发酵液酶活为15.20U/ml。褐藻寡糖作为激发子与植物细胞结合后相互作用，引发植物的信号转导过程，植物细胞膜发生电位变化。福建褐藻寡糖 标准

选择三种来源（褐藻胶、果胶、壳聚糖）的不同分子量大小的九种寡糖片段进行研究。利用植物的促生长和抗逆指标进行筛选，获得了一种既具 有明显的促生长作用，又具有抗逆作用的寡糖片段，为褐藻寡糖 HZ3，经过质谱分析，其组分是以二、三糖为主的含有少量四糖和五糖的寡糖混合物。本研究第二部分是利用植物的植株、愈伤组织和悬浮细胞为材料，建立起寡糖促生长的综合性的验证方法。对植株分别选择了双子叶植物豌豆和单子叶植物玉米，利用寡糖浸种，分别考察在种子萌发与幼苗生长初期其体内蛋白酶、淀粉酶和激S含量的变化，结合种子与植株的生长指标，探讨寡糖的促生长作用机理。福建褐藻寡糖 标准褐藻胶寡糖对豌豆种子萌发和幼苗生长有促进作用，种子发芽率升高，幼苗高度、根长、生物均有增加。

褐藻胶为海洋褐藻细胞壁中的组成物质，约占 藻细胞干重的17%～45％。褐藻寡糖是由褐藻中的褐藻 胶通过氧化降解、酸水解或者裂合酶降解而得到的 小分子量片段。海洋寡糖可以参与植物的生长发育，通过促进种子的萌发和根系的发育，促进植物吸收和利用营养物质，提高多种酶的活性，促进植物的光合作用等，从而促进植物的生长发育，提高植物的产量及品质。Natsume等于1994年报道褐藻胶酶解之后获得的降解产物对于多种植物都可以起到延长其生命周期的作用；Quoc等进一步研究发现，褐藻胶的酶解产物中分离得到的三糖对大麦根 生长活性有明显的促进作用。刘瑞志用0.05％～ 0.30％的褐藻寡糖处理经过干旱处理的番茄，发现0.2％褐藻寡糖处理的试验组诱导抗旱效果比较好， 可以提高番茄体内 ＣＡＴ、ＳＯＤ、ＰＡＬ 和 ＰＯＤ 活力以及降低 ＭＤＡ 含量。这说明褐藻寡糖可以作为一种诱导因子提高番茄植株的抗旱能力，保护番茄植 株不受干旱伤害，是一种效果良好的抗旱诱抗剂。 Hu等用0.075％ 的褐藻寡糖溶液处理玉米种 子，结果发现在种子萌发的第７天，试验组的根长和 苗高分别比其对照组提高了18％和46％。

低温逆境时，寡糖处理能迅速增强其抗逆酶类，对引起细胞损伤的物质进行去除，提高植物的抗逆能力。干旱逆境，通过寡糖作用，能够使其体内的抗旱指标明显增强，如ABA的含量升高明显，对干旱下植株的生长状态进行调控，降低干旱胁迫对植株的损伤，达到诱导抗旱的目的。抗病性能的提高，通过检测烟C花叶病毒和病对植株的致病作用。对烟C花叶病毒，通过将寡糖作用于病毒与植株的侵染过程、体内复制阶段进行诱导抗病毒研究，发现褐藻寡糖可以明显提高植株的抗病毒能力，同时还能直接作用于病毒，在体外对其进行钝化，降低传染几率，达到抗病毒的效果。体外和体内两条途径对病菌进行抗病能力的检测，发现褐藻寡糖不能抑制病菌的生长，而是通过提高植株的体内抗逆酶类，达到抗病的效果，其对烟C病的比较好防效为4d，比三唑酮的比较好防效减少了2d，缩短了病的治好时间，降低了烟C的损伤。对植物果实的抗病保鲜的研究，发现褐藻寡糖能够改变草莓的呼吸过程，减少水分散失，降低外界对其造成的损伤。因此褐藻寡糖对植物的抗逆机制是通过诱导作用实现的。诱导植物体内产生各种抗性物质来缓解逆境因素对植物造成的损伤，从而达到抗逆的目的。褐藻寡糖可以通过促进植物内胼胝质的沉积，提高植物抵抗病原菌侵染的能力。

    褐藻寡糖是由褐藻多糖（褐藻胶）经过酸、氧化剂或者裂合酶降解而获得的小分子量的片段。褐藻胶是褐藻细胞壁的填充物质，是由甘露糖醛酸和古罗糖醛酸结合而成的直链线性嵌段型高分子聚合物。其分子量比较大，在104-106u之间。组成褐藻胶的结构单元是β-(1,4)连接的D-甘露糖醛酸(M)和α-(1,4)连接的L-古罗糖醛酸(G)。在生物合成过程中甘露糖醛酸残基形成聚合物后，部分在酶的作用下转变成了古罗糖醛酸。但是由于其分子量较大，不容易被吸收，常常是被作为膳食纤维应用于食品中，因此极大限制了褐藻胶的应用。经过降解获得的小分子量的寡糖片段，水溶性好，易于被吸收利用，因此应用也越来越普遍。近年来，许多研究已经证实褐藻寡糖能够在植物调节生长和诱导抗病领域发挥作用。 褐藻寡糖诱导植物体内产生各种抗性物质来缓解逆境因素对植物造成的损伤，从而达到抗逆的目的。福建褐藻寡糖 标准

较低浓度的褐藻寡糖能促进高粱种子萌发及幼苗生长，提高高粱叶片叶绿素的合成速率。福建褐藻寡糖 标准

褐藻寡糖对SOD活性的影响SOD是植物体内重要抗逆酶类之一,能够催化O-2·歧化反应,生成H2O2和O2,H2O2在POD、CAT和谷胱甘肽过氧化物酶催化下转化为水而去除,各种环境胁迫均能不同程度提高其活力,以增强植物去除O-2·能力。随着低温胁迫时间延长,水处理组细胞损伤加剧,SOD活力不断上升,去除O-2·能力逐渐增强。喷施ADO后进行低温胁迫,0.05%,0.20%,0.30%ADO组SOD活力短时间内迅速上升,说明ADO对烟C的SOD活力产生了诱导作用,随着时间变化O-2·产生和去除达到动态平衡,其SOD活力缓慢回落,以0.20%浓度ADO诱导效果比较好,SOD活力6h后诱导增强至空白对照的6倍,这对于提高烟C去除O-2·能力具有重要作用。0.10%浓度ADO在6～24h之内没有明显改变SOD活力大小,维持在比较恒定水平,但48hSOD活力迅速上升,表明细胞内O-2·含量增加,细胞受到了损伤破坏。高浓度1.00%ADO会破坏烟C叶片细胞结构,造成保内物质渗漏,加剧低温下叶片损伤,超出了植株自身修复能力,产生了毒副作用,SOD活力逐渐降低。福建褐藻寡糖 标准

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