基于细胞培养法的rcAAV复制型腺相关病毒检测方法，该方法的原理是通过不断的细胞传代使得rcAAV实现扩增，之后再利用qPCR或Southern-blot的方法对rcAAV进行检测，能保证检测到的rcAAV都具有复制能力，是目前常用的检测方法。然而，其检测敏感性依赖于rcAAV对靶细胞的感 染效...

常用的支原体检测方法有传统的分离培养法、指示细胞培养法（DNA染色法）、ELISA法、PCR法等。指示细胞培养法（DNA染色法）则灵敏度比较低，因背景荧光的存在，细胞轻度支原体污染不易检出；细胞裂解死亡产生碎片也会被荧光染料染色被误认为是支原体染色所致造成假阳性；另外，荧光染色法一般要求培养无污染的...

磁珠法核酸提取常见问题之核酸得率低：核酸得率低的可能原因：①磁珠吸附能力较弱，只能结合溶液中少量的核酸；②磁珠洗脱方法不正确导致核酸洗脱效率较弱；③所使用的提取试剂（pH、盐、醇）与该磁珠不匹配；④样品对所用提取试剂有抑制；核酸得率低的解决办法：①改变表面基团种类及密度；②减少洗脱前的干燥时间；③洗...

南京正扬生物科技有限公司自主研发生产的支原体检测试剂盒在PCR试剂配制及加样上机环节有哪些注意事项？①实验时应注意防止外源DNA对试剂的污染，先加样品DNA，然后进行阳性质控品的操作。在制备反应试剂和添加DNA模板时，使用带滤芯的抢头，添加不同的试剂和不同的样本时需更换抢头，并经常更换手套；②PCR...

RCL复制型慢病毒检测方法包括以下3种：①ELISA法(p24蛋白测定)：适用于由载体生产过程中病毒基因组之间的重组形成RCL的检测。但，对于VSV-G包膜质粒和来源于其他病毒的gal-pol基因功能组件之间发生重组不表达p24蛋白的假型病毒不适用。其优点为适用性广（浓缩载体、终末细胞、血清血浆等多...

南京正扬生物科技有限公司 自主研发生产 的全自动核酸提取仪是针对生物制品核酸提取的技术平台，内置专业优化的前处理程序，配套本公司的自动化前处理试剂盒和配套耗材，只需一键操作即可完成各类生物材料和制品中的宿主细胞、微生物、病毒因子等各类微量DNA/RNA的提取纯化。只需26min即可完成样品微量核酸...

核酸提取时，加标回收率的定义及注意事项：加标回收率是指在测定样品的同时,于同一样品的子样中加入一定量的标准物质进行测定,将其测定结果扣除样品的测定值,以计算回收率。加标回收设置的注意事项：①同一样品的子样取样体积必须相等;②各类子样的测定过程必须按相同的操作步骤进行。③加标量不能过大,一般为待测物含...

采用何种方法进行RCR/RCL病毒检测？复制型病毒（RCR/RCL）是γ-逆转录病毒载体与慢病毒载体的一个安全性质量控制项目，因病毒载体设计的不同，产生复制型病毒的风险也会有不同，如采用四质粒共转体系以及含有末端自我失活（SelfInactivating，SIN）结构的病毒载体，其病毒载体生产过程中...

日本药典JPXVⅢ〈G3-14-170〉对NAT法支原体检测产品有关性能验证的要求，包括检测限（LOD）、专属性、耐用性、可比性。其中对于可比性的描述及要求如下：可比性研究主要包括核酸扩增法与方法A和/或方法B的检测限的对比。此外，专属性(多种的支原体检测，假定的假阳性结果)也应该在对比中。检测限的...

磁珠法核酸提取产品，磁珠如何与核酸结合实现提取功能？在磁珠法的反应体系中，核酸分子（DNA&RNA）会由线性压缩成球状，暴露出核酸骨架上大量的负电基团与反应体系中的阳离子连接，在磁珠蕞外层负电基团的作用下，形成“阴离子-阳离子-阴离子”的盐桥结构，使核酸分子被特异性地吸附到磁珠表面。而当反应缓冲液被...

磁珠是利用一定的组织包被中心四氧化三铁而形成的可以被磁铁吸附，同时有能通过表面包被物吸附（结合）核酸的小珠子。小珠子的用途很大！它可以实现核酸提取的自动化和高通量化，避免人工操作引起的差异及错误，结果稳定，重复性好。磁珠一般分为三层结构：蕞内层：为支持结构，如聚苯乙烯做的内核；中间层：磁层，作用是与...

用qPCR进行宿主细胞残留DNA检测时，哪些因素会对检测结果准确性和方法灵敏度存在较大影响？参考品DNA量值溯源及质量保证：参考品DNA的量值准确与否，直接关系到样品检测结果的准确性，因此需制定完善的参考品量值溯源程序，确保结果准确可靠。参考品DNA的质量要求可从条带大小、完整性、纯度、浓度等方面做...