种子培养基种子培养基是供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体，并使菌体长得粗壮，成为活力强的“种子”。所以种子琼脂培养基</a>的营养成分要求比较丰富和完全，氮源和维生素的含量也要高些，但总浓度以略稀薄为好，这样可达到较高的溶解氧，供大量菌体生长繁殖。种子培养基的成分要考虑在微生物代谢过程中能维持稳定的pH，其组成还要根据不同菌种的生理特征而定。一般种子培养基都用营养丰富而完全的天然有机氮源，因为有些氨基酸能刺激孢子发芽。但无机氮源容易利用，有利于菌体迅速生长，所以在种子培养基中常包括有机及无机氮源。一级的种子培养基的成分比较好能较接近发酵培养基，这样可使种子进入发酵培养基后能迅速适应，...

孢子培养基孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基，对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长，产生较多质量的孢子，并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是：，营养不要太丰富(特别是有机氮源)，否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖-硝酸盐-其它盐类的培养基上都能很好地生长和产孢子，但若加入，就只长菌丝而不长孢子。第二，所用无机盐的浓度要适量，不然也会影响孢子量和孢子颜色。第三，要注意孢子培养基的pH和湿度。生产上常用的孢子培养基有：麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作...

培养基中是否须添加？除了特殊筛选系统外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何。为防止细菌、污染，可以加入青霉素-链霉素双抗溶液，其培养基中的终浓度为青霉素100U/ml，链霉素为100ug/ml，但是不建议长期使用。液体培养基可以放-20℃保存吗？不可以！因为在-20℃下，培养基中的盐容易析出，培养基融化后，有的盐可能无法重新溶解，从而导致培养基渗透压降低，培养细胞时，细胞容易破裂而死亡。为何培养基保存于4℃冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值越来越偏碱性？培养基保存于4℃冰箱中，培养基内之CO2会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中的酸碱指示剂(通常为phenolred)...

pH调整液常用的有HEPES液和NaHC03溶液，一般情况下是按照说明书的要求准确添加，以保证培养基在5%CO2的环境下pH达到设计标准。2．HEPES液：HEPES是一种弱酸，中文名称是羟乙基哌嗪乙硫磺酸。HEPES对细胞无毒性，主要作用是防止培养基pH迅速变动100X的Hepes配制：取，用1N的NAHCO3调PH至，过滤除菌，定容至100ml.谷氨酰胺补充液:谷氨酰胺在细胞代谢过程中起重要作用，合成培养基中都要添加，由于谷氨酰胺容易降解，所以都是在使用前添加。谷氨酰胺使用终浓度为。一般配制为100倍浓缩液，配制时应加温至30℃，完全溶解后过滤除菌，分装至小瓶，储存于-20℃。...

培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。培养基有好几种分类方法，按状态分可以分为固体培养基，液体培养基和半固体培养基，还可以按原料来源（自然/合成），功能（选择/鉴别）或者使用范围（细菌/）等来分类。培养皿。。。是放培养基的容器，一般用于盛放固体琼脂培养基，说白了就是塑料或者玻璃制成的圆形浅碟。。。培养皿和培养基的区别大概就相当于水杯和水的区别吧，一个是容器一个是内容物。。。至于灭菌法嘛，培养基不用干热灭菌的原因有不少，热传导效率啊，灭菌釜的能力啊等等，不过主要的是，培养基如果用干热灭菌的话，失水太厉害。。。会干。。。毕竟嘛，固...

之所以分装之前灭菌。是为了方便，培养基倒到培养皿里还是液体（热的），把盛着液体的浅浅的热培养皿一个个整齐的码放进灭菌釜，还是挺麻烦的。。。第二，有的选择/鉴别培养基是需要在灭菌之后添加其他不耐热的无菌溶剂的（比如MYP要添加蛋黄），需要根据培养基的量来添加适量溶剂，在培养皿里就不好加了。。。第三嘛，需要大量使用培养基的实验室一般会配置很多瓶培养基（几十个上百个500mL或者一升的瓶子）一起灭菌之后存在冰箱里，需要用的时候再拿出来用微波炉或者灭菌釜融化了用。第四是跟第三有关系的，有一种微生物计数技术叫PourPlatingTechnique（我真不知道中文怎么说），基本上就是先把样品...

细胞生长的空间密度是细胞培养的关键。具体养细胞时应该摸索细胞喜欢的生长空间密度，即不能让细胞瓶里的细胞因拥挤不堪而萎靡不振；也不能让细胞浓度低于1~5×105个/mL而导致“孤独死”（因为细胞的健康生长需要细胞间的连接）。因而细胞接种前，要先通过细胞计数来调整细胞浓度。当培养的贴壁细胞形态不好时，可在传代时，先倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清都可以）洗涤一次，用滴管吸走，再加入3ml培养基，沿着瓶底轻轻吹打一遍，然后吸走。这时在正式进行消化、吹打。其次，把吹打下的细胞悬液加入到含有新培养基的培养瓶内，置于培养箱里培养，按时间点观察细胞贴壁情况（10min,20min,...

细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境，是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。培养液或培养基的含义几乎相同，英文都是medium。当它是粉剂时，倾向性地称为培养基，而将粉剂配成液体后，多称为培养液。培养液中常常补加血清、等成分。培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和无血清细胞培养基等。天然细胞培养基是人们早期采用的细胞培养基，直接取自于动物组织提取液或体液，如血浆凝块、血清、、胚胎浸出液等。营养价值高，但成分复杂，差异大、不稳定，来源也受到限制。水解乳蛋白和胶原是两种较好的天然培养基，富含氨基酸。血清是天然培养基中和常用的培养基，但其组成成分复杂，其中一些成分与...

首先消毒双手和超净台。取约10ml细胞完全培养基放于15毫升离心管中。配置细胞冻存液：冻存液应该提前配制，置于室温备用，防止临时配制产生的热量损伤细胞，按无血清培养基比血清比DMSO=7:2:1的比例配置细胞冻存液，其中加大冻存液中血清的比例对于保存某些脆弱的干细胞以及一些比较珍贵的细胞很有好处的。按比例加好冻存液组分后，轻轻吸打混匀，置于室温下待用。从细胞培养箱中取出细胞，进行瓶口消毒，弃去细胞原来的培养基。按每25cm²/ml胰酶/EDTA消化液比例加入消化液，放入显微镜下观察，待所有细胞变圆后立即拿入超净台内，加入2ml细胞完全培养基以立即终止消化。采用无菌头轻轻吹打细胞表面...

培养用液是维护组织细胞生存、生长及进行细胞培养各项操作过程中所需的基本溶液。常用的细胞培养试剂包括：超纯水，平衡盐溶液，消化液，PH调整液，谷氨酰胺溶液，溶液。常见的超纯水1.使用纯水机纯化而来；2.蒸馏水和离子交换水3.三蒸水平衡盐溶液1、平衡盐溶液主要由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。2、D-Hank’s与Hank’s的一个主要区别在于前者不含有Ca2+、Mg2+，因此D-Hank’s常用于配制胰酶溶液。3、配制平衡盐溶液也应当用三蒸水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+，应当...

LB培养基是一种应用普遍和普通的细菌基础培养基，有时又称普通培养基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。酵母提取物：酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末，其中氨基酸含量30%以上，总蛋白50%以上，核苷酸10%以上，普遍用作生物培养基和食品调味品制造原料。胰化蛋白胨：一种质量蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥而成的白色粉末，含有丰富的氮源、氨基酸等。酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压)，其次是提...

哺乳动物细胞瞬时转染能在短期内快速表达高活性蛋白而被广泛应用。本文主要介绍了细胞瞬时转染的步骤、原理，及血球计数板对细胞计数的原理和方法。哺乳动物细胞自身具有蛋白折叠和翻译后修饰的功能，获得的蛋白更具有天然活性。哺乳动物细胞生产蛋白的方式有两种：瞬时转染和稳定转染。瞬时转染的特点是短期快速表达，满足蛋白的小量制备。而稳定转染通过构建稳定细胞系能够满足蛋白的大量、长期生产。瞬时转染是指将构建好的质粒通过某种方式导入到哺乳动物细胞内（主要指HEK293细胞），该质粒上的外源基因不整合到细胞自身的基因组上。随着细胞的生长分裂，外源基因会逐渐丢失。质粒在细胞内能够存在3-4天，此时间内，质...

瞬转步骤，1.将复苏后常规培养的细胞按照1-3x105接种到6孔板中，加入2-4mL的完全培养基，混匀放置在二氧化碳培养箱中37℃过夜2.无菌状态下配置如下溶液：a用100ul的无血清培养基稀释2ug的待转染的质粒b用100ul的无血清培养基稀释25ul的Lipofectamine转染试剂（血清的存在会影响细胞转染效率，因此要使用无血清培养基转染）3.将ab溶液混合并摇匀，室温下放置30min左右4.细胞培养至80%单层左右，用无血清培养基洗涤细胞2次，每孔加入1mL的无血清培养基，并将混合后的ab溶液逐滴加入到每孔，按十字方向轻摇混匀，二氧化碳培养箱中37℃培养24小时5.将转染...

细胞计数细胞计数的原理就是测定单位体积内细胞的数量从而得到细胞总浓度，在细胞培养和测定细胞生长曲线的过程中广泛应用。本实验是采用血球计数板对细胞计数，步骤如下：1.将计数板的盖玻片洗净晾干，并消化细胞离心加入培养基悬浮细胞，制得细胞悬液2.稀释细胞悬液，按照一定的倍数3.盖玻片盖上计数板表面，移液器吸取10ul左右的细胞悬液从血球计数板的一方慢慢注入到计数板上4.盖玻片具有引流的功能，因此只需轻轻打入到板上孔中即可5.显微镜下观察细胞，按照要求计数该血球计数板上的细胞个数。完全培养基的选材要求是什么？上海中乔新舟告诉您。西藏RPMI1640完全培养基是什么 首先消毒双手和超净台。取约...

之所以分装之前灭菌。是为了方便，培养基倒到培养皿里还是液体（热的），把盛着液体的浅浅的热培养皿一个个整齐的码放进灭菌釜，还是挺麻烦的。。。第二，有的选择/鉴别培养基是需要在灭菌之后添加其他不耐热的无菌溶剂的（比如MYP要添加蛋黄），需要根据培养基的量来添加适量溶剂，在培养皿里就不好加了。。。第三嘛，需要大量使用培养基的实验室一般会配置很多瓶培养基（几十个上百个500mL或者一升的瓶子）一起灭菌之后存在冰箱里，需要用的时候再拿出来用微波炉或者灭菌釜融化了用。第四是跟第三有关系的，有一种微生物计数技术叫PourPlatingTechnique（我真不知道中文怎么说），基本上就是先把样品...

什么是基本培养基和完全培养基？什么是野生型菌株和缺陷型菌株？经常会有细菌突变体的试题，许多学生觉得有点难度，主要原因是试题有综合性，包含酶、代谢、遗传和细菌的培养等知识，需要综合知识解决问题。细菌的培养需要培养基，平时比较常见的是选择培养基和鉴别培养基，模拟考试中出现了多种不熟悉的培养基名称，特别是基本培养基和完全培养基。野生型大肠杆菌通过一系列的生化反应合成生长所必需的各种物质，从而能在基本培养基上生长。但如果发生基因突变，导致生化反应的某一步骤不能进行，而致使某些必需物质不能合成，它就无法在基本培养基上生长。 完全培养基的详细介绍。欢迎来电咨询上海中乔新舟！海南MEM 完全培养基种类 ...

正如花草树木需要土壤，细胞没有培养基提供营养和环境就不能生长。虽然动物细胞体外维持培养的研究可以追溯到20世纪初甚至更早，但培养基配方开发划时代的里程碑当属HarryEagle博士分别于1955年和1959年在《科学》杂志上发表的两篇研究文章：1955年Eagle博士发布细胞基础培养基配方，并指出培养基是“一个包含无机盐、氨基酸、糖、维生素及其它必须营养物的等渗透压且具有pH缓冲能力的混合物”。Eagle在1959年的文章中提出了进一步改进的配方，并将该配方命名为“MinimalEssentialMedium(MEM)”。MEM配方需要在10%以上的牛血清浓度下才能支持细胞生长，但...

pH调整液常用的有HEPES液和NaHC03溶液，一般情况下是按照说明书的要求准确添加，以保证培养基在5%CO2的环境下pH达到设计标准。2．HEPES液：HEPES是一种弱酸，中文名称是羟乙基哌嗪乙硫磺酸。HEPES对细胞无毒性，主要作用是防止培养基pH迅速变动100X的Hepes配制：取，用1N的NAHCO3调PH至，过滤除菌，定容至100ml.谷氨酰胺补充液:谷氨酰胺在细胞代谢过程中起重要作用，合成培养基中都要添加，由于谷氨酰胺容易降解，所以都是在使用前添加。谷氨酰胺使用终浓度为。一般配制为100倍浓缩液，配制时应加温至30℃，完全溶解后过滤除菌，分装至小瓶，储存于-20℃。...

确定细胞选啥首先，根据文献，或者细胞介绍明确细胞类型，挑选合适的细胞。其次，怎么判断自己收到的细胞是不是假货，细胞鉴定书就是你所购买细胞的身份证！，买细胞的渠道要正确!否则买到、假货，肠子都悔青了。。。。。准备培养试剂备啥俗话说：巧妇难为无米之炊。养好细胞的首要前提准备好它喜欢吃的食物——完全培养基。完全培养基是由基础培养基、血清以及其它添加物配置而成的。基础培养基的家族有EMEM、DMEM、RPMI-1640等等；血清也分为胎牛血清，马血清等等；添加物包括胰岛素，EGF等等~上海中乔新舟 完全培养基值得信赖。欢迎来电咨询上海中乔新舟！广西中乔新舟完全培养基中乔新舟 细胞生长的空间密...

靠内心"感动"细胞1）自己的细胞自己养，血的教训。2）在生物安全柜(或者超净台)，头，血清管，血清，培养基，瓶子都足够好，并且细胞房有良好的卫生措施(比如隔离服，手套，口罩，清洁，HEPA等等)且不违反操作原则的情况下，你其实很难污染。3）上述条件不完备的情况下，就要多注意无菌操作了：比如要用的东西提前拿到台子里照啊(不过这个其实也不大好，因为会挡住紫外线)，使用前SDS+酒精擦台子，进出超净台一定要酒精擦手。4）少对细胞说话，多靠内心来感动它们(是的!心不诚是不可以的!)养细胞就像打仗，知彼知己，百战不殆！只有了解你养的对象，才能把它养好！完全培养基托运有哪些步骤？欢迎来电咨询上海中乔新舟！...

营养丰富的培养基是维持细胞活性及高密度生长的基础，营养缺乏容易引起细胞凋亡，新生牛血清中所含大部分营养成分可以通过化学成分明确的营养物质如氨基酸维生素等成分组合取代。低血清培养基营养成分大优于基础培养基，只需添加1％～5％新生牛血清，而对细胞生长、增殖、形态、活性和功能没有影响甚至有所改善。在国外低血清培养基早已有之，如Gibco等。但是他们的低血清培养基是在基础培养基中选择性的加入重组胰岛素（recombinantinsulin）、人源转铁蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些还包含一些生长因子，这些重组蛋白和动物来源成分对生物制品的安全性...

LB培养基是一种应用普遍和普通的细菌基础培养基，有时又称普通培养基，含有酵母提取物、胰化蛋白胨和NaCl。酵母提取物：酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提，再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末，其中氨基酸含量30%以上，总蛋白50%以上，核苷酸10%以上，普遍用作生物培养基和食品调味品制造原料。胰化蛋白胨：一种质量蛋白胨，是以新鲜牛肉和牛骨经胰酶消化，浓缩干燥而成的白色粉末，含有丰富的氮源、氨基酸等。酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl主要提供微生物生长环境(如渗透压)，其次是提...

无血清细胞培养基（serumfreemedium，SFM）是指在使用中无需添加血清的细胞培养基，且其组成成分不含有任何动物组分。按照其组分分类，还可以分为无动物组分无血清细胞培养基和化学限定无血清细胞培养基，前者组分中可能含有某些植物来源成分，而后者完全由化学成分明确的组分组成。其中，无动物组分无血清细胞培养基是目前在生物制药行业中应用普遍的，它提高了细胞培养的质量，避免了使用血清带来的麻烦。目前，已有多种无血清培养基上市，如杂交瘤细胞无血清培养基、CHO细胞无血清培养基、Vero细胞无血清培养基和NS0细胞无血清培养基等。无血清培养基通常添加生长附加成分，如与生长因子、低分子营养...

瞬转步骤，1.将复苏后常规培养的细胞按照1-3x105接种到6孔板中，加入2-4mL的完全培养基，混匀放置在二氧化碳培养箱中37℃过夜2.无菌状态下配置如下溶液：a用100ul的无血清培养基稀释2ug的待转染的质粒b用100ul的无血清培养基稀释25ul的Lipofectamine转染试剂（血清的存在会影响细胞转染效率，因此要使用无血清培养基转染）3.将ab溶液混合并摇匀，室温下放置30min左右4.细胞培养至80%单层左右，用无血清培养基洗涤细胞2次，每孔加入1mL的无血清培养基，并将混合后的ab溶液逐滴加入到每孔，按十字方向轻摇混匀，二氧化碳培养箱中37℃培养24小时5.将转染...

细胞培养基开发半个多世纪，一代代科学家努力实现了一个个看似不可能的技术突破，期间江湖上也有许多轶事。时间轴上看培养基开发可以分三个阶段：（从血清到无血清）；（从无血清到化学成分确定）；（国内生物医药崛起）。缘起小小细胞蕴藏着无限能量，1957年科罗拉多大学医学系教授（ChineseHamsterOvary，CHO），并成功进行体外连续传代培养。60多年后，超过80%的上市及临床阶段重组蛋白和抗体药物通过CHO细胞表达，这些药物年销售超过千亿美金，Puck博士当时或不曾料到CHO细胞会有如此广阔的应用和深远的贡献。 完全培养基托运有哪些步骤？欢迎来电咨询上海中乔新舟！黑龙江两种基础完...

体外培养动物细胞已有近百年的历史，人工合成培养基的问世促进了细胞培养工作的发展。当粉剂合成培养基配置成液体后称为培养液，其主要成分是氨基酸、维生素、糖类、无机离子以及其他成分。合成培养基种类很多，常用的有十多种，目前使用普遍的是RPMI1640，MEM，DMEM和DMEM/F12。RPMI1640培养基：初为培养小鼠白血病细胞的需要而制备。开始的配方适合悬浮细胞的生长，主要针对淋巴细胞，后经几次改良从RPMI1630,1634而至1640，其成分较为简单。现发现它适应于多种类型细胞的生长，包括肿瘤细胞以及很多正常组织细胞体外培养。完全培养基怎么选？上海中乔新舟告诉您。天津小鼠神经干细胞完全培养...

用于一般细菌培养，特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养。LB培养基使用原理：蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培养基的凝固剂。LB培养基配制方法配制每升培养基，应该在950ml去液态lb培养基离子水中加入：胰化蛋白胨10g酵母提取物5gNaCl10g摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至7.0。用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌20min。LB固体培养基1L和液体一样，加15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗固态LB培养基生素，并且倒好板。 完全培养基的市场应用分析。欢迎来电咨询上海中乔新舟！湖南...

发酵培养基发酵培养基是供菌种生长、繁殖和合成产物之用。它既要使种子接种后能迅速生长，达到一定的菌丝浓度，又要使长好的菌体能迅速合成需产物。因此，发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外，还要有产物所需的特定元素、前体和促进剂等。但若因生长和生物合成产物需要的总的碳源、氮源、磷源等的浓度太高，或生长和合成两阶段各需的比较好条件要求不同时，则可考虑培养基用分批补料来加以满足。关于完全培养基，欢迎咨询~完全培养基托运有哪些步骤？欢迎来电咨询上海中乔新舟！江西RPMI-1640完全培养基购买如何选择培养瓶：一般，生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，那么采用塑料瓶会比玻璃瓶的效果好；生长...

营养丰富的培养基是维持细胞活性及高密度生长的基础，营养缺乏容易引起细胞凋亡，新生牛血清中所含大部分营养成分可以通过化学成分明确的营养物质如氨基酸维生素等成分组合取代。低血清培养基营养成分大优于基础培养基，只需添加1％～5％新生牛血清，而对细胞生长、增殖、形态、活性和功能没有影响甚至有所改善。在国外低血清培养基早已有之，如Gibco等。但是他们的低血清培养基是在基础培养基中选择性的加入重组胰岛素（recombinantinsulin）、人源转铁蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些还包含一些生长因子，这些重组蛋白和动物来源成分对生物制品的安全性...

培养液的配置方法大致相同，如下：1.取一袋干粉培养基，将干粉培养基溶于欲配制液体总量2/3的三蒸水，冲洗包装袋2次倒入培养液中，加入磁性搅拌棒并置于磁力搅拌器上充分搅拌，确保培养基干粉充分溶解。2.按照产品说明的要求和实验需要补加NaHCO3。3.调整培养液pH值，用pH计或pH精密试纸观察调整结果达到pH7.2-7.4。4.将上述溶液用0.22um微孔滤膜过滤除菌。5.将过滤除菌的培养液分装于贴有标签的无菌贮液瓶中，加盖瓶塞，密封4℃冰箱存放。注意：1.培养液配制后应进行无菌实验，以检测培养液是否有污染。2.每批次配制液体数量以使用2周左右为宜，以免时间过长造成营养成分损失。 完全培养基...