方便快捷的LSMTM淋巴细胞分离液:早期分离白细胞的方法,会用一种化合物混合血液。此化合物能够聚集红细胞,只轻微影响白细胞。通过离心,红细胞由于密度增加而聚集沉淀,同时从离心管内上层收集白细胞。后来,Böyum提出的以Ficoll®-甲泛影钠溶液为介质进行离心。稀释的血液在Ficoll®-甲泛影钠溶液中分层,之后低速短时离心。红细胞和多形核粒细胞沉降到管底,单个淋巴细胞、单核细胞和血小板可以从两个分层间的分界面处收集。而MP Biomedicals出品的淋巴细胞分离液,不同于Böyum的配方,由于LSM中含有聚蔗糖和泛影酸盐,能够形成特定的密度梯度1.077 g/mL(20℃)。只需要将血液样品轻置于淋巴细胞分离液上层,经过简单的一步离心(400 xg,30分钟),就能够分离获得淋巴细胞。科研实验中试剂取用应注意事项:取用少量的液体—使用胶头滴管。ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
测定血清中的某些酶,如CK,离体(采集血液)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巯基(一SH)被氧化造成的。只有通过适当的还原作用才能重新开始。如CK—NAC检测试剂盒即含有CK活化剂,名为N一乙酰半胱氨酸。实验研究证明,NAC对血清中已失活的CK活化过程约需180 S。这就是CK测定为什么要延迟时间较长的理论依据。在AST,ALT采用IFCC推荐方法测定时需要磷酸吡哆醛预活化。需要强调:含有活化剂的生化试剂,其测定酶活性的结果要高些。EB溶液(1mg/ml)浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
用pH计测定配制好的盐溶液的pH值,使其在6.4~7.0之间。一般盐雾标准中要求试验过程中的盐雾收集液pH值在6.5~7.2之间。当pH值不在上述范围时,应用氢氧化钠(NaOH)或者冰乙酸(CH3COOH)进行调节。氢氧化钠可以使pH值升高,冰乙酸使pH值降低。通常只需要加入少量的即可调节pH值。在氯化钠溶液中加入少量冰乙酸,搅拌均匀,并用pH计测量溶液的pH值,直至其为3.0-3.1之间,试验过程中收集液的PH值应在3.1-3.3之间。配制好乙酸盐雾溶液后,加入氯化铜,其浓度为0.26g/L±0.02g/L(即0.205g/L±0.015g/L无水氯化铜)。调节溶液的pH值,直至其为3.0-3.1之间,试验过程中收集液的PH值应在3.0-3.1之间。
盐酸强力霉素溶液科研实验中试剂取用应注意事项:1. 固体试剂的取用:取用固体药品时药匙必须是干净的.一支药匙不能同时取用两种或两种以上的试剂.药匙每取完一种试剂后都必须用干净的纸擦拭干净,以备下次使用.药匙的两端为大小两匙,取固体量较多时用大匙,较少时用小匙。2. 取用不定量(较多)液体——直接倾倒a. 瓶塞必须倒放在桌面上【防止药品腐蚀实验台或污染药品】;b. 直接倾倒时瓶口必须紧挨试管口,试管45度,并且缓缓地倒【防止药液损失】;c. 贴标签的一面必须朝向手心处【防止药液洒出腐蚀标签】;d. 倒完液体后,要立即盖紧瓶塞,并把瓶子放回原处,标签朝向外面【防止药品潮解、变质】。杀灭曲线的建立:按照20-25%的细胞密度将未转化的细胞铺在合适的培养板上。
潮霉素 B(Hygromycin B) 是一种由吸水链霉菌产生的,能够克制细菌、菌类和 一些高等真核生物细胞内的蛋白质生物合成来。潮霉素 B 属于是氨基糖苷类,通过 克制蛋白质的合成来阻止微生物生长,对原核细胞与真核细胞都是克制作用。 Leagene Hygromycin B solution 常用于转基因实验的抗性筛选,筛选具有潮霉素 B 的抗性基因。 产品组成: 编号 名称 CA0012 CA0012 Storage Hygromycin B solution (50mg/ml) 使用说明书 10ml 20ml 1份 4℃ 避光 操作步骤(光供参考): 1、 根据实验具体要求操作。 2、 一般植物细胞筛选浓度在 20~200μ g/ml,动物细胞筛选浓度 50~1000μ g/ml,应根 据具体实验选择较佳筛选浓度。注意ELISA检测试剂盒保存期,过保存期的试剂不能使用。牛血清白蛋白溶液(3% BSA)
检测试剂盒吸附性能好。ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)
检测方法的三大特点:稳定性好:包被的抗原的稳定性可使试剂盒的效期得到确保,早期以合成肽为包被抗原的试剂盒效期只有3-4个月,选用基因工程抗原后效期很大程度延长了。基因工程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达,表达产物包含更多的抗原决定簇,可提高试剂盒的灵敏度,提高检出率。分子量大:合成肽选用化学办法制备,因为工艺的限制,合成数量有限,只能达到数百个氨基酸。而使用基因工程制备的抗原,分子量更大。用EDTA2K离心搜集在真空血液搜集管中的血液,5,000×g,15分钟,4℃,分离血浆样品,然后储存在零下80℃直到使用。ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)