细胞计数和活力评估在评估样本质量时,需要在细胞清洗和过滤之后测定细胞活力,这一点至关重要。测定细胞活力有许多种方法,烈冰多年单细胞测序经验发现台盼蓝法在鉴定活细胞与死细胞的比例时效果很好。细胞计数的准确性以及目标回收量和实际回收量之间的一致性,取决于我们了解样本中有多少个细胞。一旦过滤和清洗完成,可采用细胞计数设备(如血球计数器或自动细胞计数仪)进行定量。这些设备不但能提供准确的细胞计数,还能计算出向微流体芯片上样适量细胞所需的细胞悬液体积。基因测序相关产品和技术已由实验室研究逐渐演变到临床应用,是下一个改变世界的技术。陕西10X单细胞测序数据分析可视化
基因和基因产物并不是单独运作的,而是参与了相互关联的复杂通路、网络和分子系统,这些合在一起实现了细胞、组织和生物体的运作。定义这些系统并确定它们的特征和相互作用,对于了解生物系统如何运作至关重要。”为了推动科学发现,科学家们需要各种能够帮助多方位了解其样本的潜在生物复杂性的研究工具。对于越来越多的研究人员来说,单细胞RNA测序和单细胞多组学——即在单细胞分辨率下对基因表达及其他基于DNA、RNA或蛋白质的分析物进行定量分析的基因组方法——在帮助解决他们面临的生物学问题上已证实是行之有效的。吉林高通量测序单细胞测序平台烈冰科技已建立了多种国际和国内主流的高通量测序实验平台。
关于10XGenomics单细胞平台的样本类型和样本制备:10X平台在上机前需要注意细胞消化后的细胞团块,获得分离良好的细胞悬液、无细胞随便、极少的细胞团块,且细胞活力高(>70%);此外,了解您所研究细胞的大小范围也很重要。细胞大小通常与细胞表达的转录本数量有关。各种尺寸不同的细胞(一般直径不大于50μm)均可与我们基因表达解决方案中使用的10XGenomics平台兼容。一般来说,细胞制备方案将根据组织来源和细胞类型而变化。每种组织类型都是独特的,因此,必须在开始任何单细胞实验之前优化样本制备,烈冰多年样本解离消化经验,累积10+物种、50+组织的消化protocol,若您的样本为组织,且尚未成功将组织样本消化成单细胞悬液,烈冰将尽可能提供技术及实验上的帮助。
单细胞测序庞大的数据烈冰生信团队倾情研发的NovelBrain®生信大数据分析平台,可实现零代码操作、简单方便:单细胞浏览器的操作简单,不需要命令行操作。简单拖拽、设置参数即可运行,即使生信0基础用户也可以运用自如;可视化展示海量结果文件:可视化展示Cluster的基因数,UMI数量、线粒体RNA占比信息;以及不同Cluster对应的细胞数量、基因表达量、RNA表达量、样本细胞分布、线粒体RNA表达量等;3D立体展示,文章动图先人一步:单细胞浏览器针对t-SNE图、UMAP图和pseudotime结果进行三维立体展示,更加直观立体的观察细胞分布和聚类情况。高通量测序技术是对传统测序一次突破性的改变,一次对几十万到几百万条核酸序列进行测定。
针对样本活性的问题,10×Genomics官方建议当单细胞悬液活性低于70%时应做去除死细胞操作,但也需要注意到,去除死细胞的操作会损失一定的细胞数量,10×Genomics和MiltenyiBiotec都没有给出单细胞悬液含有多少细胞数量才建议做去除死细胞的操作。基于烈冰多年单细胞测序实验经验,建议当细胞悬液进行质量和活性检测后,考虑对细胞活性在50%-70%的悬液进行去除死细胞的操作。而太低活性的悬液(小于30%),悬液中细胞大量死亡,可能已经丢失了原组织内的细胞比例和状态,失真严重,建议重新收集样本进行新的实验,保证数据的高质量和实验结果的准确性。烈冰单细胞多组学测序助您探究细胞类型特异性和基因调控网络特征。成都二代测序单细胞测序多组学测序
单个细胞的基因结构和基因表达状态,并鉴定细胞的类型。陕西10X单细胞测序数据分析可视化
科研的魅力之处,在于无穷尽的探寻生命的本底,通过单细胞测序,我们对组织的分子基础的研究也从初级到深层,并在单细胞层面逐渐达成一致,那么不禁要问一句,组织的空间位置到底重不重要?空间异质性是功能的关键特征,细胞的位置信息更能反应细胞命运调控机制和细胞谱系发生过程。因此时间和空间即像组织的AB面,而不可否认的是,此时空间坐标的记录,像一个还未长大的娃娃,虽未触及分子基础研究的深层,但仍在努力攀登探寻生命本底的下一个高峰。陕西10X单细胞测序数据分析可视化
上海烈冰生物医药科技有限公司一直专注于生物科技、医药科技、信息科技、计算机科技领域内的技术开发、技术服务、技术转让、技术咨询,市场营销策划,市场信息咨询与调查(不得从事社会调查、社会调研、民意调查、民意测验),从事货物及技术的进出口业务,计算机、软件及耗材(除专控),软件开发【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】,是一家医药健康的企业,拥有自己**的技术体系。公司目前拥有专业的技术员工,为员工提供广阔的发展平台与成长空间,为客户提供高质的产品服务,深受员工与客户好评。公司业务范围主要包括:单细胞测序,生物大数据云分析平台,空间转录组测序,单细胞多组学测序等。公司奉行顾客至上、质量为本的经营宗旨,深受客户好评。公司凭着雄厚的技术力量、饱满的工作态度、扎实的工作作风、良好的职业道德,树立了良好的单细胞测序,生物大数据云分析平台,空间转录组测序,单细胞多组学测序形象,赢得了社会各界的信任和认可。