仪器操作设置放置样品板：将密封好的 96 孔板平稳放入 qPCR 仪的样品槽，确保孔位对齐，盖紧仪器舱门。程序设置（通过仪器软件）：预变性：通常 95℃，30 秒 - 5 分钟（热启动酶，使模板完全变性）。循环阶段（变性→退火→延伸，同时采集荧光）：变性：95℃，5-15 秒（使 DNA 解链）。退火 / 延伸：根据引物 Tm 值设置温度（一般 55-65℃），20-30 秒（引物结合并延伸，荧光染料 / 探针在此阶段发光）。循环次数：通常 35-40 次（根据模板浓度调整）。溶解曲线（可选）：用于验证扩增产物特异性，程序为 95℃ 15 秒→60℃ 1 分钟→缓慢升温至 95℃，同时连续采集荧光（观察是否有单一峰，排除非特异性扩增或引物二聚体）。荧光通道选择：根据使用的荧光染料 / 探针类型选择（如 SYBR GreenⅠ 对应 FAM 通道，TaqMan 探针根据标记荧光选择）。样本信息录入：在软件中标记样品类型（如标准品、未知样本、阴性对照、空白对照）及孔位对应关系。RePure-A凭借其紧凑的结构，能够有效节省实验室的占用空间，提升实验室的整体布局效率。无锡48孔基因扩增仪PCR仪价格
实验效率与合规性：1. 程序编辑与数据管理操作界面是否支持触摸屏或电脑端远程控制，能否存储自定义程序（如保存不同实验的温度循环参数）；数据导出功能：是否支持 PDF、Excel 格式报告生成，便于实验记录和合规审计（如临床检测需符合 GMP 标准）。2. 安全与合规性临床用 PCR 仪需具备医疗器械注册证（如 NMPA 认证），科研用仪器需符合 CE、FDA 等国际标准；部分机型内置热盖（105℃），防止冷凝水影响反应体系，避免产物污染。选型决策流程明确**需求：先确定 “是否需要梯度功能”“样本通量多大”“是否需定量”；技术参数对标：重点关注温控精度、均匀性、升降温速率；成本与场景匹配：科研选梯度 + 低通量，临床选高通量 + 合规机型，野外选便携 + 集成化；品牌与服务验证：参考用户评价，对比售后响应速度与培训支持。普通基因扩增仪PCR仪哪个好RePure-(D)B采用先进的PID温控技术，可精确控制反应温度，保证PCR反应的稳定性和可靠性。
在保障农产品质量安全、品种改良和动植物疫病防控中应用较广。转基因作物检测：定量检测农作物中转基因成分的含量，判断是否符合相关标准（如我国规定转基因食品需标注，qPCR可精细测定转基因片段的拷贝数）。动植物疫病检测：快速检测畜禽或农作物中的病原体（如禽流感病毒、猪瘟病毒、植物病毒等），实现疫病的早期预警和防控，减少经济损失。品种鉴定与育种：通过分析特定基因的表达量或基因型，鉴定农作物或畜禽的品种纯度，辅助优良品种的选育（如抗虫、抗病品种的筛选）。
快速检测沙门氏菌：沙门氏菌是常见的食源性致病菌，可引发食物中毒等疾病。利用 PCR 仪，针对沙门氏菌的特定基因序列设计引物，能快速从食品样本中扩增出相关基因片段，从而判断食品中是否存在沙门氏菌。相比传统检测方法，缩短了检测时间，提高了检测效率。检测大肠杆菌 O157:H7：大肠杆菌 O157:H7 是一种具有强致病性的菌株，能产生志贺样，对人体健康危害极大。通过 PCR 技术检测其特异性基因，如 stx1、stx2 等基因和 eaeA 毒力岛基因等，可准确判断食品中是否含有该病菌，有效保障食品安全。检测李斯特菌：李斯特菌在环境中广存在，能在低温下生长繁殖，常污染乳制品、肉类等食品。运用 PCR 仪检测李斯特菌的 hlyA 基因等特异性基因，可快速筛查食品中的李斯特菌，防止因食用被污染食品而引发李斯特菌病。柏恒RePure系列PCR仪具有优越的扩增效果，可靠地放大目标DNA序列，保证实验结果的准确性和可重复性。
准备试剂：准备 PCR 反应所需的各种试剂，包括 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、缓冲液、引物、Mg²⁺等。引物是决定 PCR 特异性的关键因素，需根据待检测的转基因成分的特定基因序列设计合成特异性引物。配置反应液：按照一定的比例和顺序，将各种试剂加入到无菌的 PCR 管中，配置成 PCR 反应体系。一般反应体系包括 10×PCR 缓冲液、2.5mmol/L dNTPs、25mmol/L MgCl₂、10μmol/L 引物、5U/μL Taq DNA 聚合酶以及适量的模板 DNA，总体积通常为 20μL 或 50μL。RePure-A的光学系统经过精心设计，具备高灵敏度与高特异性。江苏48孔基因扩增仪PCR仪有哪些
RePure-(D)B梯度功能具有灵活性，可以根据实验需求自定义温度梯度范围和步长，满足不同实验的要求。无锡48孔基因扩增仪PCR仪价格
琼脂糖凝胶电泳检测：PCR 扩增结束后，取适量的扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳。在电场作用下，DNA 根据大小在凝胶中迁移，经过染色后，在紫外灯下观察是否出现特异性条带。若出现与预期大小相符的条带，则初步判断为转基因成分阳性；若未出现条带，则为阴性。荧光定量 PCR 分析：若采用荧光定量 PCR 技术，可根据荧光信号的变化实时监测 PCR 扩增过程。通过标准曲线法或相对定量法，计算出样本中转基因成分的含量。一般以 Ct 值（循环阈值）来表示荧光信号达到设定阈值时的 PCR 循环数，Ct 值与模板 DNA 的起始量呈负相关，通过与标准品的 Ct 值比较，可得出样本中转基因成分的相对含量。测序验证：对于琼脂糖凝胶电泳检测为阳性的样本，为进一步确认结果的准确性，可将扩增产物进行测序。将测序结果与已知的转基因序列进行比对，若序列一致，则可确定样本中含有相应的转基因成分。无锡48孔基因扩增仪PCR仪价格
