早期斑马鱼转基因技术依赖随机整合法，即将外源DNA随机插入基因组，导致表达不稳定、表型异质性高。2008年，Tol2转座子系统的应用实现了外源基因的稳定整合——Tol2转座酶可识别基因组中的反向重复序列，将携带目的基因的转座子精细插入基因组特定位点，整合效率提升至30%-50%。而CRISPR-Cas9技术的引入，则进一步推动了精细编辑：通过设计特异性sgRNA，科学家可在斑马鱼胚胎中实现基因敲除、敲入或点突变。例如，利用CRISPR敲除p53基因，可构建tumor易感模型，模拟人类Li-Fraumeni综合征；而通过同源重组模板（HDR）敲入人类CFTR基因突变体（ΔF508），则成功构建了囊性纤维化斑马鱼模型。这些技术突破使转基因斑马鱼从“表型模拟工具”升级为“基因功能解析平台”，为理解人类遗传病发病机制提供了不可替代的模型。某些基因突变会导致斑马鱼身体形态或生理功能异常。斑马鱼crispr-cas9基因敲入单位
PDX斑马鱼模型的关键价值在于实现“一人一策”的精细医疗。通过移植患者tumor组织，模型可保留原始tumor的遗传异质性和微环境特征，模拟个体对药物的独特反应。例如，在结直肠ancer医疗中，利用5例患者的手术切除样本建立zPDX模型，采用FOLFOX（奥沙利铂+亚叶酸钙+氟尿嘧啶）及FOLFIRI（伊立替康+亚叶酸钙+氟尿嘧啶）方案进行干预，发现模型与患者医疗反应的相关性达4/5，为医疗方案筛选提供了可靠依据。此外，该模型还可预测tumor转移潜力。研究显示，斑马鱼PDX模型中高转移性tumor与患者较短的无进展生存期（PFS）明显相关，例如在卵巢ancer中，模型预测PFS>24个月的准确率达81%，帮助医生提前调整医疗策略，降低复发风险。斑马鱼基因网站斑马鱼具有群居性，群体游动时，行为模式有一定的协调性。
PDX斑马鱼模型的关键技术包括tumor组织处理、移植位点选择及免疫抑制策略。首先，通过手术或活检获取患者tumor组织，经胶原酶消化制成单细胞悬液（细胞活力>90%），随后通过显微注射技术将100-500个肿瘤细胞精细植入斑马鱼胚胎的卵黄囊、脑部或腹膜腔。斑马鱼胚胎的免疫缺陷特性（如rag1基因敲除品系）可有效避免移植排斥，而其透明特性允许实时观察tumor生长（如通过荧光标记追踪细胞增殖）。与小鼠模型相比，斑马鱼PDX模型无需构建免疫缺陷小鼠品系，且单次实验可处理50-100个样本，成本只为小鼠模型的1/10。此外，斑马鱼胚胎的血管系统在48小时内形成，可模拟tumor-血管相互作用，为抗血管生成药物筛选提供独特优势。例如，在结直肠ancerPDX模型中，通过共移植肿瘤细胞与内皮细胞，可定量评估贝伐珠单抗对tumor血管生成的抑制作用，结果与临床数据高度吻合。
在临床实践中，斑马鱼PDX平台已成为个性化医疗的重要决策工具。以卵巢ancer研究为例，浙江省人民医院团队利用5例患者样本构建的zPDX模型，对卡铂的敏感性预测与实际医疗反应一致性达81%。在结直肠ancer领域，FOLFOX与FOLFIRI方案的斑马鱼测试结果，与患者无进展生存期（PFS）明显相关，模型预测PFS>24个月的准确率达81%。更值得关注的是，该平台在耐药机制研究中发挥了关键作用。通过对卡铂耐药卵巢ancer细胞系OVCAR8的斑马鱼移植模型分析，研究者发现Ras/Raf/MEK/ERK通路异常开启是耐药的主要诱因，为靶向医疗提供了新靶点。此外，平台还可评估tumor转移潜力，在非小细胞肺ancer研究中，zPDX模型预测淋巴结转移的敏感性达91%，特异性达62%，为临床分期提供了重要参考。斑马鱼的听觉organ能接收水中的声波信号并作出反应。
斑马鱼PDX平台的临床价值已得到多中心研究的验证。浙江省人民医院药学部黄萍教授团队通过构建卵巢ancer斑马鱼PDX模型，发现该模型对卡铂的响应与患者临床疗效的一致性高达81%。在16例接受卡铂医疗的患者中，13例的PDX模型结果与实际医疗反应一致。这种“体外替身”技术不仅可预测化疗耐药性，还能通过血管生成抑制剂（如VRI）阻断tumor微环境形成。例如，在胃ancer研究中，VRI处理明显抑制了AGS和SGC-7901细胞系诱导的血管生成，为抗血管生成医疗提供了新靶点。此外，平台与类organ技术的结合进一步提升了预测精度。环特生物联合浙江大学附属第二医院开展的全球较早胃ancer斑马鱼PDX与患者医疗效果一致性评价项目，通过构建50例类organ生物样本库，实现了从基因水平到药效水平的多方位验证。斑马鱼的卵有粘性，常附着在水草等物体表面孵化。斑马鱼实验基因技术
其血液在体内循环，运输氧气、营养物质和代谢废物。斑马鱼crispr-cas9基因敲入单位
环特生物构建了超过200种斑马鱼疾病模型，涵盖心血管、神经、代谢及tumor等领域。其CRISPR/Cas9基因编辑技术可实现外源基因定点整合，已开发出Tg(itga2b:EGFP)血小板特异性标记品系，用于Glanzmann血栓形成症研究；而黑色素突变斑马鱼(Albino)模型则通过酪氨酸酶活性定量检测，为化妆品美白功效评价提供可视化指标。在药物研发领域，环特模型库支持从靶点验证到毒性评价的全流程服务：例如，利用gridlock突变体模拟人类主动脉缩狭疾病，结合高通量行为分析系统，可快速筛选出调节血管生成的候选化合物。数据显示，其构建的斑马鱼心衰模型与临床药物地高辛的医疗效应相关性达89%，明显缩短了新药开发周期。斑马鱼crispr-cas9基因敲入单位
