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大体积外泌体样本量处理方案大体积外泌体样本在浓缩后根据不同应用，衔接不同的外泌体分离纯化方法，见下文。01外泌体分离纯化对于外泌体的分离纯化，市面上已有许多方法。维思克思总结出常用、简便、效果比较好的三种方法。SEC重力柱基于分子排阻色谱原理，根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心柱是离心柱式的外泌体分离产品，离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体，实现超快速、高收率的外泌体分离。磁珠法外泌体分离试剂盒能特异性捕获外泌体而不吸附杂质，实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。02外泌体RNA提取在外泌体RNA提取步骤中，常用的是磁珠法和沉淀法。磁珠法外泌体总RNA提取试剂盒能特异性捕获外泌体，实现高纯度、高回收率提取，特别适用于血浆、血清等复杂样本RNA提取。沉淀法外泌体总RNA提取试剂盒，于外泌体微量RNA的提取，具有提取效率高、提取的RNA种类多、回收的miRNA含量高等特点。外泌体研究工具原料溯源体系完善，保障产品质量可追溯，降低风险。柠檬sEVs检测服务

外泌体RNA定量试剂盒外泌体的组成复杂，不仅包含脂质和蛋白质，RNA也是其组成部分。从目前文献报道统计结果来看，RNA是外泌体发挥功能的主要物质。研究外泌体RNA组成和含量具有重要意义。从原理上来说，既然蛋白浓度可以一直作为外泌体定量和表征的重要指标。那么用RNA来对外泌体进行定量和表征也是非常可行的。外泌体中包含RNA分子，其在细胞通讯、疾病发展等方面具有重要的研究和应用价值。但目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法，单一的检测技术都有其局限性。WSR0039不需提取外泌体RNA，直接检测微量RNA含量。具有操作简便，灵敏度高，线性范围广，易于检测等特点。该试剂盒的检测线性范围是0-25ng，比较低检测限可至0.2ng。应用范围：外泌体RNA定量、外泌体表征产品信息：ExosomalRNAQuantificationKit(Fluorometric)（WSR0039）。益生菌Exosome应用外泌体研究工具定制化组合方案，按需搭配组件，避免功能冗余浪费。

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。很多人认为外泌体的分离难点在于样本差异、杂质类型或外泌体来源于细胞等，但业内人事认为，外泌体的分离之难，在于没有很好的方法去判定外泌体的纯度和活性。本文从外泌体定量和表征的角度来分析，什么样的外泌体才是高质量的，以及如何对外泌体进行计数。单一定量和表征方法的局限性对外泌体的鉴定方法，目前行业内基本上是一致的：通过形态、粒径范围、标志蛋白等定性检测。1.单一定量方法的局限性对外泌体的定量，使用较多的还是颗粒数。众所周知，外泌体被定义为30-150nm的小细胞外囊泡，比较大和小的外泌体表面积相差25倍、体积相差125倍。而外泌体发挥功能主要依赖其所载货物，比较大和小外泌体对受体细胞的效应也会有较大差异。同时颗粒数的检测方法包括NTA或纳米流式等，并不能分辨外泌体和其他具有相识粒径的其他杂质，在计算颗粒数时，不同纯度外泌体数据的可参考性也并不相同。所以通过颗粒数来对外泌体定量，可能有其局限性。

外泌体样本量太大怎么办？外泌体来源，几乎所有细胞都可以分泌外泌体。在科研中，如何处理大体积外泌体样本是众多研究者都觉得十分棘手的问题。目前，常用的分离手段包括超速离心法、尺寸排阻法、沉淀法以及免疫亲和法。然而这些分离方法要么只适用于小体积微量样本，要么就是对仪器要求高、操作复杂。与各位研究者分享维思克思的大体积样本处理经验，愿能为各位研究者提供思路。1.外泌体浓缩试剂。外泌体浓缩试剂可用于大体积外泌体样本的处理，可以高通量、快速实现大体积外泌体样本（如细胞培养上清、尿液等）的浓缩，浓缩后的样本后处理后可进行外泌体的分离纯化、RNA提取、蛋白提取等后续实验。2.超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术，利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜，利用膜孔的大小选择性，将分子量较大的物质过滤出来，而将分子量较小的物质通过膜孔。以上大体积外泌体样本处理工具，维思克思均有提供。外泌体浓缩试剂以及超滤管在处理大体积样本上具有突出优势。尤其是外泌体浓缩试剂，操作简便，浓缩倍数高，实验体验有较好的评价，推荐指数较高。浓缩后的外泌体分离纯化，维思克思产品线也非常齐全，包括磁珠法、SEC法等。外泌体研究工具常温保存设计，无需特殊冷藏设备，降低实验室储存成本。

外泌体表征系列产品线目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法，单一的检测技术都有其局限性。维思克思全新系列产品—外泌体表征与定量试剂盒，该系列产品可对现有单一表征与定量方法进行补充，通过多维度对分离出的外泌体进行评估，使实验数据更加科学、准确。01BCA蛋白定量试剂盒（WSR0022），具有灵敏度高、显色速度快、线性范围广的优势，可高效快速实现蛋白定量。02脂质定量试剂盒(WSR0028/WSR0028-2)，现有的脂质定量方法大都需要昂贵的仪器，本产品可代替大型仪器，实现小成本快速检测，具有灵敏度高、操作简便、线性范围广等优势。03外泌体RNAQC试剂盒（WSR0013-1），经大量研究分析，筛选出2个阳性外泌体RNA靶标和1个阴性靶标，用于表征RNA质量。04外泌体蛋白标志物鉴定试剂盒（WSR0030），针对外泌体标志蛋白CD9、CD81、TSG101、Calnexin检测而研发的一款方便高效的试剂盒产品，可监测实验体系并准确检测到外泌体中的以上蛋白。05外泌体RNA定量试剂盒（WSR0039），检测线性范围是0-25ng，比较低检测限可至0.2ng，灵敏度高。外泌体研究工具高兼容性配方，适配多种样本类型，提升应用范围。灵芝胞外囊泡

外泌体研究工具自动化数据分析兼容，适配主流软件，提升分析效率。柠檬sEVs检测服务

外泌体的保存是否重要？在外泌体研究中，储存稳定性是一直困扰广大科研工作者的难题。目前外泌体一般在PBS中，置于-80℃分装冻存，但随着冻存时间和冻融次数的增加，将会严重影响外泌体的活性、完整性、货物含量等。针对上述难点，维思克思开发出外泌体的冻存保存液，直接混入外泌体样本中，置于-20℃、-80℃冻存，可明显改善储存样品的短期和长期稳定性。产品特点：操作简便，可直接混入外泌体样本中，无需过多操作。保护效果好，使用后外泌体生物活性稳定，多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异。适用样本范围广，可适用于所有外泌体样本（包括植物、动物、微生物、人来源外泌体）。产品信息：WisExoExosomeProtector（WSR0020）柠檬sEVs检测服务

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