天山雪莲Exosome纯化

外泌体RNA研究的正确打开方式外泌体中有许多货物，包含蛋白质、脂质、糖、代谢物和核酸等，从论文发表数量统计来看，外泌体发挥功能的分子机制研究中RNA占比是比较高的。然而外泌体与组织或细胞RNA相比，在提取和质控上差异较大，不能延用目前主流的产品和技术；同时，外泌体RNA质量控制等也缺乏统一的标准化方案，这些因素将阻碍外泌体RNA的研究。外泌体与细胞RNA相比，有一些差异：1.有来自供体细胞或周围环境RNA的污染；2.外泌体RNA非常微量；3.外泌体RNA中小RNA含量比较高；4.常规的RNA质控方法不适用。综上，对外泌体RNA研究人员，需要选择种高特异、高回收的外泌体分离或RNA提取方法，配合严谨的外泌体RNA质控方法，才能呈现出良好的、准确的、严谨的研究数据和科学结论。针对以上问题，维思克思推荐使用外泌体RNA提取试剂盒（WSR0004-3）、氯仿替代物（WZ13）、外泌体RNA质控试剂盒（WSR0013-1）、外泌体RNA定量试剂盒（WSR0039）。外泌体研究工具复溶后稳定性强，多次使用不影响效果，减少浪费。天山雪莲Exosome纯化

外泌体研究常见问题解答22.外泌体形成的机制是什么？外泌体通常被描述为通过多囊泡体与质膜融合产生的内吞途径的囊泡，通过多泡体分泌到细胞外的小囊泡。它们是细胞分泌的一个更大的囊泡家族的一部分，包括微泡、外泌体和脱落颗粒，这些囊泡（除外泌体外）来源于质膜的直接出芽。由于这些实体的大小、密度和总体组成的相似性存在重叠，使用目前可用的技术和仪器将其分离是极具挑战性的。3.外泌体和微囊泡的区别是什么？外泌体和微囊泡的区别在于其产生的方式不同。从晚期胞内体分泌的细胞外囊泡称为外泌体，从细胞膜直接出芽产生的细胞外囊泡称为微囊泡。二者的大小也有所不同，外泌体的粒子直径约40-100nm，微囊泡的粒子直径约100-1000nm，但有报道发现也存在小直径的微囊泡，所以无法从粒子大小来明确区分二者。4.外泌体是由什么组成的？外泌体是脂质膜包裹的，含有蛋白质、脂质、RNA和其他代谢物的微小囊泡（30–150nm）。外泌体的货物和表面蛋白可能有很大差异，不同的细胞类型可以分泌不同的外泌体。血清胞外囊泡应用外泌体研究工具高灵敏度检测试剂，微量样本即可分析，减少样本用量需求。

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。很多人认为外泌体的分离难点在于样本差异、杂质类型或外泌体来源于细胞等，但业内人事认为，外泌体的分离之难，在于没有很好的方法去判定外泌体的纯度和活性。本文从外泌体定量和表征的角度来分析，什么样的外泌体才是高质量的，以及如何对外泌体进行计数。单一定量和表征方法的局限性对外泌体的鉴定方法，目前行业内基本上是一致的：通过形态、粒径范围、标志蛋白等定性检测。1.单一定量方法的局限性对外泌体的定量，使用较多的还是颗粒数。众所周知，外泌体被定义为30-150nm的小细胞外囊泡，比较大和小的外泌体表面积相差25倍、体积相差125倍。而外泌体发挥功能主要依赖其所载货物，比较大和小外泌体对受体细胞的效应也会有较大差异。同时颗粒数的检测方法包括NTA或纳米流式等，并不能分辨外泌体和其他具有相识粒径的其他杂质，在计算颗粒数时，不同纯度外泌体数据的可参考性也并不相同。所以通过颗粒数来对外泌体定量，可能有其局限性。

外泌体分离提取方法大全外泌体快速、简便、高纯度、高回收率的分离方法是在大规模应用的前提。维思克思编制了外泌体分离方法大全：亲和磁珠法分离（WSR0002-2）能特异性捕获外泌体，实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。凝胶排阻色谱法分离（WSR0003）基于分子排阻色谱（SEC）原理，根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离，可以获取分子大小均一、高纯度的外泌体。特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心法分离（WSP0015/WSP0016）是离心柱式的外泌体分离产品，离心柱中装填的介质能无差别地吸附杂质而不结合外泌体，实现超快速、高收率的外泌体分离。沉淀法分离（WSR0026/WSR0037）是一款沉淀法外泌体分离试剂盒，可用于多种样本的外泌体分离，具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。离子交换法分离（WSR0031）适用于10-30mL细胞培养上清样本中外泌体的分离纯化，基于阴离子交换层析原理，特异性吸附样本中带负电的外泌体，然后高效洗脱，实现外泌体的浓缩和分离。外泌体研究工具完备验证数据，提供详细技术文档，减少方法验证时间。

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。03如何表征考虑到外泌体中其他杂质对定量检测的影响，建议先进行外泌体纯度表征，确保外泌体纯度在合理范围内，再进行外泌体定量。外泌体纯度表征可以用颗粒数/总蛋白、总蛋白/总脂质、颗粒数/总脂质、颗粒数/总核酸、总蛋白/总核酸等，从多个维度来评估外泌体纯度。04如何定量外泌体发挥功能与其所载货物相关，对外泌体定量可以考虑检测外泌体中某些分子来评估。如某些蛋白标志、脂质、核酸、糖类等分子。针对外泌体表征与定量此类问题，维思克思不断尝试，经多次验证终推出了外泌体表征与定量一系列产品。具体产品包括：BCA蛋白定量试剂盒、外泌体脂质定量试剂盒、外泌体核酸定量试剂盒、外泌体检测抗体、外泌体RNAQC试剂盒、外泌体RNA定量试剂盒。外泌体研究工具高纯度原料制备，减少实验干扰因素，提升结果可靠性。积雪草细胞外囊泡基础研究

外泌体研究工具多场景应用设计，覆盖基础研究到临床前，提升实用性。天山雪莲Exosome纯化

外泌体样本量太大怎么办？外泌体来源，几乎所有细胞都可以分泌外泌体。在科研中，如何处理大体积外泌体样本是众多研究者都觉得十分棘手的问题。目前，常用的分离手段包括超速离心法、尺寸排阻法、沉淀法以及免疫亲和法。然而这些分离方法要么只适用于小体积微量样本，要么就是对仪器要求高、操作复杂。与各位研究者分享维思克思的大体积样本处理经验，愿能为各位研究者提供思路。1.外泌体浓缩试剂。外泌体浓缩试剂可用于大体积外泌体样本的处理，可以高通量、快速实现大体积外泌体样本（如细胞培养上清、尿液等）的浓缩，浓缩后的样本后处理后可进行外泌体的分离纯化、RNA提取、蛋白提取等后续实验。2.超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术，利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜，利用膜孔的大小选择性，将分子量较大的物质过滤出来，而将分子量较小的物质通过膜孔。以上大体积外泌体样本处理工具，维思克思均有提供。外泌体浓缩试剂以及超滤管在处理大体积样本上具有突出优势。尤其是外泌体浓缩试剂，操作简便，浓缩倍数高，实验体验有较好的评价，推荐指数较高。浓缩后的外泌体分离纯化，维思克思产品线也非常齐全，包括磁珠法、SEC法等。天山雪莲Exosome纯化

维思克思生物科技(武汉)有限公司在同行业领域中，一直处在一个不断锐意进取，不断制造创新的市场高度，多年以来致力于发展富有创新价值理念的产品标准，在湖北省等地区的机械及行业设备中始终保持良好的商业口碑，成绩让我们喜悦，但不会让我们止步，残酷的市场磨炼了我们坚强不屈的意志，和谐温馨的工作环境，富有营养的公司土壤滋养着我们不断开拓创新，勇于进取的无限潜力，维思克思生物科技供应携手大家一起走向共同辉煌的未来，回首过去，我们不会因为取得了一点点成绩而沾沾自喜，相反的是面对竞争越来越激烈的市场氛围，我们更要明确自己的不足，做好迎接新挑战的准备，要不畏困难，激流勇进，以一个更崭新的精神面貌迎接大家，共同走向辉煌回来！