外泌体定量和表征。研究外泌体的同行们(包括我)一直被外泌体的定量和表征所困扰,什么样的外泌体才是好的外泌体呢?是评估其活性?纯度?蛋白浓度?还是其他什么指标?或者说我们在做实验时,怎样对外泌体进行定量呢?这个可以说是进行外泌体实验的第一步,必须确定外泌体的量,才好判断实验变量是否影响外泌体的发生或者确定下游应用实验的给药剂量。你们是如何进行定量的呢?目前的外泌体定量方法有以下几种,分别是:纳米颗粒跟踪分析(NTA)、纳米流式、表面标志物的ELISA定量试剂盒、BCA或Bradford蛋白定量试剂盒。注:受认知所限,有没有涵盖的,欢迎补充。上述外泌体定量方法中,以BCA蛋白浓度测定应用的广,也容易得到(也就是可及性很高)。但是,但是我们分离的外泌体,因获取样本的不一致,每种样本中杂蛋白的含量不尽相同,同时分离方法也不一定相同,这就导致我们很难确定蛋白量与外泌体量的对应关系。所以,我们这些外泌体研究者就在两难之间不断横跳。为了解决这些困境,维思克思生物科技提供了整套外泌体鉴定技术服务、外泌体分离、示踪、保存、游离染料清qing除、蛋白定量、脂质定量、核酸定量等系列产品。外泌体研究工具高兼容性配方,适配多种样本类型,提升应用范围。益生菌细胞外囊泡冻干粉

外泌体标记真的只能用PKH和DiR吗?外泌体作为近几年的“科研新贵”,可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力,是非常有前途的递送载体。然而,目前在外泌体的示踪研究和应用上还存在一些难点:难点一:目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种,包括亲脂性的染料(如:PKH、Dil等),这些染料与外泌体膜不是共价结合,而是通过疏水相互作用短暂结合在一起的。在后续的细胞摄取时,会出现示踪染料在不同膜结构或脂溶性物质间发生不断解离和结合的现象,从而影响结果的准确性。ps:分离的外泌体中也会存在一些脂质,也会与示踪试剂结合。难点二:目前外泌体等胞外囊泡有一部分的归宿是在溶酶体,而溶酶体的酸性环境,绝大多数外泌体示踪染料发出的荧光都会淬灭,那么这一部分外泌体的去向就难以检测到。该外泌体示踪试剂盒来自维思克思生物科技,是该公司两项发明专利转化而来,对比其他染色方法,该探针具有低背景、高效率、强耐酸的优势!产品信息:ExosomeWisTracker-IIKit(WSR0001-2)。天然Exosome研究工具外泌体研究工具大包装经济方案,适合长期稳定研究,平均成本更低。

外泌体研究常见问题解答35.CD9或CD81等是否对外泌体起源具有特异性?目前,对于一般的外泌体标记物还没有达成共识。研究界目前的建议是结合检测许多膜结合或膜相关蛋白,以验证膜的存在。靶点CD63和CD81存在于许多不同的外泌体制剂中,CD9也是如此。然而,检测到至少2种不同的细胞系释放CD9阴性的外泌体(Jurkat细胞和几种B细胞淋巴瘤细胞)。同样重要的是,通过对已知在ER、高尔基体或细胞核等隔室中表达的标记物进行染色,来证明不存在污染性囊泡。同样重要的是,用相同的标记物来表征宿主细胞。6.外泌体中是否包含DNA?一般认为外泌体中不包含DNA,或包含少量线粒体DNA。因为外泌体在胞质中形成与包裹货物,而在胞质中存在少量降解的线粒体DNA。目前有一些研究发现,在外泌体的表面,称之为“corona”,中文叫“冠“或”晕“,在外泌体分泌到细胞外后,会吸附微量的游离DNA。
脂质定量试剂盒不止于外泌体表征!脂质是一大类分子,包括甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯、脂肪、甾醇等。脂质不仅是生物膜的骨架成分,保护细胞膜的完整性,而且还参与细胞过程,如膜运输、信号转导、细胞凋亡和能量储存。脂质代谢的紊乱与许多疾病有关,例如阿兹海默症、糖尿病、肥胖症、、和神经退行性疾病以及某些传染病等。为了研究脂质,通常必须首先从组织或细胞培养物中提取脂质,然后进行定量。脂质定量需要昂贵的设备,例如HPLC、光散射检测技术或LatroscanTLC-FID分析仪。WSR0028脂质定量试剂盒使用硫代磷酸香草醛法测量样品的脂质含量(不饱和脂肪酸),从而产生适用于多孔板检测的简单比色读数。首先,将粗制或纯化的脂质样品加到96孔板中。然后加入浓硫酸,加热样品以溶解总脂质样品,随后加入脂质定量试剂。在酸性条件下,脂质与香草醛反应形成比色产物,该比色产物易于在酶标仪上检测。维思克思的脂质定量试剂盒ExosomalLipidQuantificationKit(Fluorometric)(WSR0028-2)与WSR0028相结合,可更好表征外泌体,LNP等!外泌体研究工具定制化检测方案,准确匹配研究需求,避免功能浪费。

外泌体分离提取方法大全外泌体快速、简便、高纯度、高回收率的分离方法是在大规模应用的前提。维思克思编制了外泌体分离方法大全:亲和磁珠法分离(WSR0002-2)能特异性捕获外泌体,实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。凝胶排阻色谱法分离(WSR0003)基于分子排阻色谱(SEC)原理,根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离,可以获取分子大小均一、高纯度的外泌体。特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心法分离(WSP0015/WSP0016)是离心柱式的外泌体分离产品,离心柱中装填的介质能无差别地吸附杂质而不结合外泌体,实现超快速、高收率的外泌体分离。沉淀法分离(WSR0026/WSR0037)是一款沉淀法外泌体分离试剂盒,可用于多种样本的外泌体分离,具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。离子交换法分离(WSR0031)适用于10-30mL细胞培养上清样本中外泌体的分离纯化,基于阴离子交换层析原理,特异性吸附样本中带负电的外泌体,然后高效洗脱,实现外泌体的浓缩和分离。外泌体研究工具小批量试用装供应,适合前期方法学验证,降低试错成本。积雪草细胞外囊泡工程化
外泌体研究工具常温保存设计,无需特殊冷藏设备,降低实验室储存成本。益生菌细胞外囊泡冻干粉
外泌体作为近几年的“科研新贵”,可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力,是非常有前途的递送载体。然而,目前在外泌体研究和应用上还存在以下痛点:痛点一:由于目前对这些内源性囊泡了解还不够深入,尤其是在体内行为方面上,将外泌体治zhi疗转诊至临床故而仍为一大难点。体内追踪外泌体可以提供有关其生物分布、迁移能力、毒性、生物学的重要知识角色,沟通能力和行动机制。痛点二:目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种,包括亲脂性的染料(如PKH系列、Dil系列),然而这些染料标记方法存在一些不足。维思克思的示踪探针基于两项发明专利,对比其他染色方法,该探针具有低背景、高效率、强耐酸的优势!发明名称:1.一种pH敏感型探针分子及其应用;2.一种探针分子的合成方法。WSR0001-2工作原理为共价方式嵌入外泌体膜结构。当染料结合外泌体膜后,可通过荧光显微镜准确观察到外泌体在细胞内运动与行踪。突出优势:特异性高,无背景干扰;标记效率高,该探针以共价的方式嵌入胞外囊泡的双层膜结构,优于亲脂性染料,避免自组装形成的纳米粒子造成信号干扰。在低pH(酸性)条件下也可显色。益生菌细胞外囊泡冻干粉
维思克思生物科技(武汉)有限公司是一家有着先进的发展理念,先进的管理经验,在发展过程中不断完善自己,要求自己,不断创新,时刻准备着迎接更多挑战的活力公司,在湖北省等地区的机械及行业设备中汇聚了大量的人脉以及**,在业界也收获了很多良好的评价,这些都源自于自身的努力和大家共同进步的结果,这些评价对我们而言是比较好的前进动力,也促使我们在以后的道路上保持奋发图强、一往无前的进取创新精神,努力把公司发展战略推向一个新高度,在全体员工共同努力之下,全力拼搏将共同维思克思生物科技供应和您一起携手走向更好的未来,创造更有价值的产品,我们将以更好的状态,更认真的态度,更饱满的精力去创造,去拼搏,去努力,让我们一起更好更快的成长!
外泌体是一类由真核细胞主动分泌、直径介于30-150nm的纳米级囊泡结构,属于细胞外囊泡的重要亚型,***存在于血液、唾液、尿液、脑脊液、乳汁等各类体液以及细胞培养上清液中,是细胞间信息传递的关键媒介。与凋亡小体、微囊泡等其他细胞外囊泡不同,外泌体并非细胞破裂或凋亡的产物,而是通过细胞内多囊泡体与细胞膜融合后,将内部囊泡释放到胞外环境形成,这一独特形成机制决定了其结构与内含物的特异性。外泌体具有双层脂质膜结构,膜上富含跨膜蛋白、黏附分子及脂质成分,能够保护内部包裹的核酸、蛋白质、脂质等生物活性物质不被体液中的酶类降解,同时介导其靶向运输至受体细胞,实现细胞间的物质交换与信号传导,几乎所有人体细...