乐诊标准菌株纯化后出现细小杂菌菌落，该如何应急处理？

南京乐诊生物技术有限公司2026-07-08

实验室活化纯化南京乐诊标准菌株时，偶尔会发现培养基表面伴随细小杂菌菌落，多数操作人员会直接丢弃菌种，造成耗材浪费，或盲目继续试验引发数据失效。出现微量杂菌污染无需直接报废，可通过标准化应急纯化处理，恢复菌株纯种状态，保障试验正常开展。标准菌株的纯度是微生物试验数据精细的前提，轻微杂菌污染多为操作、环境导致的外源污染，并非菌株本身种质退化，规范处理后可完全恢复合格状态，有效降低菌种采购成本与试验返工率。首先，快速区分污染类型，判定是否具备补救条件。首先观察菌落形态，乐诊标准菌株纯种菌落形态规整、大小均匀、性状统一，杂菌菌落多形态细小、边缘模糊、生长速度与目标菌株差异明显。若平板表面存在少量零散杂菌，目标菌株菌落形态正常、纯度较高、无大面积混杂污染，属于轻微外源污染，可开展纯化补救；若目标菌株与杂菌连片生长、无法区分、污染面积大，或菌株本身性状变异伴随污染，为重度污染，需直接报废，启用原装母种重新活化。其次，开展无菌环境专项消杀，杜绝二次污染。菌株纯化出现杂菌，多源于操作台洁净度不达标、接种工具灭菌不彻底、培养环境存在浮游菌。应急处理前，立即对超净工作台、接种环、培养皿、培养基等全套耗材设备进行二次灭菌消杀，开启紫外消杀与通风净化，清理操作台残留杂物与污染耗材，静置三十分钟后再开展操作，彻底消除环境污染源，避免补救过程中再次出现污染问题。再者，精细开展二次纯化分离操作，提纯纯种菌株。选取形态标准、长势饱满、远离杂菌的目标单菌落，采用分区划线纯化法，在全新无菌培养基平板上规范划线，严格控制划线力度与分区间距，实现菌体充分稀释分离。完成接种后，按照菌株标准培养参数恒温培养，培养结束后再次观察菌落状态，筛选无杂菌、形态规整的单菌落，完成菌株提纯。若一次纯化仍有微量杂菌，可重复纯化一次，彻底外源污染，获得纯种工作菌株。，落实后续防控与溯源工作，杜绝污染反复发生。纯化合格的菌株单独标注、优先使用，短期内完成试验作业，避免长期存放再次污染。同时追溯本次污染原因，排查接种操作、环境消杀、耗材灭菌、菌种存放等环节的漏洞，优化实验室无菌操作流程，增加环境消杀频次，规范工具灭菌、冷却、使用标准。

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