牛肉膏蛋白胨液体培养基(又称营养肉汤,用于培养细菌):成分:牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g,蒸馏水(或去离子水)1000mL,pH7.4士0.2。制法:将各成分溶解于水中,于20~25℃条件下以1mol/LNaOH溶液用pH计校正pH7.4,分装三角瓶(装量以三角瓶容积的1/2~2/3为宜),或试管(分装量以试管高度的1/4左右为宜),0.1MPa灭菌15~20min后备用。化学分类:天然培养基指一类利用动、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。如牛肉膏蛋白胨培养基、麦芽汁培养基等。组合培养基又称为合成培养基或综合培养基,是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。如葡萄糖铵盐培养基、淀粉硝酸盐培养基等。半组合培养基指一类主要以化学试剂配制,同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如,马铃薯蔗糖培养基。在液体培养基中的培养称为液中培养、液体培养或液内培养。蚌埠培养基制备器直销厂家
购买的培养基到货后,应有专人做好接受和验收工作,应仔细核对生产企业提供的资料、培养基名称、规格数量、外观特征、批号、保质期是否符合要求。每批培养基到货后都应对培养基的质量进行检测,满足检测方法规定的要求后方可投入使用。培养基的储存:干粉培养基应保存在阴凉干燥处,要避免阳光直射;未开瓶的培养基在室温下的保存期限以厂家提供为准,开瓶后的干粉培养基易吸湿,应注意防潮并尽快用完。应定期对储存中的培养基进行常规检查,如容器密闭性复查、开封日期、内容物的感官检查,如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象就不能再使用。蚌埠培养基制备器直销厂家脱水培养基,又称预制干燥培养基,指含有除水分外的一切成分的商品培养基。
简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:简单制作培养基,必须将其过滤并澄清液体介质必须完全澄清,普通液体介质可用滤纸过滤,滤纸应折成折扇状或漏斗状,以免滤纸因水力不均而破裂。当温度较高时,培养基可以用干净的白天鹅绒过滤。新制肉、肝、血、马铃薯等滤液,必须用丝绒布过滤,再用滤纸一次又一次地过滤。若过滤方法不能满足澄清的要求,则应采用蛋清过滤。需要对介质分类处理,按培养基及试管内其它烧瓶使用的容器、用途分为适当。货运量超过每2个集装箱3个容量包装的要求。封堵也是容器外包,可用防水防潮纸塞纸封堵容器内棉。电动式装配机采用定量很好的重用或半自动解。预处理和预处理对灭菌容器的清洗要干燥,灭菌时要彻底,培养基要干燥。一只小玻璃瓶批培养基被检测出,培养基被一批 pH批作为该值基准时,应被分成20 mL的培养基进行消毒处理。
三角培养瓶是细胞培养中的常用耗材,也可用于培养基的配制、混合及储存。利用三角培养瓶制备培养基可以按照以下步骤操作:配料:配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。溶解:淀粉溶解:少量冷水调成糊状。加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。调PH:用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。过滤:滤纸或棉花进行过滤。分装:一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。三角培养瓶:若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角培养瓶,很多不能超过150ml培养基/250ml的三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。试管分装:液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。培养基通常采用高压蒸汽灭菌。
天然培养基的血清种类:牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质很高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分很少。血清的主要成分血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。根据培养基的特殊用途可分为基础培养基、加富培养基、选择培养基和鉴别培养基等。蚌埠培养基制备器直销厂家
分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。蚌埠培养基制备器直销厂家
培养基配置原则:控制pH条件,培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的很适pH条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基pH发生变化,若不对培养基pH条件进行控制,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。因此,为了维持培养基pH的相对恒定,通常在培养基中加入pH缓冲剂,常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐(如KH2PO4 和K2HPO4)组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性,KH2PO4溶液呈酸性,两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。蚌埠培养基制备器直销厂家