微生物发酵培养基配制注意事项:①养分浓度和配比合适:微生物只有在培养基中养分浓度合适的情况下才能生长良好是合适的。当养分浓度过低时,不能满足微生物正常生长的需要。②微生物培养基pH条件控制:培养基的pH必须控制在一定范围内,以满足不同种类微生物的生长繁殖或产生代谢物。各种微生物生长繁殖或代谢产物产生的较佳pH条件不同。通常细菌和放线菌适合在7~7.5pH范围内生长,酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范围内生长。③微生物培养基原料来源选择:培养基配制时,应尽可能使用低廉易得的原料作为培养基成分。尤其在发酵行业,培养基用量大,使用成本较低原料实现产品附加价值。例如在微生物单细胞蛋白的工业化生产过程中,制糖业含蔗糖废液、乳业含乳糖废液、大豆废液工业和黑色废物、造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸盐纸浆等经常被作为培养基原料使用。④成品培养基灭菌处理、为了获得微生物的纯培养物,必须避免被细菌污染,所以对使用的设备和工作场所进行消毒和消毒。对于微生物培养基要进行严格的灭菌处理。培养基根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、培养基等。镇江培养基制备器哪家质量好
高层斜面:制备高层斜面分装于试管,约占试管容积的1/3,灭菌后趁热放置成高层短斜面,待其凝固后应用。分装好的培养基或缓冲液等及时密封后必须在配制当天(2h内较佳)进行灭菌处理。液体、半固体培养基一般在高压灭前分装,约装试管容积的1/3,在灭菌后还要加其他成分的液体、半固体培养基,灭菌后再分装于灭菌试管或锥形瓶中。通过无菌技术为测试制备的每一批培养基其PH在放冷至室温(25°)后,都应测定。一个扁平的pH计用于培养基表面pH值的测定,浸入式的pH计用于液体的测定。各供应商提供的培养基的pH应该在规定的±0.2的范围内,除非通过验证得到更宽的范围。镇江培养基制备器哪家质量好在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。
配制培养基需要哪些制备:(1)称出规定数量的琼脂和蔗糖,加水直到培养基较终容积的34,加热溶解,完全融解后的溶液是透明的。在配制液体培养基(不加琼脂)时无需加热。(2)按需要加入一定量的各种贮存母液,包括生长调节物质和其他特殊附加物。吸取母液要使用专一的移液管。如有必要,培养基中所需的维生素,可在高压灭菌之后通过减压过滤装置或微孔过滤器灭菌后再加入。(3)蒸馏水定容。充分混合后调节培养基的pH,一般以5.66.0为好。(4)培养基分装,分装量一般以占培养容器的1514为宜。之后在24h内完成高压灭菌,也可以高压灭菌后再进行培养基的无菌分装,室温下存放备用。暂时不用的培养基应放置于10摄氏度下保存,而含有生长调节物质的培养基在45摄氏度保存更佳。
培养基防止污染应该注意以下事项:确认工作细胞库是否被污染,确认毒种工作种子批是否被污染,确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用细菌、病菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。其它:高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证,确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证,后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外,应将有毒区与无毒区严格分开,并有各自自立的空气净化系统及孵室,有毒区对无毒区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。异养微生物的合成能力较弱,不能以CO2作为碳源或主要碳源,故应在培养基中至少添加一种有机物。
培养基制备技术:一、玻璃器皿的清洗:在制备培养基的过程中,首先要使用一些玻璃器皿,如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。这些器皿在使用前都要根据不同的情况,经过一定的处理,洗刷干净。有的还要进行包装,经过灭菌等准备就绪后,才能使用。1、新购的玻璃器皿:除去包装沾染的污垢后,先用热肥皂水刷洗,流水冲净,再浸泡于1~2%的工业盐酸中数小时,使游离的碱性物质除去,再以流水冲净。对容量较大的器皿,如大烧瓶、量筒等,洗净后注入浓盐酸少许,转动容器使其内部表面均沾有盐酸,数分钟后倾去盐酸,再以流水冲净,倒置于洗涤架上将水空干,即可使用。2、用过的玻璃器皿:凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿,使用后可随时冲洗,吸取过化学试剂的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定数量后再集中进行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必须经过适当消毒后,将污垢除去,用皂液洗刷,再用流水冲洗干净。、培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。连云港培养基制备器厂家
。液体培养基是培养基物理分类一种,是相对固体培养基而言的,是微生物或动植物细胞的液状培养基。镇江培养基制备器哪家质量好
培养基的配置应该注意的几大步骤:常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。(1)平皿用纸或布包好,或装在金属盒内,于121℃高压蒸汽菌3min后烘干,备用。(2)试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好,再用布或报纸包扎好,121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干,备用。(3)吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽内的气体污染),然后用纸包后或装入金属吸管筒内,于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干,备用。其他玻璃器皿均应按上法处理,也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后,备用。镇江培养基制备器哪家质量好
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