在生物工艺流程中,需要使用核酸酶去除终产品中的核酸污染,而核酸酶作为外源成份,也需要在生产流程中去除。核酸酶去除工艺包括热灭活法、酶抑制剂、离子交换和亲合层析法等。AAV衣壳亚种之间因表面电荷的差异导致不同的的等电点,——空衣壳pI在6.3左右,包装了完整基因组DNA后的病毒颗粒pI大致为5.9。而来自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右,SAN HQ高盐核酸酶pI 9.6左右。因此,在同样的条件下,从AAV溶液中去除SAN HQ高盐核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易、更彻底。SAN HQ提高核酸污染去除效率,同时提高目标产物产量。海南高盐核酸酶

由于Triton X-100的降解产物对环境影响很大,自2023年12月22日起,欧盟将禁止使用Triton X-100生产试验性医疗产品等。请注意,含有≤0.1% (w/w) Triton X-100表面活性剂的物质不被视为危险物质,仍然可以进口到欧洲。由于该产品通常不用作生物制品或先进疗法的赋形剂,因此在欧洲以外生产的大多数药物在其开发商考虑在欧盟生产之前不需要生产变更。此外,已经获得许可的药物及其赋形剂不受该规则约束。所有其它希望在欧盟生产生物药物和研究产品的生产商都必须寻求Triton X-100的替代品并验证它们对各自用途的适用性。为了支持客户项目更好在欧盟区域申报上市,ArcticZymes Technologies于2019年推出了Triton X-100 Free的SAN HQ TF高盐核酸酶。与SAN HQ高盐核酸酶相比,SAN HQ TF用Tween-20替代了Triton X-100,酶活性能完全一致。目前,SAN HQ和SAN HQ TF都有项目在临床阶段,相关性能都得到了行业客户的认可。四川ArcticZymes高盐核酸酶SAN HQ是生物工艺流程中去除核酸污染的理想选择。

SANHQ(Bioprocessinggrade)是一种新型的、耐高盐的工程化内切酶。该酶在0.5MNaCl条件下具有良好活性,是大规模生产及生物工艺流程中去除核酸污染的理想选择。盐浓度是纯化工艺的重要参数之一,高盐浓度能够减少聚集、增加目标产物溶解度及提高目标产物产量。高盐浓度下,宿主DNA与蛋白质能够完全解离,从而更容易被降解。在药物(如抗体、病毒载体药物等)的生产及工艺流程中,核酸杂质的去除至关重要。US FDA指南要求:zhiliao用重组生物制品终产品中,核酸杂质含量低于100 pg/dose。SAN HQ独特的耐高盐特性、合规的生产体系标准,让其成为大规模生产工艺中核酸处理的理想选择。
ArcticZymes厂家对盐活性核酸酶系列产品(Salt Active Nucleases,SANs)的生产及质控,在符合ISO13485:2016体系基础上,增加了cGMP质控标准,如microbes、endotoxin、蛋白酶等,符合USP-EP要求。厂家提供HQ级别和GMP级别的SAN HQ高盐核酸酶和M-SAN HQ中盐核酸酶,从成本角度分别满足临床前和早期临床阶段、商业化大规模生产阶段的需求;且GMP级SAN HQ高盐核酸酶已完成在FDA的药物主文件(Drug Master File, DMF)申报备案,助力加快药物申报流程。ArcticZymes致力于提供高质量产品,具有好的批间一致性、稳定可靠的质量。

ArcticZymes Technologies致力于提供高质量产品,具有良好的批间一致性、稳定可靠的质量、及时的文件及技术支持。ArcticZymes所有产品的开发、生产及销售等都符合ISO13485:2016质量管理体系标准;鉴于生物制品更严格的质控要求,厂家对盐活性核酸酶系列产品(Salt Active Nucleases,SANs)的生产及质控,在符合ISO13485:2016体系基础上,增加了cGMP相应要求,如生产用原辅料是Non-animal和Non-plant来源的,终产品经过0.22µm过滤sterilization,放行检测包括microbes、fungus及内毒检测等,所有标准符合USP-EP要求。在如抗体、病毒载体药物等的生产工艺流程中,核酸杂质的去除至关重要。湖南SAN HQ高盐核酸酶70921-202
GMP级别SAN HQ提供了更多的监管保证。海南高盐核酸酶
Mayer等(2023)以measles virus(麻疹病毒,MV)为例,评估了四种不同核酸酶(BenzonaseTM、DeneraseTM、M-SAN HQ中盐核酸酶及SAN HQ高盐核酸酶)对于染色质DNA去除的效果。Vero细胞通过微载体贴壁培养来生产麻疹病毒MV,72hr后收获上清液,使用3µm cellulose filter(Sartorius)过滤后分装多份,置于-80℃保存便于后续使用。在解冻后的上清中调节对应盐浓度,并加入50 U/ml核酸酶,37℃孵育2hr进行消化,消化后留样;将消化后上清液过Capto Core 700 (Cytiva)柱子,收集流穿液,之后洗杂、洗脱,并分别留样。通过SDS-PAGE分析发现,相比Benzonase等传统核酸酶,在生理盐条件下M-SAN HQ中盐核酸酶更高效将染色质DNA剪切成更小片段,甚至将核小体DNA剪切更彻底。海南高盐核酸酶
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