DNA宏基因组测序的病原检出率均高于培养等传统方法,表现出良好的诊断性能。DNA宏基因组测序已被用于诊断各种临床传染性疾病,例如血液传染,肺和肺外结核(TB),侵袭性传染,寄生虫传染,传染性心内膜炎,复杂性肺炎,尿路传染和实体移植后的继发传染等,为临床传染性疾病的诊断和提供了新的前景。尽管一项多中心的回顾性研究表明,目前使用mcfDNA宏基因组测序作为诊断常见传染疾病的工具的优势并不明显,但它可以提供比传统方法更快、更早的诊断结果,以及在的升级/降级方面具有重要意义。宏基因组测序克服了传统的纯培养方法的技术限制。武汉微生物多样性测序服务
人类想要征服新发人畜共患病,只有提前发掘潜在的新的致病的病原,并针对新病原进行基因组分析、流行病学调查、疫苗和抗体的开发等方面的研究。病毒宏基因组学是在宏基因组学基础上发展起来研究特定环境中病毒的新兴技术,该技术结合深度测序技术(第二代、第三代测序技术)已经在人类、动物、特定环境中挖掘出大量的新病毒,该技术不依赖于病毒培养及病毒序列,在国内外被普遍应用于新发人畜共患病病原的挖掘与临床诊断。总之,随着病毒宏基因组学与各种新的分子生物学技术及深度测序技术的结合,该技术展现了区别于传统病毒诊断技术的优势,而该技术对动物病毒的挖掘及其他领域的应用将更加普遍。四川宏病毒组分析找哪家全基因组测序通过运用新一代高通量DNA测序仪,进行10到20倍覆盖率的个人全基因组测序。
宏病毒组其实就是病毒的宏基因组(meta-genomics),该技术是随着高通量测序技术的兴起而发展起来的。该技术主要是使用大量微生物群体样本的测序数据和生物信息学分析手段,以多种数据库为基础,进行群体的种类和功能分析。因此,它主要的应用场景在于微生物群体研究,如肠道微生物、皮肤微生物、口腔微生物、水体微生物、土壤微生物等。一直以来宏基因组技术都是在细菌领域使用,病毒的样本收集困难、文库构建繁琐、数据库不完善,因此宏基因组技术未能获得普遍应用。上海探普生物科技有限公司立志专门解决病毒方向的基因组研究难题,开发了整套的样本处理和生信分析流程,基于这套流程,研究者们想对样本进行宏病毒组测序就很容易实现了。
基因测序技术在此次中起到了至关重要的作用,我国科研单位在一个月之内迅速发现了正确的致病病毒并完成测序,得到了WHO的赞许。我国科学研究者对病毒序列、变异、核酸检测手段的分享也为全世界应对COVID-19带来了极有力的支持。在病毒检测过程中,一种测序技术获得了市场的普遍关注,这个技术就是宏基因组测序(mNGS)技术。宏基因组学(Metagenomics),是以特定环境样品中整个微生物群落基因组作为研究对象,无需分离培养,直接提取环境样本的DNA进行高通量测序。对于临床而言,mNGS可以准确的分析患者样本全部微生物,这一点对于传染性疾病的病原体研究具有极高的应用价值。微生物鉴定可以用微生物对噬菌体的敏感性作为指标来鉴定微生物的种属。
病原宏基因组测序(mNGS)可与实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术联合使用,实现优势互补。“RT-PCR由于其检测速度快、操作流程简单、成本较低的原因,更适用于大规模的筛查中,以便快速获得是否为核酸阳性的初步证据,而对于RT-PCR检测阴性、但临床表型高度疑似的患者,利用mNGS进一步确认可有效提高检测结果的可靠性,并获得是否有其他病原体传染的信息。”对于RT-PCR检测阳性的样本,也可以进一步利用mNGS进行病毒全序列的分析,从而帮助获得病毒是否发生变异的信息,为疫苗、药物研发等方面提供可靠证据。高通量测序技术问世,给微生物鉴别打开一扇新的大门。土壤微生物多样性测序服务公司
由于各种微生物所具有的酶系统不完全相同,对许多物质的分解能力亦不一致。武汉微生物多样性测序服务
病毒宏基因组学文库中包含兆级的短序列片段(Reads)。通过不同的序列拼接软件将Reads拼接较长的DNA序列片断(Contigs)。数据组装可通过K-mer分析评估各个样品的测序深度,通过对SOAPdenovo设置不同K值,筛选较好组装结果,对较好组装结果进行校正,并统计Reads利用率。接着利用已测序生物体的DNA序列构建数据库,将拼接后的Contigs通过不同的鉴定方案,与数据库里的DNA序列信息进行比对,确定该序列来自的生物群落,筛选有用的基因信息。此外,还可以用一些工具对序列进行基因预测(如Metagene、GeneMark,FragGeneScan等)。武汉微生物多样性测序服务