培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源（生长因子）等。（1）碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。（2）氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件。培养基制备器培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，较好一次完成，不要中断。上海培养基制备器定制
制备培养基的操作要点：用过的玻璃器皿：凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。若用皂液未能洗净的器皿，可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸，其作用是将有机物氧化成可溶性物质，以便冲洗。洗液有很强的腐蚀作用，使用时应特别小心，避免溅到衣服、身体和其他物品上。云南琼脂灭菌 培养基制备器培养基制备器具有液量分配，时间分配，复制分配三种工作模式。
培养基的使用：1.琼脂培养基的融化：将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min），以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温，冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用，放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基，应根据相关标准，缩短融化后放置的时间。
实验室在制作培养基时候的经验总结：培养基分装：培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为恰当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基较终pH之用。制备培养基的操作要点：半固体培养基如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中，就制成了半固体培养基。
培养基的实验室制备：正确制备培养基时微生物检验的较基础步骤之一。使用脱水培养基和其他成分，尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时，应严格按照厂商提供的使用说明配置。记录所有相关数据，如质量/体积、pH、制备日期、灭菌条件和制备人员等。使用各别成分制备培养基时,应按照配方准确配制,记录所有细节信息,如;培养基名称和类型及试剂级别、每个成分物质含量、制造商、批号、pH、培养基体积(分装体积)、无菌措施(包括实施的方式、温度及时间)、配置日期、人员等,以便潮源。液体培养基：为确定液体培养基的生长率，应接种适当的培养物。河南培养基消毒 培养基制备器
制备培养基的操作要点：液体培养基所配制的培养基是液态的。上海培养基制备器定制
简单制作培养基，需调整培养基成分，介质中使用的化学物质应该是化学纯品，铜锅或铁锅易导致铜、铁混入培养基，使细菌难以繁殖。用不锈钢锅加热溶解较为适宜。溶解于水的锅子，可用温水加热，随时搅拌，防止结焦。若发现结焦，则不能使用介质，需重新调配。在溶解大多数固体成分之后，用少量热将其全部溶解，直到沸腾。简单制作培养基，需调整培养基的pH值，由于加热消毒过程中培养基的pH值会发生变化，因此应在培养基组分完全溶解后，调整pH值。举例来说，牛肉汁的pH值下降了0.2左右，而肠浸出物的pH值则明显上升。所以，在这一步中，操作者要注重不断探索经验，掌握培养基的很终pH值，保证培养基的质量。在调整pH值后，要将其煮沸几分钟，以利于培养基沉淀。上海培养基制备器定制
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