培养基灭菌方法有哪五种类型：1、辐射灭菌原理方法：辐射灭菌原理：是用高能电磁辐射和细菌核酸的光化学反应引起细菌死亡。常用的是紫外线，X射线和伽马射线。主要用于室内空气和器皿的表面消毒。2、干热灭菌原理方法：干热灭菌原理：是采用高温氧化微生物，使蛋白质变性并浓缩电解质以杀死微生物。3、化药灭菌原理方法，化药灭菌原理：使用化药与微生物细胞中的成分发生反应，从而使蛋白质变性酶失活。4、过滤灭菌原理方法：过滤灭菌原理：是使用不能渗透的微生物滤膜进行灭菌。使用方法是使用0.01-0.45毫米的细孔滤膜对压缩空气，酶溶液和其他对热不稳定的复合溶液进行灭菌。5、湿热灭菌原理方法：在工业生产中，用于灭菌对于培养基，管道和设备，通常将蒸汽加热到一定温度并保持一段时间，这称为湿热灭菌。湿热灭菌原理：是直接用蒸汽进行灭菌。蒸汽冷凝后会释放出大量潜热。蒸汽具有强大的穿透力，破坏细菌蛋白质和核酸的化学键，使酶失活并杀死由于代谢紊乱引起的微生物。制备培养基的操作要点：固体培养基在液体培养基中加入适量的凝固剂即成固体培养基。宁夏不锈钢内桶培养基制备器
培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分（如小牛血清、NaHCO3等）是否被污染，均可用细菌、及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作（至少应在除菌后进行一次）。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自独自的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞（尤其是细胞库）的污染。福建自动搅拌培养基制备器培养基通常采用高压蒸汽灭菌。
培养基配制：配制用水，培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基：培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清：培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。
培养基的制备：（1）称量：根据培养基的配方,称取适量药品于搪瓷杯中;（2）溶解：用量筒量取所需水量,置电炉上加热,一边搅拌,至完全溶解,加热至沸腾,拔掉电源,待冷却;（3）分装：根据不同需要,立即趁热分装入三角瓶或试管中,分装三角瓶以不超过三角瓶一半为宜,分装试管一般为管长的1/5（需根据试管的大小而定）.液体培养基如乳糖胆盐发酵培养基约分装10毫升左右.（4）塞硅胶塞：装好培养基的试管应塞上硅胶塞,松紧合适,紧贴管壁,不留缝隙,约1/2塞入内,这样即可过滤空气,避免杂菌侵入,又可减缓培养基水分的蒸发.（5）包装：三角瓶棉塞头部应用锡箔纸包扎,试管集中于试管篓.2、无菌水的制备：（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸馏水（稀释水）装入试管中.（2）用100ml量筒量取95ml蒸馏水（稀释水）装入150ml的三角瓶中.可置少许玻璃珠于三角瓶内,防止暴沸.（3）量取240ml蒸馏水（稀释水）于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮纸包扎好,高压灭菌备用。培养基制备器完全称取完毕后，还应进行一次检查。
在制备培养基时，通常要考虑以下因素：1.缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用，因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。2.渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围，一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基，可通过测定渗透压防止3.粘度培养基的粘度主要受血清含量的影响，在多数情况下，对细胞生长没有什么影响。在搅拌条件下，用羧甲基纤维素增加培养基的粘度，可减轻细胞损害。这对在低血清浓度或无血清下条件下培养细胞显得尤为重要。培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。自动搅拌培养基制备器售后
培养基制备器温度和压力严格控制锁定装载舱口和外部盖子。宁夏不锈钢内桶培养基制备器
微生物检验培养基制备的要点：培养基溶化，将中海培养基纳入烧杯容器中，加小适量的水，缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂，则不需要对培养基加热；相反含有琼脂，就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。待培养基完全溶解后再加入适量的水搅拌均匀。如准备的北京中海培养基较多，在不锈钢锅中融化加热，可以用温水加热，需不停搅拌，防止焦化。如果不小心出现焦化现象，则制备好的培养基将无法使用，必须重新配制中海生物培养基。不要使用铜或铁容器溶解制备培养基，因为铜或铁容器可能会导致容器内培养基中铜、铁超标，影响实验结果，其中培养基中铜含量大于0.3毫克每升，细菌不适宜生长。铁含量超过0.14毫克每升，防止细菌产生有毒的。容易发生反应和沉淀的药物应单独溶解，然后加入培养基中，如磷酸氢二钾和硫酸镁。宁夏不锈钢内桶培养基制备器
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