高压灭菌器的灭菌注意事项：若灭菌锅内冷空气未排尽，则它受热后很快膨胀，压力上升，使压力与温度形成差异，这时虽然压力达到，而温度达不到规定的要求，产生压力虽高而实际灭菌温度低的假压现象，致使灭菌不彻底。排除冷空气也可采用集中排气法，即当压力达到0.049兆帕时打开排气阀排气，压力降到零再关闭排气阀升压灭菌。后一种方法只适合器皿、刀具、棉织物、口罩等，而料瓶、料袋，特别是液体培养基等不宜采用。因为容易造成袋膜胀破、瓶塞脱落、液体沸腾外溢。灭菌器的基本结构之干热灭菌器：蒸汽疏水管路、给水管路、回气管路。海南蒸汽灭菌器
高压灭菌器的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的原理。完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。高压灭菌放气有几种不同的做法，但目的都是要排净空气，使锅内均匀升温，保证灭菌彻底。常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0.05MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间。湖南脉动真空灭菌器灭菌器之高压蒸汽灭菌器注意事项：灭菌后操作。
柜式灭菌器的主要作用便是用于杀菌：1.间歇灭菌法：利用反复多次的流通蒸汽，以达到灭菌的目的。一般用流通蒸汽灭菌器，100℃加热15～30分钟，可杀死其中的繁殖体;但芽胞尚有残存。取出后放37℃孵箱过夜，使芽胞发育成繁殖体，次日再蒸一次，如此连续三次以上。本法适用于不耐高温的营养物(如血清培养基)的灭菌。2.巴氏消毒法(Pasteurization)：利用热力杀死液体中的病原菌或一般的杂菌，同时不致严重损害其质量的消耗方法。由巴斯德创用以消毒酒精类，故名。加温61.1～62.8℃半小时，或71.7℃15～30秒钟。常用于消毒牛奶和酒类等。
影响灭菌柜灭菌效果的因素：相对湿度：在热力灭菌中，水对杀灭细菌芽孢起着重要作用。与水相关的灭菌方式只有两种：湿热和干热。湿度达到饱和[相对湿度(RH)为(或aw=1.0)]时的灭菌方式称为湿热灭菌;相对湿度低于条件下的灭菌方式统称干热灭菌。实验数据表明，温度在90～125℃之间，相对湿度在20%～50%时，细菌芽孢较难杀灭;当相对湿度高于50%或低于20%时，则较易杀灭。这对选择灭菌条件具有指导意义。包藏在晶体或有机物内的芽孢，其耐热性通常明显高于一般非包藏态的芽孢。热力灭菌法是利用高温使菌体蛋白质凝固或变性，酶失去活性，代谢发生障碍，致细菌死亡。
高压灭菌器的注意事项：1.将需要灭菌的器械清洗、擦干、打包（包内放入指示卡）2.加水应在水位线范围内，加水不能太少，以免引起高压锅烧干或者爆裂。3.包的体积不宜过大，一般不超过30*30*30。4.消毒无菌纱布缸及换药碗等容器时，应将容器储槽打开。5.不同种类的灭菌物品一起进行灭菌时，注意将容器放在下面，布类物品放在上面。6.随时观察压力锅情况，观察有无漏气，压力是否达到等。7.放于加热器两侧进行烘干，不可直接放于烘干器上覆盖，以免发生意外。8.打开安全阀及放气阀，待气放尽后，拧开锅盖，取出无菌物品。9.无菌物品烘干后及时放入无菌柜内保存。手提式高压灭菌器为18L、24L、30L。山东进口灭菌器
高压灭菌器建议一个月打开一次仪器上方的安全阀和排气阀，以免造成锈蚀直致锈死而带来危险。海南蒸汽灭菌器
灭菌器之蒸汽灭菌器用法方法：加水至外筒内，被灭菌物品放入内筒。盖上灭菌器盖，拧紧螺旋使之密闭。灭菌器下用煤气或电炉等加热，同时打开排气阀门，排净其中冷空气，否则压力表上所示压力并非全部是蒸汽压力，灭菌将不完全。待冷空气全部排出后(即水蒸气从排气阀中连续排出时)，关闭排气阀。继续加热，待压力表渐渐升至所需压力时(一般是101.53kPa，即15磅/英寸2，温度为121.3℃)，调解炉火，保持压力和温度(注意压力不要过大，以免发生意外)，维持15~30min。灭菌时间到达后，停止加热，待压力降至零时，慢慢打开排气阀，排除余气，开盖取物。切不可在压力尚未降低为零时突然打开排气阀门，以免灭菌器中液体喷出。海南蒸汽灭菌器
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