高压灭菌锅中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。我们要知道，灭菌温度应是一个温度范围，而不是一个固定值。通常高压蒸汽灭菌温度是一个固定值，如试管斜面培养基和摇瓶液体培养基的灭菌要求为：121℃，20min，但在121℃只是灭菌温度的下限，实际的灭菌温度在121℃-124℃（或123℃）之间波动。如果是自动控温型灭菌锅，设定好灭菌温度下限为121℃后，当温度升到124℃（或123℃）时，自动断电停止加热，当温度降到121℃时，自动开始加热；如果是手动控温型灭菌锅，当温度升到124℃时，手动切断电源停止加热，当温度降到121℃时，手动接通电源开始加热。灭菌锅注意事项：严禁超温、超压使用灭菌锅。山东灭菌锅定制
高温高压灭菌锅正确使用:以手提式为例。1、准备。将高压灭菌锅放在2000瓦电炉上，或放在有足够火力的煤气灶、煤炉上，向锅内加水至水位标记线为止。将准备火菌的培养基及空玻璃器皿用牛皮纸包好，装入锅内套层中，物品放置不宜过多，过挤，锅内应留出三分之一空间。然后盖严锅盖，采用对角式均匀拧紧锅盖上的螺旋，关闭锅盖上的气阀。2、加热。点燃热源，开始加热。3、结束。待压力表降至“0”时，拧松螺旋，半开锅盖，用锅内余热烘干盖纸，10分钟后取出灭菌物品。甘肃灭菌锅安装调试杀菌锅的工作特点：降低了生产成本。
高压蒸汽灭菌具注意事项：合理计算灭菌时间。灭菌时间包括：穿透时间，从锅内达到灭菌温度开始计算时间，到锅内难达到的部位也达到此温度的时间；维持时间，即杀灭微生物所需时间，一般以杀灭嗜热脂肪杆菌芽胞所需时间来表示；安全时间，为使灭菌得到确切保证所需增加的时间。一般为热死亡时间的一半，其长短视消毒物品而定。对易导热的金属器材的灭菌，不需要安全时间。在灭菌时间内，要注意压力表，及时间调节进气量，以保持在的压力，维持到灭菌时间为止。在灭菌过程中，如有压力、温度下降，应重新升温升压，重新计时。
排气软管没有按要求插入灭菌筒的下部，或排气软管断裂、缺失。灭菌锅内的冷空气是通过排气软管排出的，上述情况将造成灭菌筒外的蒸汽直接经排气阀排出锅外，灭菌锅内的空气排放受阻。在升压前应将锅内冷空气排净，因空气是热不良导体，若不排净，冷空气就会聚集井滞留在灭菌锅中消毒筒的中下部，围绕在待灭菌物的周围。在这种情况下，假若锅内只排除一半空气，当压力表指针达到105Pa时，锅内实际温度只能达到112℃，比要求的121℃低9℃之多，将导致灭菌不彻底，可能造成大面积染菌。不同类型高压蒸汽灭菌锅对排放冷空气的不同要求。
高压消毒灭菌锅进行火菌处理后，可通过生物学监测的方法查看灭菌效果，具体步骤如下所述:使用活的细菌芽抱制成生物指示剂，其抗力均大于或等于各种致病微生物。在1个灭菌周期(灭莹时间3min)对嗜热脂肪杆菌（ATCC7953）芽孢未全部杀灭。经过1个周期后(灭菌时间5、7.9min)对嗜热脂肪杆菌(ATCC7953)芽孢全部杀灭。用生物指标剂来证明灭莹物品内微生物是否全部死亡，是判断灭菌是否合格的直接指标，也是可靠的监测方法。高压消毒灭菌锅所用的生物指示剂是用嗜热脂肪杆莹芽孢制备，干热灭菌和环氧乙烷灭菌所用生物指示剂则是以枯草杆菌黑色变种芽孢制备的。但由于使用生物指示剂操作复杂，几天后才能出结果，不适于日常监测。卧式高压锅可用于原种培养基、栽培种培养基及栽培料等的灭菌，适宜于大规模生产。河北灭菌锅
在使用高压蒸汽灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气的排除是否完全极为重要。山东灭菌锅定制
高压灭菌锅出现一直维持室温状态的情况:高压灭菌锅是现代实验室中高质性能的灭菌设备，仪器使用更加方便。系统自带灭菌程序，同时还能根据实际需要编写多个灭菌程序，使操作程序变得更为简单，不必因负载物的改变，而手动调整时间和温度.消毒和灭菌是微生物实验技术中较基本的操作技术，因此从事药品生产、检验的人员均应了解消毒和灭菌的基本概念、两者的关系，各自的应用方法及其意义，操作时应严格执行相关的操作规程，一方面确保生产与检验工作的效果，另一方面也是对自身安全的保护。对此可以打开高压灭菌锅侧，面板显示正常表明220V电源正常进入控制电路。将与加热管连接的电线拆下，用万用表检查加热管电阻，如阻值过大表明加热管内部断路，须更换。山东灭菌锅定制
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