培养基的重要性:培养基的质量是微生物实验室检测工作的基础,事关检测工作的准确性、可靠性,在微生物实验室检测工作中举足轻重。如果在工作中忽视任何一个环节的质量问题,都将导致检验结果科学性、客观性的偏离。因此,加强培养基的实验室质量控制,认真地做好培养基的质控工作,不断完善和提高培养基的质控水平,才能为微生物检测实验室提供高质量的培养基。灭菌,一般培养基采用湿热灭菌,即高压蒸汽灭菌。第五,pH测定,微生物必须在适宜的pH范围内才能正常生长繁殖或体现其生物特性。控制培养基的条件,控制培养基的pH 配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。云南实验室培养基制备器
微生物检验培养基制备的要点:对LST培养基进行灭菌时,发酵管内可能存在气泡。为了防止发酵管内形成气泡,可以采取以下措施:倒置的小管充满培养基,不留气泡,然后加入含有LST的试管中。在关闭杀菌锅的排气阀之前,将锅内的气体排空。试管塞不要塞得太紧。使用硅胶塞时,请勿使用橡胶塞。不可过早打开杀菌锅,等杀菌锅内的气压和温度降到与室温相同或相差不大时再打开杀菌锅。如果按照以上方法操作还有气泡,可以用水作为培养基组的对照试验。如果培养基组有气泡,对照组没有气泡,可以确定培养基本身原因。天津实验室培养基制备器全自动培养基制备仪主要特点:保证细菌不被引入容器中。
培养基制备程序:全自动培养基制备器可以快速的准备好灭菌,放入灭菌锅,“水套系统”里加入夹层水(灭菌锅与灭菌锅腔体之间的夹套水用于有效的热传导),加入培养基原料,准备启动灭菌程序。培养基可以直接在培养基制备器内悬浮溶解。强力磁力搅拌培养基在内腔里混合的均匀性得到确保,并避免凝结。培养基还可以选择使用水浴模式预先溶解。没有经过专门培训的人员由于直观的图形化界面也能够简单的进行操作。用户对于多达50个灭菌参数可以自定义设置,它们可以被储存起来并随时调用。
培养基的分装,应按使用的目的和要求,分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵,其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时,分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒,以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。培养基制备器通过分装口可以定量添加无菌添加剂。
加棉塞:分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。制作棉塞时,要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞。棉塞作成后,应迅速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,准备灭菌。培养基制备器分装好的培养基应立即进行灭菌。山西琼脂培养基 培养基制备器
培养基制备器放入烧杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,边加入边用玻璃棒搅拌。云南实验室培养基制备器
过滤:配成的培养基,若无特殊要求,可省略此步。若有沉淀或浑浊,需要澄清的,液体培养基可用滤纸过滤。而固体培养基可用中间夹一薄层脱脂棉的双层纱布过滤。如果过滤法还不能达到澄清的要求,则可用蛋清澄清法,即培养基加热冷却到50℃~60℃,装入三角瓶内(不超过容量的二分之一),按1000ml加入1个~2个鸡蛋的蛋清,用力摇晃3min~5min,高压蒸汽灭菌121℃、20min,取出趁热过滤即可。摆斜面:装在试管中的琼脂培养基,在灭菌完成后,趁热立即摆放在木棒(或玻璃棒)上,并完成适时地斜度,冷却后,琼脂凝固即成斜面。斜面长度不要超过试管的二分之一。云南实验室培养基制备器
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