全自动膜片钳的优势:自动化:抓取细胞、形成封接、破膜等整个实验操作全部自动化,极大的节约实验人员的时间精力。简约化:传统膜片钳所需要的显微镜、显微操作系统、微电极拉制仪,防震台、屏蔽网等全都不需要。效率高:是传统膜片钳实验效率的5-10倍。可靠性:实验结果轻松复制。经济实惠:药物消耗低,每次实验记录较低只需5μl内外液体。零技术门槛:无需膜片钳操作经验,轻松上手。高芯片封接:封接电阻可达1GΩ。确保实验可靠性。兼容性强:可与市场上大多数放大器兼容。应用范围广:除拥有传统膜片钳功能外,还可以对手动膜片钳无法涉及的亚细胞结构进行记录。扩展功能多:配套扩展设备丰富,如內灌流系统、温度控制系统、脂质体制备器等。膜片钳技术本质上也属于电压钳范畴。合肥医学电生理膜片钳供应商
膜片钳技术基本原理与特点:高阻封接技术还很大降低了电流记录的背景噪声,从而戏剧性地提高了时间、空间及电流分辨率,如时间分辨率可达10 μs、空间分辨率可达1平方微米及电流分辨率可达10-12 A。影响电流记录分辨率的背景噪声除了来自于膜片钳放大器本身外,比较主要还是信号源的热噪声。一般只有一个或几个通道,经这一个或几个通道流出的离子数量相对于整个细胞来讲很少,可以忽略,也就是说电极下的离子电流对整个细胞的静息电位的影响可以忽略,那么,只要保持电极内电位不变,则电极下的一小片细胞膜两侧的电位差就不变,从而实现电位固定。莆田神经生物学膜片钳成像方案膜片钳使用的注意事项:干燥季节请先用手触摸金属框架释放身体的静电。
膜片钳使用的注意事项:1.向玻璃微电极灌注内液时切勿灌太多(1cm左右为适),以防液体进入银丝底部增加噪声。2.安装玻璃微电极时,电极应与银丝平行,防止刮蹭银丝电极。3.玻璃微电极需先用甲醇浸泡,再用酒精灯微烧两端,使其平滑。4.换液时应时刻观察浴槽,防止液面过低或液体溢出污染镜头,很适液面为微高于出液口。5.浴槽及灌流系统用毕请及时清洗,防止长菌影响实验。6.打雷天气必须禁止膜片钳实验。7.干燥季节请先用手触摸金属框架释放身体的静电。8.每位实验者请在E盘建立自己的文件夹储存数据。
膜片钳技术—打开细胞电生理研究之门:膜片钳技术(patchclamptechniques)是采用钳制电压或电流的方法对生物膜上离子通道的电活动进行记录的微电极技术。膜片钳技术的原理:用一个尖锐端直径在1.5-3.0um的玻璃微电极接触细胞膜表面,通过负压吸引使电极尖锐端与细胞膜之间形成千兆欧姆以上的阻抗封接,此时电极尖锐端下的细胞膜小区域(膜片,patch)与其周围在电学上分隔,在此基础上固定(钳制,Clamp)电位,对此膜片上的离子通道的离子电流进行监测及记录。膜片钳使用操作注意:在仪器使用以前及使用之后按按照使用时长做好登记工作。
膜片钳法的各种模式:细胞吸附模式:将膜片微电极吸附在细胞膜上对但离子通道电流进行记录的模式。其优点是在细胞内环境保持正常的条件下可以对离子通道活动进行观察记录。但是由于不能认为直接地控制细胞内环境条件也不能确切的潘明细胞内点位,所以其缺点是不清楚膜片上的实效点位。膜内面向外模式:从细胞吸附模式将已形成巨阻抗封接的膜片微电极向上提起时,则膜片即从细胞体上被切割分隔下来,形成膜内面向外的模式。常规全细胞模式:在细胞吸附模式上将膜打穿成孔,记录膜片以外部位的全细胞膜的离子电流,这时全细胞模式。膜片钳和电压钳的区别:电位固定的细胞膜面积不同,进而所研究的离子通道数目不同。温州神经生物学膜片钳实验服务
全自动膜片钳系统技术指标:实验迅速,通量高。一般每天可达到50个实验数据左右。合肥医学电生理膜片钳供应商
全细胞膜片钳模式下有电压钳记录和电流钳记录两种。电压钳记录的原理与电压钳技术相似,但有所不同:首先,全细胞电压钳记录只使用单根电极,但在电学效果上同时实现了电压钳制和电流记录。其次,电压钳记录的电极不细胞,对细胞造成的损伤较小,因而能用于小细胞如神经元的研究。电流钳记录则是通过钳制电极电流来测量膜电位。电流钳在本质上也是电压钳位,它将差分放大器的输出电流与指令电流相比较,然后将这个差动输出施加到放大器前级的倒相端,通过高速反馈使得同相端的电压与其相等,无论电极电流是否为零,都能从输出电压得到膜电位的准确数值。合肥医学电生理膜片钳供应商
上海司鼎生物科技有限公司位于放鹤路1088号。公司业务分为免疫印迹(WB)技术服务,荧光定量PCR技术服务,膜片钳电生理技术服务,在体光纤成像记录技术服务等,目前不断进行创新和服务改进,为客户提供良好的产品和服务。公司将不断增强企业重点竞争力,努力学习行业知识,遵守行业规范,植根于医药健康行业的发展。司鼎生物秉承“客户为尊、服务为荣、创意为先、技术为实”的经营理念,全力打造公司的重点竞争力。
膜片钳操作实验:标本制备根据研究目的的不同,可采用不同的细胞组织,如心肌细胞、平滑肌细胞、细胞等,现在几乎可对各种细胞进行膜片钳的研究。对所采用的细胞,必须满足实验要求,一般多采用酶解分离法,也可采用细胞培养法;另外,由于与分子生物学技术的结合,现在也运用分子克隆技术表达不同的离子通道,如利用非洲爪蟾卵母细胞表达外源性基因等。电极在实验前要灌注电极液,由于电极较细,因此在充灌前,电极内液要用0.2 μm的滤膜进行过滤。一般电极充灌可分灌尖(tipfilling)和后充两步灌尖时将电极浸入内液中5s即可。用膜片钳技术可以直接观察和分辨单离子通道电流及其开闭时程。黄山药理学膜片钳应用膜片钳技术:膜...