胰蛋白酶(胰酶,Trypsin),CAS:9002-07-7,为蛋白酶的一种,EC3.4.4.4,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。来源于胰腺的一种丝氨酸蛋白酶,由223个氨基酸残基组成的单链多肽,底物特异性是带正电荷的赖氨酸和精氨酸侧链。胰酶主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端,当两者之一紧随为脯氨酸的情况除外。另外,当切割位点任一边紧邻酸性残基,胰酶水解速率也会减缓。在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散(将组织块制备成单个细胞悬液)以及传代细胞培养中,贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶,EDTA等,其功能主要是使细胞间的蛋白质(如细胞外基质)水解,使组织或贴壁细胞分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。胰蛋白酶的活性可以通过酶动力学实验来研究,以了解其催化机制和底物特异性。南京专业胰蛋白酶
在细胞培养中使用胰蛋白酶时,确实有一些特定的注意事项和技巧需要注意。以下是一些常见的建议:1.选择适当的胰蛋白酶浓度:胰蛋白酶的浓度应根据细胞类型和培养条件进行优化。浓度过高可能导致细胞损伤,而浓度过低则可能无法有效消化细胞聚集物。2.控制胰蛋白酶作用时间:胰蛋白酶的作用时间应根据细胞类型和实验需求进行优化。过长的作用时间可能导致细胞过度消化或损伤,而过短的作用时间可能无法有效分散细胞聚集物。3.适当的温度和pH条件:胰蛋白酶的活性受温度和pH的影响,因此应根据胰蛋白酶的合适温度和合适pH进行操作。一般来说,37°C和pH 7.4是常用的条件。4.避免过度操作:在使用胰蛋白酶时,应避免过度操作,以免对细胞造成不必要的损伤。可以通过观察细胞的形态和颗粒状态来判断是否已经达到理想的细胞分散程度。5.使用无血清培养基:在细胞培养中,使用无血清培养基可以减少胰蛋白酶和其他酶的干扰,提高细胞的生长和存活率。6.适当的终止胰蛋白酶作用:在完成细胞分散后,应及时终止胰蛋白酶的作用,以避免继续消化细胞。南京专业胰蛋白酶胰蛋白酶的活性受到pH值和温度的影响,适宜的工作条件是在碱性环境下。
胰蛋白酶大致可以分为两种,一种是传统使用的动物源性的胰蛋白酶,主要提取自牛或猪的胰腺组织,其缺点是可能会带来病毒污染的风险;另一种则是非动物源性胰酶,即利用基因重组技术生产的重组胰蛋白酶。早期的胰蛋白酶在生物制药的主要应用是胰岛素的生产,不过很快也在其他领域发光发热。重组胰蛋白酶是一种使用基因工程技术生产的酶。它是胰蛋白酶的一种形式,是在实验室中合成的,而不是从动物来源(例如猪或牛的胰腺)中提取的。重组胰蛋白酶具有许多潜在用途,包括用于生产药品、用作研究工具以及生物技术应用,例如蛋白类药物的生产、细胞的分离、疫苗生产以及用于细胞分析的组织样本的制备, 同时解决了传统使用的猪或牛胰蛋白酶可能带来病毒污染的风险。
国产胰蛋白酶在医药领域有广阔的应用,主要包括以下几个方面:1.消化系统疾病医疗:胰蛋白酶可用于医疗胰腺功能不全引起的消化不好,如胰腺炎、胰腺切除术后、胰腺囊肿等疾病。2.营养支持医疗:胰蛋白酶可用于提高肠道吸收能力,促进营养物质的消化和吸收,改善营养不良症状。3.肠道疾病医疗:胰蛋白酶可用于医疗肠道疾病,如肠道炎症、肠道手术后等,帮助恢复肠道功能。4.实验室研究:胰蛋白酶在实验室中也有普遍应用,用于消化蛋白质、DNA或RNA等生物大分子,以便进行后续的分析和研究。胰蛋白酶的活性受pH值的影响,适宜的pH范围为7-8,这也是人体小肠内的pH范围。
胰蛋白酶的剂量和用法通常是根据患者的具体情况和医生的建议来确定的。以下是一些常见的考虑因素:1.疾病类型:胰蛋白酶主要用于医疗胰腺功能不全或胰腺疾病,如胰腺炎、胰腺切除术后等。剂量的确定通常会考虑患者的胰腺功能状态和疾病的严重程度。2.消化能力:剂量的确定还会考虑患者的消化能力。有些患者可能需要较高剂量的胰蛋白酶来满足消化需求,而有些患者可能只需要较低剂量。3.食物类型和摄入量:剂量的确定还会考虑患者的饮食习惯和食物摄入量。不同类型和数量的食物可能需要不同的胰蛋白酶剂量来保证充分消化。4.反应和效果:剂量的确定还会根据患者的反应和效果进行调整。医生可能会根据患者的症状改变、体重变化和营养吸收情况来评估剂量的有效性,并进行相应的调整。胰蛋白酶可以帮助恢复肠道功能,改善肠道疾病患者的消化和吸收能力。浙江 StableCellTM胰蛋白酶多少度失活
胰蛋白酶在胰腺中产生,然后通过胰管进入小肠,发挥其消化作用。南京专业胰蛋白酶
注射用胰蛋白酶是一种通过注射途径给予的胰蛋白酶制剂。它是从动物(通常是猪)的胰腺中提取的胰蛋白酶,经过一系列的纯化和处理步骤后制成的药物。注射用胰蛋白酶主要用于医疗胰腺功能不全引起的消化不好。胰腺功能不全可能由胰腺炎、胰腺切除术后等原因引起,导致胰蛋白酶分泌不足,影响食物的消化和吸收。注射用胰蛋白酶可以通过注射进入体内,补充胰蛋白酶,帮助消化蛋白质、脂肪和碳水化合物,改善消化不好症状。注射用胰蛋白酶通常由医生根据患者的具体情况和需要来决定剂量和使用方法。它可以单独使用,也可以与其他药物一起使用,以达到更好的医疗效果。需要注意的是,注射用胰蛋白酶是药物,必须在医生的指导下使用。南京专业胰蛋白酶