多克隆抗体主要从动物免疫血清、恢复期患者血清或免疫接种人群的血清中获得。多克隆抗体的优势是:作用全方面,具有中和抗原、免疫调理、补体依赖的细胞毒作用(CDC)、ADCC等重要作用,而且来源普遍、制备简单。其缺点是:特异性不高、易发生交叉反应,不易大量制备,因而限制了其应用的范围。单克隆抗体解决多克隆抗体特异性不高的理想方法是制备识别单一表位特异性的抗体。如果能获得只针对单一表位的浆细胞克隆,并使其在体外扩增分泌抗体,就有可能获得单一表位特异性的抗体。然而,浆细胞在体外的寿命较短,难以培养。为克服这一缺点,Kohler和Milstein将可产生特异性抗体但短寿的B细胞与不产生抗体但长寿的骨髓瘤细胞融合,获得了可以产生单克隆抗体的杂交瘤细胞,从而建立了单克隆抗体制备技术。抗体能识别特定外来物的一个独特特征,该外来目标被称为抗原。深圳Prestige Antibodies抗体费用
多克隆抗体免疫动物:供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类,常选择家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小鼠等。动物的选择常根据抗体的用途和量来决定,也与抗原的性质有关。如要获得大量的抗体,多采用大动物;如要是获得直接标记诊断的抗体,则直接采用本动物;如要获得间接的标记诊断用抗体,则必须用异源动物制备抗体;如果难以获得的抗原,且抗体的需要量少,则可以采用纯系小鼠制备;一般实验室采用的抗体,多用兔和羊制备。免疫用的动物建议选择适龄的健康雄性动物,雌性动物特别是妊娠动物用于制备免疫抗体则非常不合适,有时甚至不产生抗体。Prestige抗体公司排行抗体药物是指利用抗体作为药物来调理疾病的一类新型药物。
抗体主要功能:中和有害素和阻止病原体入侵。识别并特异性结合抗原是抗体的主要功能,执行该功能的结构是抗体的V区,其中CDR部位在识别和结合特异性抗原中起决定性作用。抗体有单体、二聚体和五聚体,因此结合抗原表位的数目也不相同。抗体结合抗原表位的个数称为抗原结合价。Ig单体可结合2个抗原表位,为双价。SIgA是二聚体,可结合4个抗原表位,为4价。IgM是五聚体,理论上可以结合10个抗原,应该是10价,但由于立体构象的空间位阻,使IgM一般只能结合5个抗原表位,故为5价。
由杂交瘤单细胞克隆所产生的单克隆抗体只能特异性地与抗原分子上的一个抗原决定簇结合,抗体成分均一,抗体的结构、氨基酸顺序、特异性等都是一致的,且在培养过程中只要不发生变异,不同时间内分泌的抗体都能保持同样的结构和功能。用这种技术可按需要生产大量很纯的单一抗体,这些是用普通血清学方法所不能达到的。单克隆抗体的发展经历了鼠源性单克隆抗体、嵌合性单克隆抗体、人源化单克隆抗体和全人源单克隆抗体四个阶段。特别是全人源单克隆抗体,其可变区和恒定区都是人源的,这类抗体药物具有高亲和力、高特异性、几乎没有毒副作用等优点,克服了动物源抗体及嵌合抗体的各种缺点,成为调理性抗体药物发展的必然趋势。抗体调理在自身免疫性疾病等领域显示出了巨大的潜力。
抗体特性和功能:IgM占血清Ig总量的5%~10%,血清浓度约为1mg/ml。单体IgM以膜结合型表达于B细胞表面,构成B细胞抗原受体,只表达mlgM是未成熟B细胞的标志。分泌型IgM为五聚体,是分子量很大的Ig,沉降系数为19S,称为巨球蛋白(macroglobulin),一般不能通过血管壁,主要存在于血液中。五聚体IgM含有10个Fab段,具有很强的抗原结合能力;含有5个Fc段,比IgG更易启动补体。天然血型抗体为IgM,血型不匹配的输血,可导致严重的溶血反应。IgM是个体发育过程中很早合成和分泌的抗体,在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM,故脐带血lgM升高提示胎儿有宫内传染(如风疹病毒或巨细胞病毒等传染)。IgM也是初次体液免疫应答中很早出现的抗体,是机体抗传染免疫的“先头”;血清中IgM升高,提示新近发生传染,可用于传染的早期诊断。按抗原反应的凝集状态分为完全抗体IgM和不完全抗体IgG等。抗体在医疗实践中应用甚为普遍。Prestige抗体公司排行
特异性抗体可以针对不同的病原体或细胞表面分子,提供精确的免疫保护。深圳Prestige Antibodies抗体费用
多克隆抗体免疫动物:免疫用的动物建议选择适龄的健康雄性动物,雌性动物特别是妊娠动物用于制备免疫抗体则非常不合适,有时甚至不产生抗体。由于对免疫应答的个别差异,免疫时应同时选用数只动物进行免疫。 抗原是多种多样的,而且千差万别。就其化学成分而言,有蛋白质抗原、类脂抗原、多糖类抗原和核酸抗原等。就抗原性而言,有完全抗原和不完全抗原。为了获得较好的抗血清,建议是选用蛋白质抗原,如要制备用于筛选细菌表达的 cDNA 文库或免疫印迹的抗血清,建议选用可降解的蛋白质抗原。不同的抗原,其免疫原性的强弱均不相同,这种免疫原性的强弱取决于抗原的分子量、化学活性基团、立体结构、物理形状和弥散速度等。深圳Prestige Antibodies抗体费用